微生物初级考试细菌部分(2)
寄生人类和动物肠道中,生化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌。目前至少有67种()抗原和2000个以上的血清型,仅少数对人致病①肠热症的伤寒②副伤寒③甲和乙沙门菌
其他对动物致病,偶可传染给人,引起食物中毒或败血症,如①鼠伤寒沙门菌(最常见)、②肠炎沙门菌、③鸭沙门菌、④猪沙门菌等
沙门菌属除鸡沙门菌和雏沙门菌,都有周身鞭毛。一般无荚膜。营养要求不高,在普通平板上形成中等大小、五色半透明的S型菌落。
沙门菌属不发酵乳糖或蔗糖。大多产生硫化氢。对葡萄糖、麦芽糖和甘露醇发酵,除伤寒沙门菌产酸不产气外,其他沙门菌均产酸产气。
IMViC○1伤寒沙门菌(一十一一)、○2甲型副伤寒沙门菌(一十一一)、○3乙型副伤寒沙门菌(一十一V)和○4鼠伤寒沙门菌(一十一V)。生化检验主要用于菌属鉴别。 伤寒沙门菌与大肠埃希菌在糖发酵方面的主要差别之一在于伤寒沙门菌不分解乳糖。
对沙门菌的选择分离培养可用SS琼脂,在SS琼脂上其菌落呈现微黄色或无色。 在发病早期(一般l周内)可从血液中分离,此时从血液中的分离率最高;l周后粪便或尿中,发病第3周时粪便标本病原分离率最高;骨髓培养是细菌学确诊的最好方法,在发病第1周时也较高,检出率可达到90%以上。胆汁标本也可以进行分离。
沙门菌属具有分类诊断意义的3类抗原:○1O抗原、○2H抗原和○3K抗原,另外K抗原又有两种,即○1Vi抗原和○2M抗原 O抗原系耐热性菌体抗原,由多糖—磷脂复合物组成;H抗原系不耐热抗原,存在于鞭毛中,由鞭毛素组成;K抗原存在于荚膜或被膜中,其中Vi抗原是覆盖在细菌细胞壁LPS(脂多糖)外的荚膜多糖抗原。伤寒沙门菌和丙型副伤寒沙门菌具有Vi抗原。
沙门菌的抗原变异,对菌型诊断及在制备菌苗上有重要意义,变异的类型○1H—O、○2S-R、○3V-W变异和位相变异。
肥达试验为用已知的伤寒沙门菌O、H和甲、乙型副伤寒沙门菌H抗原与不同稀释度的待检血清作定量凝集试验,根据抗体的含量和动态变化以辅助临床诊断伤寒病原菌的一种血清学试验。在病起的第2周,血清中抗体就可有较明显增多,恢复期达到高峰。
一般()凝集价≥l:80,H凝集价≥l:160时才有诊断价值,有时单次效价增高不
能定论,病程中应逐周复查,若效价依次递增或恢复期效价增加≥4才有意义。IgM类O抗体出现较早,持续约半年,消失后不易受伤寒等病原菌的非特异性抗原刺激而重新出现。IgG类H抗体出现较晚,维持时间长达数年,消失后易受非特异性抗原刺激而能短暂重现。因此若O、H凝集效价均超过正常值,则伤寒或副伤寒感染的可能性大;如两者均低,则患伤寒的可能性甚小;若O不高H高,可能是预防接种或非特异性回忆反应;如O高H不高,可能是感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌(如肠炎沙门菌)。少数病例,在整个病程中,肥达试验始终在正常范围内,可能是早期使用大量抗生素,或患者免疫功能低下等因素。
预防 “三管一灭’’(管水、管食物、管粪便和消灭苍蝇),防止水源和食品污染。伤寒疫苗为Vi疫苗。 (五)实验室:沙门菌检验
1、前增菌和增菌 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。
2、分离 取增菌液1环,划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板和一个DHL琼脂平板(或HE、WS、LS)。两种增菌液可同时划线接种在同一个平板上。36℃±1 ,18~24小时(DHL、HE、WS、SS)或40—48小时(BS),观察各个平板上生长的菌落特征。 3、生化试验
(1).自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落,分别接种三糖铁琼脂。在三糖铁琼脂内,肠杆菌科常见属种的反应结果不同。
