仪器分析实验讲义（修改）(1) - 图文(6)

5点，是否覆盖原数据选择“√”，按“确定” 后屏幕显示数据处理后的扫描谱图。

（7）在主菜单中选择“数据处理”中的“峰值判断”，便弹出如图5对话框。

“峰型选择”选择“对称峰”，“判峰方式”选择“手动”，按“确定”后，屏幕显示i~E曲线。用手按住鼠标右键，从峰的一个拐点拉出基线到峰的另一个拐点，然后松开鼠标右键，计算机根据用户给出的基线算出峰电流、峰电位、峰面积等数据。记录峰电流值。

（8）换一种标液，重复步骤（3）~（7），得其它标液的谱图。

（9）选择“定量方法”中的“标准曲线法”，弹出一对话框，如图6，输入相

应数据，“是否拟合直线”选“√”，点击“绘图”即可绘制工作曲线，并自动给出斜率、截距和相关系数。

3．标准加入法

（1） 往干燥的电解池中分别加入10.00mL Cu2+试液、1.0mL 1mol/L氨水及10% Na2SO3溶液0.8mL。重复工作曲线中的（3）~（7）步骤，得试液的峰电流值。

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（2）向上述溶液中继续加入1.0mL 5*10-4 mol/L Cu2+标液，重复工作曲线中的

（3）~（7）步骤，得试液加标液的峰电流值。 （3） 择“定量方法”中的“标准添加法”，弹出一对话框，见图7，输入相

应的数据，即可得到试液浓度。

五．数据处理

1．根据溶出曲线测量出各浓度下铜离子的相应峰电流，绘出工作曲线。由

试液的溶出峰电流，利用工作曲线法计算试液中铜离子浓度。 2．根据试液及标液加入后的两次峰电流值，利用标准加入法计算试液中铜

离子浓度。

六．问题讨论

1．为什么在电解富集时，必须不停地搅拌溶液？ 2．为什么溶出曲线呈峰状？

3．底液中氨水、Na2SO3各起什么作用？

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实验十三 苯、甲苯、乙苯、二甲苯异构体的分离及定性分析

一、实验目的

1. 掌握用保留值定性的方法。2. 了解影响定性准确度的因素。

二、实验原理

在一定的色谱条件下，组分有固定不变的保留值。在具备已知标准样情况下，

可采用保留值直接对照定性。

三、实验步骤

1、色谱条件 检测器：FID；毛细管色谱：OV-101 25m×0.025mm；柱温：70℃；

汽化室温度：150℃；检测室温度：150℃；H2：35mL/min；N2：45mL/min；空气：450mL/min。

2、操作步骤

① 按色谱仪器操作步骤启动仪器，调好色谱操作条件至基线走直。 ② 用微量注射器从色谱仪进样口注入0.04 uL苯、甲苯等混合样品，使其

在色谱图上得到彼此分离的色谱峰的保留时间（tR）。

③ 用微量注射器先后单独从色谱仪进样口注入0.02uL苯、甲苯、乙苯、邻

—二甲苯、对—二甲苯。并测定它们的保留时间（tR）。

四、数据记录

未知样品 峰号 tR（分） 已知样品

标样 tR（分） 苯 甲苯 乙苯 邻—二甲苯 对—二甲苯 1 2 3 4 5 五、定性结论： 六、思考题

1、本实验是用什么方法进行定性分析的，简单讨论其优缺点。 2、如果色谱操作条件不稳定对保留值有何影响？

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实验十四 归一化法测定甲苯、丙酮、庚烷混合物中各组份含量 一、实验目的

1. 掌握归一化法的方法原理。

2. 学会归一化法的计算。了解该法的优缺点。

二、实验原理（略） 三、实验步骤

1、色谱条件 检测器：FID；毛细管色谱：OV-101 25m×0.025mm；柱温：

80 ℃；汽化室温度：130℃；检测室温度：130℃；H2：35mL/min；N2：45mL/min；空气：450mL/min。放大器灵敏度：1000，衰减：1/16。

