妇科千金方化学成分的研究(2)

　　取Et OAc萃取物 （FKQJE, 142.2 g） 硅胶拌样后经硅胶 （1 kg, 200~300目） 柱色谱， 环己烷-Et OAc （9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5） 梯度洗脱， TLC检识合并相似流分， 共得到10个亚流分 （Fr.1~10） .Fr.1 （橙色油状物， 4.4 g） 经硅胶柱色谱 （环己烷-Et OAc 100:1, 50:1, 20:1） 梯度洗脱， TLC检识合并相同的流分， 得到3个流分 （Fr.1-1~Fr.1-3） .Fr.1-2 （1.2 g） 经硅胶柱色谱 （环己烷-Et OAc 20:1） 洗脱， 得到化合物1 （25 mg） 和2 （63 mg） .Fr.2 （1.2 g） 经硅胶柱色谱 （环己烷-乙酸乙酯20:1, 10:1, 5:1） 梯度洗脱， TLC检识合并相同流分， 得到3个流分 （Fr.2-1~Fr.2-3） .Fr.3 （2.8 g） 经硅胶柱色谱 （环己烷-Et OAc 20:1, 10:1, 5:1, 1:1） , 得到6个亚流分 （Fr.3-1~3-6） .Fr.3-2经SP-HPLC （ACN-H2O 30:70） 得到化合物3 （8 mg） 和4 （10 mg） .Fr.4为墨绿色粉末， 通过TLC检识， 在紫外灯下为一条粉色条带， 含有大量叶绿素， 故通过MCI柱色谱除去色素 （Me OH-H2O 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） , TLC检识合并相似流分， 共得到4个亚流分 （Fr.4-1~4-4） .Fr.4-1经SP-HPLC （ACN-H2O 50:50） 得到化合物5 （10mg） 和6 （45 mg） .Fr.4-4 （1.3 g） 经反复硅胶柱色谱， 最终经SP-HPLC （ACN-H2O 50:50） 得到化合物7 （12 mg） .Fr.5 （11 g） 通过MCI柱色谱除去色素 （Me OH-H2O 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） , TLC检识合并相似流分， 共得到3个亚流分 （Fr.5-1~5-3） .Fr.5-1 （1.1 g） 经反复硅胶柱色谱分离 （环己烷-Et OAc 30:1, 10:1, 5:1, 1:1） , 最终经SP-HPLC （CAN-H2O 45:55） 得到化合物8 （30 mg） , 9 （5 mg） , 10 （85 mg） .Fr.5-2 （3.5 g） 经反复硅胶柱色谱分离 （环己烷-Et OAc 30:1, 10:1, 5:1, 1:1） , 最终经SP-HPLC （ACN-H2O 35:65;流动相A） 得到化合物11 （112 mg） , 12 （10 mg） , 13 （12 mg） .Fr.5-3 （0.7 g） 经硅胶柱色谱分离 （环己烷-Et OAc 30:1, 10:1, 5:1, 1:1, v/v） , 得到2个亚流分 （Fr.5-3-1和5-3-2） , Fr.5-3-1经SP-HPLC （ACN-H2O 45:55） 得到化合物14 （4 mg） 和15 （6 mg） .Fr.5-3-2经SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到化合物16 （3 mg） .Fr.6 （3.2 g） 通过MCI柱色谱 （Me OH-H2O 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） 除色素， TLC检识合并相似流分， 共得到4个亚流分 （Fr.6-1~6-4） .Fr.6-2 （1.1 g） 经硅胶柱色谱分离， 最终经SP-HPLC （ACN-H2O 45:55） 得到化合物17 （3 mg） 和18 （6 mg） .Fr.6-3经SP-HPLC （ACN-H2O 35:65） 得到化合物19 （10 mg） .Fr.6-4经制备性TLC （环己烷-Et OAc 5:1） 得到化合物20 （10 mg） .Fr.7 （5.6 g） 通过MCI柱色谱除色素 （Me OH-H2O5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） , TLC检识合并相似流分， 共得到2亚流分 （Fr.7-1和7-2） .Fr.7-1中析出白色粉末， 为化合物21 （5 mg） .Fr.7-2经SP-HPLC （ACN-H2O 28:72） 得到化合物22 （6 mg） 和23 （10 mg） .

