2012细胞工程教学提纲及补充思考题 - 图文(9)

? 二、非贴附型细胞（悬浮生长，如血液白细胞、淋巴组织细胞）

第5节 动物细胞、组织培养的基本技术 ? 5.1 培养工具 ? 5.2 培养条件 ? 5.3 动物细胞培养的传统方法 ? 5.4 原代培养与传代培养技术 ? 5.5 贴壁培养技术

? 5.6 动物细胞大规模培养技术 ? 5.7 动物细胞生物反应器大规模培养 ? 5.8 细胞冷冻保存技术 ? 5.9 动物细胞体外培养举例 ? 5.10 动物细胞体外培养现状与展望

? 一、培养工具

? 培养器皿（玻璃、塑料）、空心纤维、微珠 ? 二、培养条件 ? 1、温度（37℃） ? 2、pH值（pH7.2～7.4） ? 3、气体（O2、CO2）

? 4、营养（氨基酸、维生素、辅酶、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、葡萄糖、无机盐等，其中多种成分可由血清提供） ? （1）天然培养基（血清、鸡胚汁等）

? （2）合成培养基（MEM、DMEM、DME等） ? （3）无血清培养基（SFRE199-1等）

此外还有一种微囊法，是美国Damon Biotech公司发明的方法。具体是：将细胞悬浮于海藻酸钠溶液中，迫使其通过一种成滴装置后滴入溶液，即形成半透膜微囊，把细胞包在内，培养时废物可通过半透膜排出，所需要的大分子产物如抗体则被阻留积累在囊内，最后只需离心收集微囊并打开囊膜，就可分离获得高浓度的未经培养液血清污染的大分子产物。

? （1）天然培养基

? 直接采用动物体液或从组织中提取的成分作为培养液，主要有血清、组织提取液、鸡胚汁等，其中血清是最常用最有效的，已知血清中含有：

? ①蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ? ②氨基酸