生物制药考试重点(3)

融合 ②可是动物和植物细胞融合 33、类淋巴细胞干扰素制造

生产过程：异倍体细胞 →活化→逐级培养→丁酸钠起动→病毒诱生→→收集培养液→离心分离→纯化→沉析→超滤浓缩→凝胶过滤→亲和层析→抗体纯化→原液→成品。

34、组织纤溶酶原激活剂（t-PA)制造

工

艺

流

程

：

35、促红细胞生成素（EPO）制造P129

36、乙肝疫苗的制备：基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原（HbsAg）亚单位疫苗，它系采用现代生物技术将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建，克隆进入啤酒酵母菌或CHO细胞（中国仓鼠卵巢细胞）中，通过培养这种重组酵母菌或CHO细胞来表达乙肝表面抗原亚单位。发酵后经过细胞破碎和一系列微滤、超滤、硅胶吸附、洗脱等工序，再经过疏水层析，可使产品抗原蛋白纯度达99%以上。

37、免疫：机体的一种生理功能，机体依靠这一功能识别“自已”和“非已”成分，从而破坏与排斥进入机体的抗原物质或机体产生的异构物质 。

38、抗原 ：凡能激发机体产生体液免疫或（和）细胞免疫，并能与免疫应答的产物（抗体和致敏淋巴细胞）相结合的物质。对人有重要性的抗原包括微生物、

寄生虫、异物血清、异型红细胞、异体组织等。

39、抗原性：指抗原分子能与相应免疫应答的产物 ( 抗体或致敏淋巴细胞 ) ，在体内或体外发生特异性结合的性能。 又称为免疫原性。

40、免疫原性：指某一制品接种人体后诱导产生免疫应答的能力。

41、抗体：指能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。它是机体免疫系统受抗原物质刺激后，B淋巴细胞被活化、增殖和分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的球蛋白。

42、单克隆抗体 ：将抗体产生细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系，此细胞系能产生结构和特异性完全相同的高纯度抗体。由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体，又是由单一的 B 淋巴细胞克隆产生的，所以称为单克隆抗体。 43、简述单克隆抗体及其制备技术P145 制备技术：动物体内诱生法，体外培养法 44、简述HAT选择系统的原理。P146-147

HAT培养基：含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基。

原理：一个亲本细胞株为次黄嘌呤—鸟嘌呤—磷酸核糖转移酶缺陷型（HGPRT－），另一个亲本细胞株为胸腺嘧啶核苷激酶缺陷型（TK－），在含有次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T）的HAT选择培养液中，上述亲本细胞都无法生存，只有融合以后的杂种细胞才能生长，因此可有效地选择出杂种细胞。

45、基因工程抗体研究的主要目的有哪些？什么是Fab抗体和scFv抗体？P153-P154

目的：（1）降低单克隆抗体的鼠源性（2）降低抗体分子相对分子量，增加组织透过性

（3）双（多）价及双特异性抗体的构建（4）抗体融合蛋白的构建

Fab抗体；由重链Fd段和完整的轻链组成，两者通过一个链间二硫键连接，形

成异二聚体，是完整抗体分子的三分之一，仅有一个抗原结合位点。

scFv抗体：scFv是由一条连接肽将VH和VL连在一起所形成的两个可变区首尾相接的单一肽链，通过正确折叠，两个可变区由非共价键形成具有抗原结合功能的Fv段，此单一肽链的结构既有利于在大肠杆菌的表达和进行基因重组操作，也增加了Fv的稳定性。是目前报道最多的基因工程抗体。 46、免疫酶抗体诊断试剂工作原理

酶标抗体与抗原发生特异结合，当加入酶的底物时，底物在酶的催化作用下，发生组化反应，产生有色物质。在光学显微镜下就可以观察。常用的酶是辣根过氧化物酶（HRP），底物为二氨基联苯胺（DAB） 47、抗体导向酶-前药疗法的工作原理

前药是一类本身无活性或活性很低，但在体内可转化为活性物质的药物。 单抗与前药专一性活化酶交联并将其选择性地结合于肿瘤部位，使前药可以区域特异性地在肿瘤组织内转化为活性细胞毒分子，有效解决了药物在肿瘤组织内浓度过低和对正常组织损伤问题。

48、植物细胞工程制药：以植物细胞为基本单位，应用细胞生物学、分子生物学等理论和技术，在离体条件下进行培养、繁殖或人为的精细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而改良品种、制造新品种、加速繁育植物个体或获得有用物质的一门科学或技术称为植物细胞工程。 49、外植体P178

50、微生物和植物的原生质体P180-181

植物的原生质体:指将植物细胞壁去掉后得到的裸露的球形细胞。 51、继代培养:P178

52、各种植物细胞培养的生物反应器的特点是什么？P201

（1）机械搅拌式生物反应器：有较大的操作范围，混合程度高，适应性广，剪切 力大，容易损伤细胞。（2）鼓泡式生物反应器：优于机械搅拌式反应器。但由于鼓泡式反应器对氧的利 用率较低，如果用较大通气量，则产生的剪切力会损伤细胞。 （3）气升式生物反应器：广泛应用于植物细胞培养的研究和生产，最高细胞浓度 和最短倍增时间可从气升罐中得到。（4）转鼓式生物反应器：生长速率高，其氧的传递及剪切力对细胞的伤害水平方 面均优于气升式反应器。（5）固定化细胞反应器：可保护细胞免受剪切，可长时间重复使用，易于实现 细 胞的高密度培养，细胞接触良好，易于分化，有利于次级代谢产物的合成，减少细胞的遗传不稳定 性，易于实现连续化操作。 53、模拟酶 P235

54、抗体酶：P252又称催化性抗体,是一类具有生物催化功能的抗体分子。抗体酶是集抗体多样性和酶分子高速催化效能两特点为一体，设计出的蛋白质新产品，也是生物学和化学相互渗透、密切合成的产物。

55、固定化酶：限制或固定于特定空间位置的酶，即经物理化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。 56、酶的化学修饰：P242通过主链的切割、剪接和侧链基团的化学修饰对酶蛋白进行分子改造，以改变其理化性质及生物活性。称为酶分子化学修饰。 57、有机相中生物催化反应的特点

（1）可进行水解反应的逆反应，如酯、肽合成，转酯反应（2）热稳定性比水中高

（3）在非水系统内酶不溶于有机相，容易回收和反复使用（4）改变底物的专