微生物初级考试细菌部分(6)

③麻风分枝杆菌三类。

(二)结核分枝杆菌（呼吸道疾病）

经青霉素、环丝氨酸或溶菌酶诱导可影响细胞壁中肽聚糖的合成，又是异烟肼影响细胞壁分枝酸的合成均可导致其变为L型。

（结核分枝杆菌）专性需氧，营养要求较高，生长缓慢。初次培养常用L-J培养基（用于结核分枝），一般10～30天可见菌落生长。

1、抗酸染色：痰涂片抗酸染色光镜检查，对肺结核及其他非典型分枝杆菌感染的及时、初步诊断十分重要。

抗酸染色操作简便、结果快速，是分枝杆菌感染最初的基本检验步骤，也是确认所检细菌为分枝杆菌的重要方法。

根据涂片方法不同可分为○1厚涂片法○2浮游集菌法和○3离心沉淀法三种。 ◇1厚涂片抗酸杆菌检查结果报告方式：

“一”代表“观察100—300视野未发现抗酸杆菌”，“ +”代表“全视野发现3～9条抗酸杆菌”，

“++”代表“全视野发现10～99条抗酸杆菌”， “+++”代表“每油镜视野发现1～9条抗酸杆菌”，

“++++”等表示“每油镜视野发现≥10条抗酸杆菌”。

2．分枝杆菌的培养：培养基可采用酸性改良罗氏培养基，用于分离培养，痰液中加入2％Na()H 2～4倍量，振荡使痰液化，取消化后痰液0.1ml，无菌操作接种于培养基斜面上，每份标本同时接种2支酸性改良罗氏培养基，37℃孵育。 肺部常见感染的免疫血清学诊断方法：

包括凝集试验(AT)、间接免疫荧光试验(1FA)、直接免疫荧光试验(DFA)、乳胶凝集(LA)、ELISA（酶链免疫吸附试验）等，

分子生物学诊断手段如PCR（聚合酶链反应）等方法的应用越来越广泛。

(三)葡萄球菌属（肺部感染病原菌）

葡萄球菌为革兰阳性球菌，一般为需氧或兼性厌氧生长，营养要求简单，在血液琼脂平板上，菌落周围可有明显的完全溶血环。 现在多根据有无凝固酶将葡萄球菌分为三类：

金黄色葡萄球菌：能产生凝固酶，在琼脂培养基上菌落绝大多数呈金黄色，能产

生多种毒素，对人类具有极强的致病力；

表皮葡萄球菌：凝固酶阴性（不能产生凝固酶），该菌为条件致病菌（表皮葡萄球菌），在机体抵抗力差、免疫力低下时可引起严重感染；

腐生葡萄球菌：凝固酶阴性（不能产生凝固酶），呈白色菌落，该菌仅偶尔引起尿路感染。

葡萄球菌的毒力因子包括：①毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素—1、肠毒素等；

②酶：凝固酶、纤维蛋白溶酶、耐热合算酶、透明质酸酶、脂酶等； ③其他：荚膜、胞壁肽聚糖等。

葡萄球菌具有天然的耐青霉素的特性，20世纪80年代后耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株(MRSA)和耐苯唑西林(ORSA)的比例逐年增加。

正常人群体内和体表多处有葡萄球菌存在而不引起疾病。鼻腔是最主要的带菌部位（葡萄球菌带菌部位），其次为皮肤、咽喉及肠道。 肺炎患者痰标本为黄脓色、粘厚，应考虑为葡萄球菌感染。

金黄色葡萄球菌检验（葡萄球菌属的分类）现在多根据有无凝固酶将葡萄球菌分为三类：（金黄色葡萄球菌检验是其中的一类）（食品）

一、增菌培养法：(一)检样处理：称取25g(mL)样品，加入225m1灭菌生理盐水，固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。

