PLGA的不同组成对支架材料性能的影响

介绍可降解聚乳酸材料组成及其性能

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中国生物工程杂志

C iaBoeh o g,0 8 2 ( ) 2 2 hn i c n l y 2 0,8 5:2~ 8 t o

P GA的不同组成对架材料性能的影响研究 L支赵 h何晨光高永 崔 曹 莉 娟磊谊林( 1上海组织工程研究与开发中心上海 20 3 2组织工程 (海 )家工程研究中心 025上国上海 20 3 0 25)

( 3上海交通大学医学院附属第九人民医院

上海

20 1 ) 0 0 1

摘要

研究 P G的不同组成对支架材料的力学性能、 LA降解性能和生物学性能的影响。采用溶液

浇注/粒沥取法制备出不同组成的 P G多孔支架，支架的力学性能和降解速率进行考察， 颗 LA对同

时将人真皮成纤维细胞接种于不同组成的 P G L A支架材料上，培养不同时间后，检测细胞的粘附率和增殖率，以及细胞产生的总胶原含量，通过扫描电镜观察支架上的细胞形态。结果显示，并 随 P A比例的增加。架的力学强度增加， L支降解速率降低，都不是线性变化。7:0比例的支但 03架，伸强度最高， 7: 0和 8:0两种比例的支架，降解速率没有显著性差异。P G拉而 03 02其 L A不同 组成的支架，具有良好的细胞相容性，纤维细胞粘附率和增殖率在三种比例的支架上没有显均成

著性差异，细胞在支架表面生长良好，泌大量的细胞外基质，分细胞基本铺满整个支架。研究发现。L A的组成对支架力学性能、 PG降解性能和生物学性能有细小但显著的影响，将对组织构建这选用 P G支架材料提供有益的帮助。 LA 关键词 PG L A支架拉伸强度Q 1 89

降解速率生物学性能

中图分类号

聚乳酸 ( o l t c, L pla i ai P A)和聚羟基乙酸 y cc d

7/ 0和 5/0 03 0 5。溶剂三氯甲烷 ( H I) C C3和致孔剂氯化钠 ( aI购于国药集团化学试剂有限公司( N C)上海 )分，析纯。 1 2支架制备 .

( o g cl c,G是最典型的合成可降解聚合 pl l o cai P A) yy i d物，也是结构最简单的线性聚羟基脂肪酸酯。它们作为第一批可降解吸收材料被美国 F A批准用于临床， D 是迄今研究最广泛、应用最多

的可降解生物材料。P A L和 P A的共聚物 P G G L A作为可吸收缝线也有几十年的应用，目前被广泛用于组织工程。 P G的性能会由于 LA组成的变化而变化，性能变化与组成又不是简单的但

将不同比例的 0 5 L A原料溶于 C C3中， .gP G H 1配制成浓度为 l 0% (/ ) w v的溶液。按照 P G/ a I/ L A N C=19的质量比将直径为 10~10 m的 N C颗粒加入 5 8￣ aI

PG L A溶液中，拌均匀后，搅倒入尺寸为 8m× c的 c 8m培养皿。室温下干燥 4 h脱模后用蒸馏水滤去多孔膜 8,中的 N C, a I室温干燥 4 h再放入 4￣烘箱干燥 2 h使 8, 0C 4,C C充分挥发掉。 H I 13支架的结构表征 .

线性关系【。本文将对三种组成的溶液浇注/ 颗粒沥滤法 P G L A支架材料进行力学性能、降解速度及成纤维细胞的生物学反应的检测，从而考察 P G L A的组成与性能的关系。

1材料与方法11材 .料

支架经离子溅射仪真空喷金后， J A 80用 X 10扫描电镜对孔结构进行观察。 14拉伸强度的检测 .

不同组成的 P G L A原料均购自山东省医疗器械研究所，子量为 4O0 P A和 P A的比例分别为 8/0分 O 0,L G 02,收稿日期：07 1-1 2 0—22修回日期：0 80 - 2 0 -30 4}电子信箱： 3 7@16 cr z 58 2 .o 1 n

将样品裁成 8 m×lm的尺寸， IS R N 54 c c在 N T O 52生物力学测试机上进行拉伸强度的测试。拉伸速度为 5 m mn m/ i。平行样品数为 3。个

介绍可降解聚乳酸材料组成及其性能

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2 0,8 5 082 ( )1 5降解实验 .

