环孢素A丙烯酸树脂L100纳米粒的研究 - 图文(5)

苏州大学硕士学位论文 第一章 环孢素A纳米粒的制备工艺

3. X衍射图

对CyA（A）、Eudragit L100和P188的物理混匀物（B）、Eudragit L100、P188和药物的物理混匀物（C）及CyA-L100-NP（D）进行X衍射。条件为：Cu靶/石墨单色器,电压30kV,电流20mA,扫描速度0.1°/s,采样时间1s,扫描范围4.8-50℃，X衍射图见图1-6。

图1-6X-衍射图：(A) CyA； (B) Eudragit L100和P188的物理混匀物；(C) Eudragit L100、

P188和药物的物理混匀物；(D) CyA-L100-NP

Fig 1-6 X-ray diffraction of (A) CyA； (B) physical mixture of Eudragit L100 and P188； (C)

physical mixture of CyA,P188,Eudragit L100；(D) CyA-L100-NP

§1.3 讨论与小结

1. 国内外文献报道环孢素A的柱效与温度呈正比,在常温下测定峰形较钝,柱效低,随着温度的升高柱效逐渐上升,一般测定温度在70-75℃之间。本文采用70℃柱温来测定环孢素A，理论塔板数＞1000。文献报道的流动相通常有二元,三元流动相,本文尝试了流动相①甲醇:水(85:15),②乙腈:水(80:20),③乙腈:甲醇:水=80:10:10,在流速为1.0ml/min时,流动相③药物保留时间最短,柱效最高,有利于节约时间及试剂。

2. 包封率的测定方法主要有透析法,超滤法,离心法等,本文尝试了超滤法,发现超滤板对药物有很强的阻滞作用,游离药物不易透过。因而采用离心法。按文献

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苏州大学硕士学位论文 第一章 环孢素A纳米粒的制备工艺

方法[5]纳米粒仅分层，界面模糊。实际实验中发现在离心力为250000×g条件下离心2h，纳米粒和药物达到了较佳分离。

3. 制备纳米粒的方法有乳化-溶剂蒸发法、乳化-溶剂扩散法、聚合法、薄膜-超声法、高压乳匀法等等。本文参考相关文献，采用改良的乳化溶剂扩散法来制备纳米粒，所得纳米粒其平均粒径可控制在约40nm，且操作简单，重现性好，适用于脂溶性药物制备纳米粒。

4. 由于纳米粒的质量涉及其包封率，载药量，收率以及粒径大小和分布等多种指标，均匀试验设计筛选出多因素多水平的处方工艺时，根据纳米粒的质量控制要求采用多指标综合评分，即按照每项指标对质量控制体系的贡献大小进行分级，并确定分值。同一因素中数值最大者为满分，其它因素以最大值之比进行评分，因此所得指标的分值及总分均具有客观性。均匀设计得出的最佳因素。 §1.4总结

本文建立的环孢素A体外分析方法可以快速准确测定纳米粒胶体溶液中环孢素A的含量，采用改良的乳化溶剂扩散法并通过均匀设计来优化的所制备的纳米粒粒径在40nm左右，回收率大于90%，包封率高达99.6%，载药量约为15.37%，结果较好。通过电镜照片可知，纳米粒粒子小，呈圆形或椭圆形，分布均匀。由X-衍射图可知环孢素A被包裹于纳米粒中，不再显示药物峰。

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苏州大学硕士学位论文 第二章 环孢素A纳米粒稳定性及冻干工艺的初步研究

第二章 环孢素A纳米粒稳定性及冻干工艺

的初步研究

纳米粒系统属于高度分散的胶体体系，具有较大的表面自由能，在水溶液中长期贮存易出现聚集和粒径增大的现象，为了提高纳米粒的贮存稳定性，常用冷冻干燥技术对纳米粒混悬液进行干燥得到固体冻干品。本文考察了温度对纳米粒溶液贮存稳定性的影响并初步研究了纳米粒冻干工艺。