(二)增菌及分离培养：吸取5mL上述混悬液，接种于7.5％氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50ml培养墓内，置36℃士l℃温箱培养24小时，转种血平板和Baird—Parker平板，36℃±1℃培养24小时，挑取金黄色葡萄球菌落进行革兰染色镜检及血浆凝固酶试验。

(三)形态：本菌为革兰阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，

无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径约为0.5—1um。

(四)在肉汤中呈混浊生长：◇1在胰酪胨大豆肉汤内有时液体澄清，菌量多时呈混浊生长，

◇2血平板上菌落呈金黄色，也有时为白色，大而突起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。

◇3在Baird—Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为

淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。

长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。

(五)血浆凝固酶试验：吸取l：4新鲜兔血浆0.5ml，放人小试管中，再加入培养24小时的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤培养物0.5ml，振荡摇匀，放36℃±1℃温箱或水浴内，每半小时观察1次，观察6小时，如呈现凝固，即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块者，被认为阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。

二、直接计数方法：1、吸取上述1：10混悬液，进行10倍递增稀释，根据样品污染情况，选择不同浓度的稀释液lml，分别加入3块Baird—Parker平板，每个平板接种量分别为0.3mL、0.3ml、0.4ml，然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分不多吸收，

可将平板放在36℃±1℃温箱l小时，等水分蒸发后反转平皿置36℃±1℃温箱培养。

2、在3个平板上点数周围有混浊带的黑色菌落，并从中任选5个菌落，分别接种血平板，36℃±1℃ 24小时培养后进行染色镜检、血浆凝固酶试验，步骤同增菌培养法。

3、菌落计数 将3个平板中疑似金黄色葡萄球菌黑色菌落数相加，乘以血浆凝固酶阳性数，除以5，再乘以稀释倍数，即可求出每克样品中金黄色葡萄球菌数。

(四)链球菌属（肺部感染病原菌）

革兰阳性球菌，引起人的疾病主要有各种化脓性炎症、猩红热、新生儿败血症、细菌性心内膜炎和风湿热、肾小球肾炎等变态反应性疾病。

根据溶血现象的分类可分为3类（链球菌）：①甲型溶血性链球菌：菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，因而这类菌也称做草绿色链球菌，这类链球菌多为条件致病菌；

②乙型溶血性链球菌：菌落周围形成一个2～4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，称做乙型溶血或β溶血，因而这类菌多称做溶血性链球菌。这类链球菌致病性强；

③丙型溶血性链球菌：不产生溶血素，因而也称做不溶血链球菌，无致病性。 (五)肺炎链球菌（肺部感染病原菌）

肺炎链球菌为革兰阳性球菌，习惯上称为肺炎球菌，直径0.5一1.25um。无鞭毛、无芽胞、有荚膜，需氧或兼性厌氧、营养要求高，在含有血液或血清的培养基上才能生长。主要寄生于人的上呼吸道，仅部分菌株有致病力，主要引起大叶性肺炎（肺炎链球）。

肺炎链球菌在血琼脂培养基上基本呈灰白色，半透明，周围有草绿色溶血环（在血液琼脂平板上葡萄球菌的菌落周围可有明显的完全溶血环而

肺炎链球菌在血琼脂培养基的周围有草绿色溶血环这是与葡萄球菌的区别）。菌落在普通琼脂培养基上呈绿色，易与草绿色链球菌相混淆（甲型溶血性链球菌也称做草绿色链球菌）。肺炎球菌感染患者痰标本为铁锈色。肺炎链球菌不产生内、外毒素（葡萄球菌能产生毒素），而其致病力主要是荚膜的侵袭作用（因为肺炎链球有荚膜），有荚膜的菌株有毒力，失去荚膜的菌株毒力减低或丧失。根据荚膜多糖抗原性的不同，可分型。

同时，荚膜肿胀试验可用于肺炎链球菌的快速诊断。青霉素为治疗肺炎链球菌的标准药物。（而葡萄球菌耐青霉素，葡萄球菌与肺炎链球菌的区别）

溶血性链球菌检验（肺部感染病原菌）（ …… 此处隐藏：2425字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……