系统性红斑狼疮

中图分类号：

UDC：

学校代码： 10055 密级：

公开

硕 士 学 位 论 文

白介素-6在小鼠系统性红斑狼疮模型中的作用 The Role of Interleukin-6 in a Mouse Model of Systemic Lupus

Erythematosus

论文作者 伍云云 指导教师 尹芝南 教授 申请学位 理学硕士 培养单位 生命科学学院 学科专业 微生物 研究方向 基础免疫 答辩委员会主席 评 阅 人

南开大学研究生院 二○一四年五月

南开大学学位论文使用授权书

根据《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》，我校的博士、硕士学位获得者均须向南开大学提交本人的学位论文纸质本及相应电子版。

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非公开学位论文，保密期限内不向外提交和提供服务，解密后提交和服务同公开论文。 论文电子版提交至校图书馆网站：http://202.113.20.161:8001/index.htm。

本人承诺：本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品，并已通过论文答辩；提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容一致，如因不同造成不良后果由本人自负。

本人同意遵守上述规定。本授权书签署一式两份，由研究生院和图书馆留存。

作者暨授权人签字：

20 年 月 日

南开大学研究生学位论文作者信息 论文题目 姓 名 论文类别 院/系/所 联系电话 通信地址(邮编)： 备注： 是否批准为非公开论文 学号 答辩日期 年 月 日 博士 □ 学历硕士□ 硕士专业学位□ 高校教师□ 同等学力硕士□ 专业 Email 注：本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写(一式两份)签字后交校图书馆，

非公开学位论文须附《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》。

南开大学学位论文原创性声明

本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。

学位论文作者签名： 年 月 日 非公开学位论文标注说明

(本页表中填写内容须打印)

根据南开大学有关规定，非公开学位论文须经指导教师同意、作者本人申请和相关部门批准方能标注。未经批准的均为公开学位论文，公开学位论文本说明为空白。 论文题目 申请密级 保密期限 审批表编号 □限制(≤2年) □秘密(≤10年) □机密(≤20年) 20 年 月 日至20 年 月 日 批准日期 20 年 月 日 南开大学学位评定委员会办公室盖章(有效)

注：限制★2年(可少于2年);秘密★10年(可少于10年);机密★20年(可少于20年)

Abstract

摘 要

目的：

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种自身免疫病，主要以自身抗体的形成，导致免疫复合物沉积，最终导致终末器官的损害为特征。系统性红斑狼疮可以累积全身各个器官，包括神经系统、消化系统、呼吸系统、血液系统、皮肤黏膜、骨骼肌肉、肝脏、肾脏等，其中以肾脏为主。SLE的致病原因非常复杂，包括基因和环境因素。由于SLE发病机制复杂，目前尚无有效方法根治SLE。在SLE中免疫系统紊乱，涉及天然免疫和适应性免疫。白介素-6（Interleukin-6，IL-6）是一种促炎性细胞因子，在炎症反应中发挥重要作用。已有研究报道在多种自身免疫疾病中，血清中的IL-6水平升高。本研究构建小鼠SLE模型，研究IL-6在SLE发病机制中的作用。 方法：

（1） 用ConA刺激C57小鼠脾脏淋巴细胞，提取淋巴细胞活化的DNA

（activated lymphocyte derived DNA ,ALD-DNA）。用ALA-DNA免疫C57小鼠，检测SLE发病相关标志：血清中dsDNA抗体的含量、尿蛋白的含量、肾脏病理切片。

（2） 按照上述方法免疫IL-6敲除小鼠，检测SLE发病相关标志。

（3） 在体内，ELISA检测免疫小鼠血清中抗dsDNA抗体、IL-6、IL-17和 TNF-a

的含量。在体外，用ALD-DNA刺激C57小鼠脾脏细胞，ELISA检测上清中dsDNA抗体、IL-6、IL-17和 TNF-a的含量。

（4） 取免疫小鼠脾脏和淋巴结细胞，流式细胞分析Foxp3+细胞含量和CD4+T

细胞活化状况。取免疫小鼠的脾脏细胞，做Treg和Th1的分化培养，流式细胞分析Foxp3+细胞含量。

（5） 取小鼠骨髓细胞做骨髓来源的树突状细胞（bone-marrow-derived dendritic

cells, BMDC）的分化培养，用ALD-DNA刺激BMDC细胞，检测上清中IL-6、TNF-a的含量。取C57小鼠脾脏细胞，用上清做Treg的分化培养，流式细胞分析Treg的含量。用IL-6、TNF-a抗体分别阻断，流式细胞分析Treg含量。

I

Abstract

结果：

（1） ALD-DNA免疫C57小鼠可以构建SLE模型，表现为血清中dsDNA抗体

的含量升高、尿蛋白的含量升高、肾脏病理切片损伤。 （2） ALD-DNA免疫的IL-6敲除小鼠不发病。

（3） 在体内，ALD-DNA免疫的C57小鼠可以产生大量的dsDNA抗体、IL-6；

在体外，ALD-DNA也可以刺激小鼠脾脏细胞产生大量dsDNA抗体、IL-6、IL-17和 TNF-a。

（4） ALD-DNA免疫的C57小鼠相对于IL-6敲除小鼠和对照小鼠，Treg细胞

含量较低，而CD4+T细胞活化程度增高。

（5） ALD-DNA可以刺激BMDC产生大量IL-6、TNF-a，上清共培养可以抑制

Treg的分化。阻断IL-6后Treg的含量升高，而阻断TNF-a后Treg含量无明显变化。 结论：

在ALD-DNA免疫小鼠构建的SLE模型中，BMDC可产生IL-6，且IL-6可以抑制Treg的分化，从而促进疾病的发展。IL-6的研究不仅加深了我们对SLE致病机制的理解，并且提供了SLE的检测和治疗位点。

关键词：SLE、 IL-6、Treg、BMDC

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