2009年仪器分析实验讲义修改版(5)

一、实验目的

1．了解仪器的性能与结构；熟悉仪器的操作步骤； 2．学会绘制荧光谱图：（即确定最大的λ3．定量测定奎宁的含量（标准曲线法） 二、实验原理

奎宁在稀酸溶液中是强荧光物质，它有两个激发波长250 nm和350 nm，荧光发射峰在450 nm。在低浓度时，荧光强度与荧光物质量浓度呈正比：If=kC 仪器与试剂 仪器：

日本岛津公司（SHIMADZU）RF-5301 PC型荧光分光光度计。950荧光光度计 试剂：

（1）100.0μg.mL-1奎宁储备液； （2）0.05 mol.L-1H2SO4溶液 三、实验步骤

和λEm）

EX

15

1．系列标准溶液的配制

取6只25mL的容量瓶，分别加入10.0μg?¤mL-1奎宁标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL，用0.05 mol.L-1H2SO4溶液稀释至刻度，摇匀。

2．绘制激发光谱和荧光发射光谱：（以1.2μg/mL的标样找最大λ和λEX） 将λ

固定在350 nm,选择合适的实验条件,在400～600 nm

Em

EX

范围内扫描即得荧光发射光谱(可排除λEX的干扰)，从谱图找出最大λ

Em

值；

固定在450 nm,选择合适的实验条件,在200～400 nm

EM

将λ

EM

范围内扫描即得荧光激发光谱(可排除λλ

EX

的干扰)，从谱图找出最大

值.

3．绘制标准曲线 将激发波长λ

固定在350 nm（或250 nm）左右处，荧光发

EX

射波长λEM固定在450 nm左右处，在选定条件下，测量系列标准溶液的荧光强度。 4．未知试样的测定

取4-5片奎宁药片，在研钵中研细，准确称取约0.1 g，用0.05 mol?¤L-1

16

H2SO4溶解，全部转移至l000 ml容量瓶中，以0.05 mol?¤L-1H2SO4

稀释至刻度，摇匀。取此溶液2.0mL于100 mL容量瓶中，用0.05 mol?¤L-1H2SO4溶液稀释至刻度，摇匀，在标准系列溶液同样条件下，测量试样的荧光发射强度。

5．绘制荧光强度If对奎宁溶液浓度C的标准曲线，并由标准曲线求算未知试样的浓度Conc (μg/mL)，计算药片中奎宁的质量分数。 ω奎宁 = Conc (μg/mL) × 1000mL × 50 / 0.1g 注意事项

奎宁溶液必须当天配制、避光保存。 四、思考题

1．能用0.05 mol.L-1 HCl来代替0.05 mol.L-1 H2SO4稀释溶液吗？为什么？

2．如何绘制激发光谱和荧光发射光谱？ 3．哪些因素可能会对奎宁荧光产生影响？ 实验十、 库仑分析法测定废水中的Cr6+ 一、 实验目的

1. 掌握库仑分析法的基本原理 2. 学会库仑定量分析的方法

17

3. 了解库仑仪的基本构造 二、 实验原理

本实验采用KLT-1型通用库仑仪，利用电解阴极Fe2+即： Fe3++e==Fe2+

产生的Fe2+与溶液中的Cr6+发生反应：

6Fe2++Cr2O72-+14H+==6Fe3++2Cr3++14H2O

终点时Cr6+全部反应完，有微量的Fe3+剩余，可以用亚铁灵

进行终点观察。

三、

实验仪器和药品

1. 仪器 KLT-1型通用库仑仪，通用电解池。采用铂片电极（工作电极），铂丝电极（辅助电极），铂指示电极，磁力搅拌器。

2. 试剂 电解液的配制：Cr标准溶液（100ppm）；（1+1）HNO3 四 、 操作步骤

1. 铂电极的预处理：将铂电极置于热的（1+1）HNO3中浸数分

钟，再用蒸馏水冲洗干净。

2. 于150ml烧杯中，加入电解液70ml，将电极插入电解池

中。准确移取2.00ml未知液于该电解池中，加入搅拌磁子。

3. 连接好仪器与电极连线（此实验中电解阴极为大面积双铂

片电极，指示电极为铂片及钨棒参比电极），接通库仑仪电源。

4. 主机上“电位补偿”电位器预先调至3左右，接下“启动”

18

旋钮，调节该旋钮，使50uA电表指在40左右，工作、停止开关置于工作，调节合适的搅拌速度，按下电解按钮，开始电解，终点时电表指针突然偏转，红灯亮，仪器数码管显示值即为电解电量（mQ）。

5. 再次准确移入2.00ml试液，按步骤4进行测定。重复测

定三次。

6. 测量完毕，关闭库仑仪电源，洗净电极并浸在蒸馏水中。 五、 结果处理

由法拉第电解定律计算未知试液中的Cr6+浓度。 附库仑计使用步骤

1、终点控制（指示）方式选择“电位下降”法，即按下“电流、电位”互锁琴键的“电位”挡；“上升、下降”互锁琴键的“下降”挡。

2、接好电解电极及指示电极线：此实验中电解阴极为有用电极（在此电极上产生滴定剂），即中二线黑线接双铂片（互联的两只面积大的铂片）的接线接头，红线接用砂芯与电解液隔离的铂丝阳极（内充3 mol L-1硫酸）的接线接头上。大二芯黑夹子夹钨棒参比电极（内充饱和硫酸钾溶液）。红夹子夹两片互相独立且面积较小的指示铂片中的任意一根，并把插头插入主机相应的插孔中。

3、向随机带电解池中加入70 mL的电解液，并将电解池置于搅拌器上。向池中加入适量待测溶液。开启搅拌器，调节好适当的搅拌速度。

19