预防兽医学复习题答案汇总-整理

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1.概述结核杆菌菌体主要成份及其感染免疫过程。

答：菌体成份与作用

结核杆菌无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌体成份，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的毒力呈平行关系，含量愈高毒力愈强。

1．脂质（Lipide）：①磷脂能刺激单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶组织溶解不完全，形成干酷样坏死。②脂肪酸在脂质中比重较大，其中6,6～二分枝酰～a,a'～ 海澡糖(6,6～Dimycocyl～a,a'～D～trehalose)具有破坏细胞线粒体膜，毒害微粒体酶类，抑制中性粒细胞游走和吞噬作用，引起慢性肉牙肿。具有该物质的结核杆菌毒株，在液体培养基中能紧密粘成索状，故称为索状因子(cordfactor)。③蜡质D为胞壁中的主要成分，是一种肽糖脂(Piptidoglycolipids)与分枝菌酸(My-colic acid)复合物，能引起迟发型变态反应，并具有佐剂作用。④硫酸脑苷脂(salfatides)和硫酸多酰基化海澡糖(Multiasiylated trehalose salfate)在结核杆菌毒株胞壁中含有，能抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合，使结核杆菌在细胞内存活。这一类糖脂能结合中性红染料。产生中性红反应，借此可鉴定结核杆菌有无毒力。

2．蛋白质（Protein）：结核杆菌菌体内都含有数种蛋白质，其中重要的蛋白质是结核菌素(tuberculin)。结核茵素与蜡质D结合，能引起较强的迟发型变态反应。其他蛋白质可引起机体产生相应的抗体，但无保护作用。

3．多糖质（Polysuccharides）：多糖质常与脂质结合存在于胞壁中，主要有半乳糖，甘露醇、阿拉拍糖等。多糖质可使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。

4．核酸(Nucleic acid)：结核杆菌的核糖体核糖核酸(Ribonucleie acid ribosonic, rRNA)是本菌的免疫原，刺激机体产生特异性细胞免疫。

机体感染结核分支杆菌 ( Mycobacterium tuberculosis, MTB)后的免疫属于有菌免疫, 即只有MTB在体内存在时才有免疫力,一旦体内的MTB被杀灭,免疫也随之消失。机体对 MTB的抗感染免疫主要是细胞免疫。其基本过程是:MTB侵入呼吸道后原肺泡中的巨嗜细胞(Mφ)不能防止所吞噬的MTB生长 ,但可释放大量炎症因子,吸引血液中的单核细胞至局部病灶。这种单核细胞在致敏T细胞释放的细胞因子的作用下可在病灶中杀死MTB。因此 ,集体针对 MTB的细胞免疫是多细胞、多因子参与的复杂过程。

免疫与变态反应：结核杆菌的免疫原rRNA和变应原结核菌素可诱发机体产生由T淋巴细胞介导的两种免疫应答反应，即细胞免疫和迟发型变态反应。

人类对结核杆菌的感染率很高，但发病率却较低，这表明人体感染结核杆菌可获得一定的抗结核免疫力。抗结核免疫力的持久性，依赖于结核杆菌在机体内的存活，一旦体内结核杆菌消亡，抗结核免疫力也随之消失，这种免疫称为有菌免疫或传染性免疫（Infection immunify）。

抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏的T淋巴细胞和被激活的巨噬细胞。致敏的T淋巴细胞可直接杀死带有结核杆菌的靶细胞，同时对释放多种作用于世噬细胞的淋巴因子，使巨噬细胞聚集在病灶周围形成以单核细胞为主的增生性炎症。被激活的巨噬细胞极大地增强对结核杆菌的吞噬消化，抑制繁殖，阻止扩散，甚至消毁的能力，充分分挥细胞免疫的作用。

2.简述结核杆菌基因组学、比较基因组学、转录组学与蛋白质组学研究进展。

对结核分枝杆菌基因组学、蛋白质组学、后基因组学研究，可从一个细胞生命整体去研究，能弄清其致病机制、感染的方法，为结核分枝杆菌胞内生活周期、结核分枝杆菌病早期诊断、疫苗免疫、新药研发，提供坚厚的基础。

（1）基因组学

1998年英国Sanger中心和法国Pasteur研究所合作完成了结核分枝杆菌的全基因组测序工作，并在2002年进行了重新注释。全基因组序列由4.4Mb(4411529bp)组成,包括4411个基因，具有潜在编码