2、操作步骤

（1）按色谱仪器操作步骤启动仪器，调好色谱操作条件至基线走直。 （2）定性分析 按实验一的方法对混合物中各组份进行定性分析。 （3）绝对校正因子测定 按质量比配制标准样品，甲苯：丙酮：庚烷=1：

1：1（V：V：V）（用电子天平称取）在上述操作条件下，把配好的标准溶液进样0.1uL，记录峰面积，重复操作3次。

（4）定量分析 将混合样品在上述色谱条件下，进样0.1uL,记录峰面积，

重复操作3次。用归一化法测定各组份的含量。

四、数据记录

标准 峰面积 重量 （uv.s） （g） 甲苯 丙酮 庚烷 甲苯 丙酮 庚烷 合计 fi 样品 峰面积 含量 （uv.s） （%） 五、结果计算

1、 甲苯%=A甲苯f甲苯/（A

甲苯

f甲苯+ A丙酮f丙酮+ A庚烷f庚烷）×100%

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实验十五 维生素E胶丸中α-VE的定量

一、实验目的

了解HPLC定量分析的原理和定量方法。

二、实验原理 正相和反相HPLC都可以用来定量α-VE，本实验采用反相HPLC。反相HPLC

用的是非极性或弱极性填料分离柱(如ODS柱)，流动相是极性或比固定相极性强的溶剂(如甲醇、乙醇)，样品因在两相中的分配系数的差异而得到分离。定量方法采用外标法(3点)。α-VE胶丸中可能存在α、β、γ和δ等异构体中的某几种，还可能含有工艺中产生的副产物以及添加剂，这些物质不一定能全部同时分离，还可以根据各类物质的紫外吸收特性，选择合适的检测波长达到准确定量的目的。α-VE在220nm附近和292nm附近有两个最大吸收值，而且220nm的吸收比292nm的吸收更强，但在220nm附近很多溶剂和有机化合物都有吸收，对α-VE的定量有干扰，因此，通常选择干扰小的292nm作检测波长。

三、仪器与试剂

仪器：高效液相色谱仪：普通配置，带紫外检测器； 超声器：用于样品溶解，流动相脱气，玻璃器皿清洗。

试剂：α-VE标准：用无水乙醇配制浓度1000mg／L的α-VE储备液，并用无水乙醇稀释配制50，100和500mg/L的α-VE标准溶液；

市售VE胶丸：取l粒VE胶丸，用干净小刀割破胶丸，挤出中间的VE溶液，准确称量后用无水乙醇定容至25mL容量瓶中； 乙醇：纯度均为色谱纯。水为高纯水。

四、实验内容与步骤

(1)参照13．5．1．4节开机，并使仪器处于工作状态。色谱条件如下：Zorbax SB—C18色谱柱(4．6mm i.d．×250mm)；90％乙醇水溶液作流动相；流速0．8—1．2mL／min；柱温30℃；紫外检测波长292nm 6进样量20μL。 (2)待基线稳定后，进样VE胶丸样品溶液。

(3)待样品中所有色谱峰出完后，按“STOP”键停止分析。然后进样50mg/L的α-VE标准溶液，按保留时间确认VE胶丸样品中α-VE的峰位置。如果α-VE与

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邻近峰分离不完全，应适当调整流动相浓度或流速，使α-VE与其他峰完全分离。 (4)在所选定的条件下依次进样50，100和500mg/L的α-VE标准溶液。 (5)按工作站操作规程绘制工作曲线或计算校正因子，设置定量分析程序。 (6)按上述操作重复进样α-VE胶丸溶液两次，工作站会给出α-VE的分析结果。如果两次定量结果相差较大(如5％以上)，则再进样一次，取3次的平均值。

五、注意事项

(1)如果所用检测器灵敏度较高，可以将α-VE标准溶液浓度变为20，100和 200mg/L。

(2)如果已知在步骤(1)所定色谱条件下, α-VE与其他成分能完全分离，则可以省略步骤(2)和(3)。

六、数据处理

(1)分别根据50,100和500m …… 此处隐藏：1604字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……