赵莉等： L A的不同组成对支架材料性能的影响研究 PG

2 3

别取材， MI增殖实验，做 r1 1方法同上。该实验每个时间点设 4个平行对照孔。结果表示为平均值±标准差，显著性差异通过学生氏 t检验进行判断， P< .5为以 00有统计学意义。

将样品裁成 3m× .c c 15m的尺寸，浸泡于 p 7 2 H= .的磷酸盐缓冲溶液 ( hsht b fr o tn P S pop a u e d sli, B ) e fe uo中，然后置于真空干燥箱中反复抽真空，样品充分润

使湿。将完全浸润的样品放置于六孔培养板内，入定加量 P S液，人 3￣恒温箱内。于实验后 0 l2 3 B溶放 7C,,,,

16 3总胶原含量总胶原含量是通过测定羟脯氨 . .酸的含量来间接测定的。羟脯氨酸在胶原蛋白中占 1 .%,弹性蛋白中占极少量，它蛋白中均不存 34在其在，因此羟脯氨酸的量能反映结缔组织疾病的胶原代谢情况。采用南京建成生物工程研究所的羟脯氨酸 ( y )试盒 ( 0 0来测定，原理是样品在氯化亚 Hp测 A3 )其锡的盐酸溶液中水解，放出羟脯氨酸。羟脯氨酸在释氧化剂的作用下产生的氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应生成紫红色化合物，据其呈色的深浅可推算出其根含量。

46 8 l,,, 0周取样，去离子水冲洗，冷冻干燥后进行重量损失、拉伸强度及 S M检测。 E重量损失通过公式 L= woW ) wo×10 ( -/ 0%来计

算，其中 wo是降解前质量，是降解不同时间后的质 w量。

1 6细胞实验 .

原代培养的人真皮成纤维细胞体外传代培养至 5~

l,细胞铺满培养皿底部时， 0 2%胰酶消化 0代待用 .5

成 2× 0个/ l 1 m细胞悬液， 2× 0按 1个/ m c的密度接种于灭菌处理好的材料表面，细胞黏附 2待 h后，入加足量的 D E+ 0小牛血清 ( B )胞培养液培养， M M 1% FS细 隔天换液。 16 1细胞粘附 .. 样品剪裁成 lm×lm的尺寸， c c经

细胞一料复合物处理前，行组织称重，磨后材进研于生理盐水中匀浆，50/ i心 1 mn取上清， 3 0 rmn离 0 i,稀释后检测液。按照试剂盒说明书方法消化，设立标并

准管及空白管。混匀，0C水浴 1 mn冷却后，5 0/ 6￣ 5 i, 30 r mn离心 1m n取上清液在 50 m处， i 0 i, 5n测各管吸光度。根据公式计算羟脯氨酸的含量。 16 4扫描电镜 (cn i l t nmc s p,E . . san ge c o i oc y S M) n er r o

7%的酒精浸泡， 5培养液浸润后用于细胞接种。细胞接种材料 2 h, 4后每孔加入 10 5 gm噻唑蓝 ( .45

0 m/ l 3(, .dm tyti zl .1 -, dp ey . t zl m rmie i ch l o o- y ) 2 5.ih n 1t r oi bo d, ha 2 ea u

观察

细胞一材料复合物培养 3 7天后， P S洗去，用 B

M T) 1溶液，￣恒温培养箱反应 4,复合物移至新的 r 3C 7 h将 2孔板，甲基亚砜 ( ie y slx e D S溶出材 4二 dm t l u oi, M O) h f d料上的细胞内的结晶紫， DA r dr Ex80 在 I e e ( l 0 G, a DA A MB Ven, uta上， 40 m波长测溶 IL BG H, i a A si)以 9 n n r

残余培养液，放人 25 .%戊二醛溶液固定，锇酸后固定，梯度乙醇脱水后，界点干燥，子溅射仪喷金镀膜临离后， Ht h S4 0扫描电镜上观察细胞的粘附和增在 ici - a 5殖情况。

出物吸光值。用已知浓度 (.5×1 -/ l0 5× O 02 0 ' m,. l4 i '爪/ l× 0爪/ l 1个/ l m, 1 l 4 m, 0 2× m, 1个/ 1培养 4× 0 4 m)

2结果 通过溶液浇注/粒沥滤法制备出的 P G支架，颗 LA 孔结构均匀，径在 4 20 m之间，通孔径较小，孔 0~ 0 I￣连 约在 l 4 I之间。三种比例的 P G支架在孔结 0~ 0 m￣ LA构上没有差异 ( 1。图 )

2 h的单层细胞测吸光值， 4得到细胞数圾光值标准曲线。依据标准曲线求出细胞在材料上的黏附率。该实验重复

3每次 …… 此处隐藏：15606字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……