○1在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢(H2S)阴性的菌株可以排除,其他的反应结果均有沙门菌的可能,同时也均有不是沙门菌的可能。
(2)、在接种三糖铁琼脂的同时,再接种蛋白胨水(供作靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基和赖氨酸脱羧酶试验培养基及对照培养基各1管,于361℃±1培养18~24小时,必要时可延长至48小时,按表7—3判定结果。(看结果在后面) 4、血清学分型鉴定
(1)抗原的准备 一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。 (3)H抗原的鉴定 位相变异试验方法如下: (1)小玻管法:(2)小倒管法、简
易平板法
(4)Vi抗原的鉴定:用Vi因子血清检查。已知具有Vi抗原的菌型有:①伤寒沙门菌,②丙型副伤寒沙门菌,③都柏林沙门菌。
五、志贺菌属 (一)病原学
志贺菌为肠杆菌科志贺菌属,革兰阴性,需氧,无鞭毛、不能运动,引起细菌性痢疾。
根据抗原结构的不同,分为A、B、C、D四群,其中A群为痢疾志贺菌,B群为福氏志贺菌,C群为鲍氏志贺菌,D群为宋内志贺菌。
志贺菌的主要毒力因素包括:○1其表面结构脂多糖、○2细菌侵袭性以及○3分泌的志贺毒素。
志贺毒素由A和B亚单位组成,A亚单位是毒素的活性部位,能抑制蛋白合成。 志贺菌A群Ⅰ型产生的志贺毒素具有○1神经毒、○2细胞毒和○3肠毒性。目前已知各群志贺菌的侵袭相关基因都位于质粒上。
志贺菌在普通琼脂平板上生长形成中等大小、半透明的光滑型菌落(D群的宋内志贺菌:培养中常出现扁平的粗糙型菌落)。
其O抗原为群特异性抗原,K抗原为型特异型抗原,分解葡萄糖,产酸不产气,不分解乳糖。
(总结 志贺菌:革兰阴性,需氧,无鞭毛、不能运动、分解葡萄糖,产酸不产气,不分解乳糖,在普通琼脂平板上生长形成中等大小、半透明的光滑型菌落,D群的宋内志贺菌:培养中常出现扁平的粗糙型菌落) (二)流行病学
志贺菌菌型较多,菌群分布随国家、地区、年份的不同而有不同,基本上发展中国家以A、B、C群多见,而发达国家以D群感染为主。
目前在我国以B群福氏志贺菌为多,其次是D群。患者和带菌者是传染源,病菌随患者或带菌者粪便排出,通过污染食物、水、生活接触或借苍蝇传播等,使易感的接触者发病。人对志贺菌较易感,10~200个细菌就可使10%~50%志愿者致病。志贺菌痢疾(A群为痢疾志贺菌)在中国全年均有发生,以夏秋两季多
见。
志贺菌感染的一些特点包括:(A群)痢疾志贺菌感染患者病情较重,(D群的)宋内志贺菌多引起轻型感染,(B群)福氏志贺菌感染易转变为慢性;急性中毒性菌痢以小儿多见;感染后免疫期短。 (三)病原分离
取新鲜粪便粘液或脓血部分接种于SS琼脂选择培养基上,并按常规鉴定菌群与菌型。注意在三糖铁培养基上,痢疾志贺菌与伤寒沙门菌的表现相似。需要增菌时,如自可疑食品中进行分离,可先用GN增菌液增菌,提高检出率。 (四)诊断标准
细菌性痢疾的(志贺菌)诊断原则为依据流行病学史、症状、体征及实验室检查进行综合诊断,确诊则需依赖于病原学检查。
志贺菌根据症状体征可诊断为○1急性非典型菌痢、○2急性典型菌痢、○3急性中毒型菌痢和○4慢性菌痢。
志贺菌感染病程在2个月以上属慢性。 (五)防治原则
1.预防:应以切断传播途径为主,同时加强对传染源管理的综合性防治措施。对重点人群、集体单位应特别注意预防暴发或流行。
2.治疗:一般对症治疗中注意进易消化饮食,注意水电解质平衡,可给口服补液盐(()RS),必要时()RS(口服补液盐)和静脉输液同时应用。病原治疗 …… 此处隐藏:2708字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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