阿司匹林对胃癌细胞增殖和核因子κB表达的影响

阿司匹林对胃癌细胞增殖和核因子κB表达的影响

江苏大学

硕士学位论文

阿司匹林对胃癌细胞增殖和核因子κB表达的影响

姓名：姚红波

申请学位级别：硕士

专业：人体解剖与组织胚胎学

指导教师：陈永昌;李永金

20090526

阿司匹林对胃癌细胞增殖和核因子κB表达的影响

江苏大学硕士学位论文

摘要

研究目的：

探讨阿司匹林（ａｓｐｉｒｉｎ）对ＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ．８２３三种胃癌细胞株增殖的影响及其对核因子．ＫＢｐ６５（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ－ｒ．．Ｂ，ＮＦ．ｒ．Ｂｐ６５）表达的影响。

研究方法：

培养胃癌细胞ＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳ和ＢＧＣ．８２３，采用ＭＴＴ法检测阿司匹林在不同浓度和不同作用时间下对三种胃癌细胞株增殖的影响；采用ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳检测阿司匹林作用后的细胞凋亡；用流式细胞术检测不同浓度阿司匹林对细胞周期的影响；通过Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法和免疫荧光法检测阿司匹林对胃癌细胞ＮＦ．ＫＢｐ６５表达的影响。

研究结果：

（１）５．－ＩＮ匹林对胃癌细胞ＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ．８２３的增殖具有抑制作用，其抑制率随着阿司匹林作用浓度的增加和作用时间的延长而增大，１０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度组抑制率达最大值（尸＜０．０１）；各浓度组在作用达７２ｈ时抑制率最大俨＜Ｏ．０１）。

（２）胃癌细胞ＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ．８２３经１０ｍｍｏｌ／Ｌ阿司匹林作用不同时间后，细胞发生凋亡。

（３）流式细胞仪检测细胞周期结果显示，阿司匹林主要将细胞阻ｌ

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滞在ＤＮＡ合成前期（ＧｄＧｌ期）。随着阿司匹林作用浓度的增加，ＤＮＡ合成前期（ＧｄＧｌ期）细胞所占的比例逐渐增大（Ｐ＜Ｏ．０１），ＤＮＡ合成期（Ｓ期）细胞比例下降（Ｐ＜０．０１）。

（４）阿司匹林对ＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ－８２３细胞ＮＦ—ＫＢｐ６５的表达具有抑制作用，其中１．０ｍｍｏｌ／Ｌ，５．０ｍｍｏｌ／Ｌ和１０ｍｍｏｌ／Ｌ的５．－－ＩＮ匹林能明显抑制ＮＦ．ＫＢｐ６５的表达俨＜０．０１）；ＳＧＣ－７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ一８２３细胞经１０ｍｍｏｌ／Ｌ的阿司匹林分别作用６ｈ，１２ｈ，２４ｈ后，ＮＦ．ＫＢｐ６５的表达明显降低（尸＜Ｏ．０１）。

（５）免疫荧光检测结果显示，ＳＧＣ一７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ一８２３细胞的胞核内可见ＮＦ．１（Ｂｐ６５的表达（绿色或红色荧光），随着阿司匹林浓度的增加和作用时间的延长，ＮＦ．ｒＢｐ６５的表达减少，荧光强度逐渐减弱，在１０ｍｍｏｌ／Ｌ阿司匹林处理组和２４ｈ处理组，核内基本看不到ＮＦ—ｒｄ３ｐ６５的表达。

结论：

阿司匹林对胃癌细胞ＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳ，ＢＧＣ．８２３的增殖具有抑制作用；阿司匹林诱导胃癌细胞发生凋亡，其机制与抑制ＮＦ．ＫＢ的表达有关。ｐ６５

关键词：胃癌细胞，阿司匹林，核因子．１ｃＢ，细胞凋亡，增殖

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ＡＢＳＴＲＡＣＴ

ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ

ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｓｐｉｒｉｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＧＣ ７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ．８２３．

Ｍｅｔｈｏｄｓ

ＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ．８２３ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈａｓｐｉｒｉｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅａｎｄｅｆｆｅｃｔｏｆａｓｐｉｒｉｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＳＧＣ一７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ一８２３ｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙＭＴｒａｓｓａｙ．ＡｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＳＧＣ一７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ一８２３ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＤＮＡａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．ＥｆｆｅｃｔｏｆａｓｐｉｒｉｎｏｎｃｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆＳＧＣ一７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ－８２３ｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＣＭ）．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢｐ６５ｉｎＳＧＣ－７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ－８２３ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇａｎｄｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．

Ｒｅｓｕｌｔｓ

（１）ＡｓｐｉｒｉｎｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＧａｓｔｒｉｃＣａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＳＧＣ．７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ．８２３．Ａｓｔｈｅｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ，ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆａｓｐｉｒｉｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ．Ｔｈｅｍａｘｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅｏｃｃｕｒｒｅｄａｔｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１０ｍｍｏｌ／Ｌ俨＜Ｏ．０１）ａｎｄｅａｃｈｇｒｏｕｐｈａｄｔｈｅｍａｘｉｍａｌ

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ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｆｔｅｒｔｒｅａｔｉｎｇｆｏｒ２４ｈｏｕｒｓ．

（２）Ａｆｔｅｒｔｒｅａｔｉｎｇｗｉｔｈａｓｐｉｒｉｎｏｆ１０ｍｍｏｌ／Ｌｆｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＤＮＡａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｉｎＳＧＣ一７９０１ａｎｄＡＧＳａｎｄＢＧＣ．８２３．

ｂｌｏｃｋｅｄｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｉｎｔｈｅｔｈｅ（３）ＡｓｐｉｒｉｎｍａｉｎｌｙＧｄＧｌｐｈａｓｅ．Ａｓ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆａｓｐｉｒｉｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ，ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅＧｏ／Ｇ１ｐｈａｓｅｏｆｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄａｎｄｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅＳｐｈａｓｅｏｆｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄ．

（４）ＡｓｐｉｒｉｎｒｅｄｕｃｅｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＦ一１（Ｂｐ６５ｉｎＳＧＣ－７９０１，ＡＧＳａｎｄＢＧＣ－８２３．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｗｉｔｈａｓｐｒｉｎｏｆ１．０ｍｍｏｌ／Ｌ，５．０ｍｍｏｌ／Ｌａｎｄ１０ｍｍｏｌ／ＬａｌｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＦ—ＫＢｐ６５（Ｐ＜Ｏ．０１）．ＡｆｔｅｒｔｒｅａｔｉｎｇｗｉｔｈａｓｐｉｒｉｎｏｆｌＯｍｍｏｌ／Ｌｆｏｒ６ｈｏｕｒｓ，１２ｈｏｕｒｓａｎｄ２４ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＦ一心ｐ６５ｗａｓ

ｂｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄ（Ｐ＜Ｏ．０１）．（５）Ａｓ …… 此处隐藏：2131字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……