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能力的基因约有3977个，约占90.2%;有3924个开放阅读框，其中约40%有功能，44%可能有功能，16%称为孤儿序列，与其它微生物的序列无相似性;基因组富含GC碱基，G+C含量高达65.6%。DNA重复序列度高，可能与结核杆菌的修复机制非常忠实有关。特征之一是：9%基因组编码2个富含甘氨酸蛋白质新家簇;编码富含甘氨酸的酸性蛋白质，占10%;这些蛋白与结核杆菌抗原变异、逃避免疫有关。另一个特征是,有大量编码脂肪酸代谢酶的基因，大肠杆菌仅有50个，而结核杆菌有250多个;结核杆菌有FASI和FASII两种脂肪酸合成酶系统;FASII型系统可合成腊样的结核菌醇二分枝菌酸，它是致病分枝杆菌细胞壁上的特有成分。

结核分枝杆菌序列测定前确定的毒力因子仅3个过氧化物酶，其功能是抵抗宿主巨噬细胞产生的活性氧。序列测定后发现了一些新的毒力因子:分泌重复蛋白，与细菌在宿主内繁殖有关;具溶血活性蛋白质;与细菌入侵、存活有关过氧化氢酶;与细菌在细胞内存活有关因子，包括调控细菌在细胞内存活状况等。

（2）分枝杆菌比较基因组学:

结核杆菌复合菌群的各菌种在DNA水平上的同源性大于99.95%。牛分枝杆菌M. bovis和牛分枝杆菌BCG菌株的染色体内有7个缺失区域(deleted regions RDs)。提示结核杆菌复合菌群各菌种间的缺失区域的分布与宿主特异性和毒力相关基因相一致。应用微阵列技术，检测BCG不同子代菌株基因组的多样性，共发现16个RDs，某些RDs是某种菌株特异性的，全部BCG菌株均缺失9个RDs(61个ORF)，但是H37Rv均未缺失这些区域。所有的BCG菌株缺失RD1区，但是其它结核杆菌复合菌群中菌种均未缺失该区域。该区域缺失可以认为是BCG减毒的原因。

综合比较基因组分析的结果提示：现今使用的不同BCG菌株间遗传的多样性，其也可说明不同疫苗的抗结核的差异。由于位于基因两侧IS6110拷贝之间同向同源重组的结果，结核杆菌复合菌基因丢失概率非常高，至少存在5个这样区域。总之，插入和缺失是结核杆菌复合菌群基因组可塑性的主要根源。

（3）分枝杆菌转录组：

转录组(transcriptome)是指细菌产生的全套转录产物。Alland等建立了差异表达技术(DECAL)，用于检测 mRNA的差异表达。应用DECAL分析结核杆菌对异烟脱治疗反应的表达差异，发现iniA、iniB、iniC三个基因表达上调， asd基因表达下调。另一个作用于细胞膜的抗结核药乙胺丁醇，可诱导iniABC基因的表达。因此iniABC功能在细胞膜生物合成中起关键作用。

最近用于研究结核杆菌和巨噬细胞相互作用的一种技术是转录序列选择性俘获技术(selective capture of transcribed sequences SCOTS)。这种技术应用消减杂交和PCR，检测人巨噬细胞中表达差异的基因。许多基因的转录受巨噬细胞内化作用的影响，包括两个替代转录因子(sigE, sigh)，它们与应激反应下巨噬细胞的存活有关多聚乙酸合成酶pks2，多聚乙酞在溃疡分枝杆菌的致病中起重要作用。编码异柠檬裂合酶的aceA基因，该酶证明是结核杆菌在感染的小鼠中长期滞留所必不可少的。

研究结核杆菌对INH的转录反应，检到FASH系统中编码多聚乙酞的基因过度表达，证实蛋白组学的发现。另一个被诱导基因是fbpC，编码含量丰富的分泌性抗原85-C，该抗原具有海藻糖分枝杆菌转移酶活性，其与分枝杆菌细胞壁合成终末步骤有关。其它INH诱导基因有fadE23和fadE24，每个基因都是编码与脂肪酸氧化有关，这是为降解INH治疗过程中堆积起来脂肪酸而作出的反应。另一个在INH治疗中被诱导的基因是ahpC，其是对INH次级毒性作用的反应 …… 此处隐藏：3251字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……