§2.1实验材料与仪器 1.材料

CyA-L100-NP纳米粒溶液（自制）；乙腈、甲醇均为色谱纯（国药集团化学试剂有限公司）；水系三蒸水；无水乙醇，海藻糖，葡萄糖，甘露醇，山梨醇，蔗糖，乳糖均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。 2.仪器

Vivaflow超滤机(satoris,德国) ；PB203-N电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；SHZ-82 恒温震荡器（金坛市福华仪器有限公司）；85-2A恒温磁力搅拌器（金坛市福华仪器有限公司）；KQ3200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Zetasizer 3000HS激光粒度分析仪（马尔文，英国）；Optima Max 超速冷冻离心机(贝克曼库尔特有限公司)；LG-5真空冷冻干燥机（上海市离心机械研究所）；LC-10A高效液相色谱(日本岛津）；YG120药物光照实验箱（上海恒谊制药有限公司）

§2.2 方法与结果

一、环孢素A纳米粒溶液稳定性实验[20]

制备了三个批号的环孢素A纳米粒溶液，将其分装于西林瓶中，密封，分别置于4℃冰箱，25℃室温下以及40℃恒温烘箱中，于0，0.5，1，1.5，2月各取出样品测定其粒径,含量及包封率，观察温度对纳米粒贮存稳定性的影响，采用spss统计软件处理数据，结果见表2-1至表2-3。

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苏州大学硕士学位论文 第二章 环孢素A纳米粒稳定性及冻干工艺的初步研究

表2-1 纳米粒溶液的粒径

Tab 2-1 The particle size of CyA-L100-NP solution

Time (month) 0 0.5 1 1.5 2 *: P＜0.05；**:P＜0.01

表2-2 纳米粒溶液的含量

Tab 2-2 The concentration of CyA-L100-NP solution

Time (month)

0

Concentration（μg/mL）

NO.

4℃ 1178.59 986.66 1104.57 1192.44 978.50 1091.22 1212.20 1020.52 1121.51 1163.41 960.40 1094.69 1114.60 918.04 1042.73

25℃ 1178.59 986.66 1104.57 1178.83 932.27 1129.77 1224.00 997.09 1154.44 1281.67 970.48 1115.79 1111.22 916.98 1003.56

40℃ 1178.59 986.66 1104.57 1048.35 993.71 1154.64 1172.83 1011.86 1149.76 1166.53 967.19 1138.60 1057.65 877.89 1000.89

Particle size(nm)

NO. 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 4℃ 46.3 43.72 43.05 50.85 38.33 40.61 45.74 41.82 51.18 46.64 39.40 49.48 52.31 48.21 55.89 25℃ 46.3 43.72 43.05 40.87 38.13 51.64 43.55 38.61 52.73 49.61 50.73 46.07 52.02 50.32 52.27 40℃ 46.3 43.72 43.05 42.63 37.15 41.23 58.54* 51.77 47.55 63.09** 58.77 57.41 75.69** 64.35 67.05

0.5

1 1.5 2

1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3

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苏州大学硕士学位论文 第二章 环孢素A纳米粒稳定性及冻干工艺的初步研究

表2-3 纳米粒溶液的包封率

Tab 2-3 The drug envelopment rate of CyA-L100-NP

Time (month) 0 0.5 1 1.5 2 Drug envelopment rate（%）

NO. 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 4℃ 99.66 99.54 99.57 99.60 99.47 99.52 99.56 99.51 99.52 99.56 99.43 99.51 99.48 99.49 99.63 25℃ 99.66 99.54 99.57 99.67 99.52 99.61 99.63 99.49 99.52 99.59 99.45 99.57 97.78 99.47 99.60 40℃ 99.66 99.54 99.57 99.63 99.57 99.68 99.64 99.51 99.57 99.62 99.48 99.56 98.93 99.46 99.61 二、环孢素A纳米粒冻干工艺的初步研究 1.冷冻干燥简介[21]

冷冻干燥方法（freeze-drying）是指将含有大量水分的物质，预先进行降温冻结 …… 此处隐藏：2433字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……