2012细胞工程教学提纲及补充思考题 - 图文(3)

变化又回到未分化状态的过程，如培养条件下的植物愈伤组织。 ? 一个已分化细胞，要表现其全能性，形成完整植株，首先要经历脱分化，然后再经历再分化过程。

? 组培研究结果表明：分化细胞的脱分化关键需要两个条件：创伤和外源激素，如生长素、细胞分裂素或赤霉素。 ? 植物组织培养常用仪器设备：

? 电子天平、高压蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、超净台、冰箱、人工气候培养箱、人工气候室、三重纯水蒸馏器、超纯水仪、电炉、试管、三角瓶、培养皿、剂量器皿（量筒、容量瓶、移液管、移液枪等）、烧杯、试剂瓶、镊子、解剖剪、解剖刀等。 ? 植物组织培养培养基成分：

? 培养基应含有植物生长所必需的各种营养成分，以满足植物正常生长发育的需要。在完整的全培养基中应包括无机盐类、碳源、有机氮源、植物生长激素、维生素等物质。这些物质主要有四个方面的生理作用：一、作为结构物质参与机体的建构，如蔗糖提供碳源，肌醇在糖类的相互转化中起作用，是构成细胞壁的材料，也参与细胞膜的构建。氨基酸是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用；二、构成特殊的生理活性物质，在代谢中起调节作用，如维生素类物质在植物细胞中主要以各种辅酶的形式参与多种代谢活动，对生长有促进作用；三、维持离子浓度的平衡、电荷平衡、胶体平衡等，如琼脂作为培养组织的支撑物起支持作用；四、影响器官的形态发生和建成，如钾、铁、镁、钙等 。 ? 植物组织培养培养基成分：

? （1）无机盐类

? 大量元素：N、S、P、K、Ca、Mg等 ? 微量元素：Fe、Mn、Cu、Zn、Cl、B、Mo等

? 通常无机盐浓度为25mmol/L左右，硝酸盐浓度一般为25～40mmol/L，其中必须添加钾元素，浓度在20mmol/L或更高，磷、镁、钙、硫元素浓度在1～3mmol/L。 ? （2）碳源

? 最常采用的碳源为蔗糖，用量在2%～3%范围内。 ? （3）有机氮源

? 通常采用的有机氮源有蛋白质水解产物、谷氨酰胺或氨基酸混合物。