　　Bu OH萃取物 （FKQJB, 203.5 g） 加水溶解后， 采用D-101型大孔吸附树脂富集FKQJB化学成分， 并依次用3倍柱体积水， 10%, 30%, 50%, 75%, 95%乙醇水洗脱， 分别得到水 （FKQJB0, 100.3 g） 、10%乙醇 （FKQJB 15, 15.3 g） 、30%乙醇 （FKQJB 30, 21.4 g） 、50%乙醇 （FKQJB 50, 30.8 g） 、75%乙醇 （FKQJB 75, 11.2 g） 、95%乙醇 （FKQJB 95, 10.4 g） 水洗脱物。通过TLC检识对30%, 50%乙醇水洗脱物进行化学成分的分离。

　　取FKQJB 30部位 （21.4 g） 用ODS拌样后， 通过SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到5个亚流分 （Fr.1~Fr.5） .Fr.2 （0.3 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离 （Me OH洗脱） , 得到6个亚流分 （Fr.2-1~2-6） .Fr.2-6通过SP-HPLC （ACN-H2O-HCOOH 16:84:0.1） 得到化合物24 （35 mg） .Fr.3 （0.2 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离 （Me OH洗脱） , 得到4个亚流分 （Fr.3-1~3-4） .Fr.3-4通过SP-HPLC （ACN-H2O-HCOOH17:83:0.1） 得到化合物25 （8 mg） 和26 （35 mg） .

　　取FKQJB 50部位 （30.8 g） 用硅胶拌样后， 经硅胶柱色谱 （200~300目， 200 g） , CHCl3-Me OH-H2O （50:1:0, 30:1:0, 92.5:15:1.5, 85:15:1.5） 梯度洗脱， TLC检识合并相似流分， 共得到10个亚组分 （Fr.1~Fr.10） .Fr.2 （2.1 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离 （CHCl3-Me OH 1:1） , 得到4个亚流分 （Fr.2-1~2-4） .Fr.2-2通过SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到化合物27 （8 mg） , Fr.2-3通过SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到化合物28 （5 mg） .Fr.3 （1.5 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离 （CHCl3-Me OH 1:1;流动相B） , 得到4个亚流分 （Fr.3-1~3-4） .Fr.3-2 （65 mg） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 最终经SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到化合物29 （15 mg） .Fr.3-3 （125 mg） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 最终经SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到化合物30 （38 mg） .Fr.4 （2.7 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 得到5个亚流份 （Fr.4-1~4-5） .Fr.4-2 （0.7 g） 经Sephadex LH 20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 最终经SP-HPLC （CAN-H2O 25:75） 得到化合物31 （85 mg） 和32 （15 mg） .Fr.4-4 （212 mg） 经Sephadex LH-20柱色谱分离 （CHCl3-Me OH 1:1） , 最终经制备液相 （ACN-H2O 18:82） 得到化合物33 （5mg） .Fr.5 （2.2 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 得到6个亚流份 （Fr.5-1~5-6） .Fr.5-2 （1.3 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 最终经SP-HPLC, 流动相A洗脱， 得到化合物34 （30 mg） 和35 （25 mg） .Fr.6 （3.4 g） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 得到4个亚流分 （Fr.6-1~6-4） .Fr.6-3 （0.6 mg） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 最终经SP-HPLC （ACN-H2O23:77） 得到36 （15 mg） ） 和37 （30 mg） .Fr.6-4 （223 mg） 经Sephadex LH-20柱色谱分离， 流动相B洗脱， 最终经SP-HPLC （ACN-H2O 19:81） 得到化合物38 （24 mg） .

　　3结构鉴定

　　化合物1淡黄色油状物；EI-MS m/z 189[M+H];H-NMR （CDCl3, 400 MHz） δ：7.64 （1H, dd, J=7.9, 1.0 Hz, H-4） , 7.67 （1H, ddd, J=7.9, 7.7, 1.0 Hz, H-5） , 7.50 （1H, ddd, J=8.0, 7.7, 1.0 Hz, H-6） , 7.89 （1H, td, J=7.7 Hz, H-7） , 5.64 （1H, t, J=7.8 Hz, H-8） , 2.46 （2H, dd, J=15.0, 7.5 Hz, H2-9） , 1.55 （2H, dd, J=15.0, 7.4 Hz, H2-10） , 0.99 （3H, t, J=7.4 Hz, H3-11） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） δ：167.3 （C-1） , 139.6 （C-3） , 145.9 （C-3a） , 119.6 （C-4） , 134.2 （C-5） , 129.3 （C-6） , 125.3 （C-7） , 124.5 （C-7a） , 109.5 （C-8） , 27.8 （C-9） , 22.5 （C-10） , 13.8 （C-11） .NMR数据与文献[21]报道的数据对比， 鉴定化合物1为Z-3-丁烯基苯酞。 …… 此处隐藏：2436字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……