FTA-DNA直接提取法的研究与应用

目的建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法。方法取直径1.2mm FTA卡血样,分别用FTA-DNA直接提取法及FTA常规提取方法提取DNA,AB-Identifiler^TM试剂盒分别进行10山和25山体系检测比较,并筛选批量grA卡血样DNA自动化提取程序。结果200份grA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板,25μl体系PCR-STR检测,分型结果均良好。10μl体系检测,FTA-DNA直接提取法

维普资讯 http://doc.guandang.net

中国洁喾謦彝如 C I O E S ME 20年第2卷第 2 HNd R N￣ F D 08 3期

F A— N直接提取法的研究与应用 T D A匡金枝，聂同钢，杨智，朱巍，孙睿，王玉健(天津市刑事科学技术研究所，天津 3 0 8 ) 0 3 4

【摘要】目的建立一种简约且易于自动化操作的 Whta r a nEA卡血样 D A提取方法。方法 m N2体系检测比较， 5并筛选批量 E A卡血样 D A自动化提取程序。结果 r N

取直径 12 m .m

E A卡血样， r分别用 E A D A直接提取法及 E A r—N r￣常规提取方法提取 D A, B Iet l T试剂盒分别进行 l和 N A . ni eM d fr i 0 2 0份 E A卡血样分别采用 2种方法提取 0 r

D A模板，5体系 P R S R检测， N 2 C—T分型结果均良好。l体系检测， A D A直接提取法优于 E A 0 r E .N r￣常规提取方法，图谱 R U值为 10￣ 0 0采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作 D A分型图谱均衡性更佳； F 00 2 0, N采用 E A r￣常规提取方法检测，图谱 R U值 10 2 0,片段优先扩增现象明显， F 0￣ 00小且有 1%的样本出现丢峰现象， 9采用自动化工

作站运行该程序对其结果改善不明显。经工作站运行 EAD A直接提取法自动程序及 l体系检测本 2万余份 r .N 0r E A卡采集的血样，获得 l均 6个 S R基因座 D A分型结果。结论 T N卡血样自动化 D A建库。 N

本文建立的 E A D A直接提取法适用于 E A r—N r￣

【关键词】法医物证学； A卡血样； r E直接提取法；自动化 D A工作站 N【文献标识码】 B【文章编号】 1 1 52 (08 0— 18 0 0— 7 820 )2 00— 3 0

A mpea d rpdmo ie -e to rDN etat no T lo s is( U N i— i s l n a i df d l w meh d f A xr c o fF A bo d t n K A G J z, i i l o i a n h

N E T n—a g Y N h, t . Taj oes c ne ntue Taj 0 3 4 C i I oggn, A G Z i e a/ ini F r i Si c i t, in n3 0 8, hn 1 n nc e I t s i a)

【 bt c】

O jc v T s b s ip dr i nw m t df N xat no F A A s at r bet e oe alhas l a p e e o rD A et co f T i t i m en a d h o r ib o d ti a ls M e h d G n mi lo s n s mp e . t o s a e o c DNA w s e t ce r m T b o d t is o . mm i ee y a xr td fo F A lo san f 1 2 a da trb m F A— A i c xr c o d F A@ r u i e me o e p cie y n d t e r e oy e e e a ay e sn T DN dr t ta t n a T e e i n o t t d r s e t l .a h i g n t p sw r l z d u i g n h v n AB d n i lr k ti 0 II e t iⅢ i n 1 a d 2 o a t n v l me r s e t ey Re u t F r2 fe n 5 fr ci ou p ci l . s ls e o e v o 5 o e cin v l fr a t o— o

u,alD me l NA xr c e y t i e e t t o sw s s c e sul e oy e .F r1 o a t n v l me e ta td b wo df r n h d a u c sf l g n tp d me y o 0 f e c o ou, r i h w v r h e tp n U C S a e o A x a t d b T o e e,t y i g S C E S r t f DN e t ce y F A@ r u n t o a inf a t o e h r o t e me d w s sg i c l l w r t a i h i n y n h s y F A— t o e b T DNA d r c x a t n p o e u e i te t ci r c d r .Usn T e r o i g F A@ r u n t o . e v u f U r g d fo o t e me d t a e o RF a e m i h h l n r 1 0 t 0 0,a d t e p a mb l c s l f m r fr n i p i c t n o e s le l l a o 0 o 2 0 n e k i a a e r u t r p e e t a l a o ft mal ral e w s a c m— h n e o e l a m i f i h emo h n me o

t r p e o n n. Mo o e,al lc d o o to c re n a p o i t l n te e c n fs p e n d e r v r lei r p u c u r d i p r xmaey nie e n p r e to a ls,a m

h s a o b iu l mp e v n i e f me y a tmai DNA w r sa o . Ho e e .u i g F A— t i w s n t o vo sy i r v d e e fp r r d b u o t e o c ok tt n i w v r sn TDNA ie te ta to r c d d r c x ci n p e￣e,t e tp n s l r i l rt o e i 5 r e h y i g r u t we smi o t s n 2 e s e a h o a to o u fr c n v l me,a d e i n

b t rr s l a e o t i e sn u o t et e u t c n b b an d u i g a tma c DNA w r s t n Co cu i n T e F A— e s i o k t i . n s h T DNA d r c x a— a o l o i t t c e er i t d i i e a a i,a a e u o a tma c e tb s me to t n me o s s l d r p d n d c n b s d t u o t sa l h n fDNA d t b s t T o h mp n e i i aa a e wi F A@ hb o d t is lo san .

【 e od】 o nib l i i ne FAb os i; ic e r tn A t acD A K yw rs Fr s io c e d c; T od a Dr t x a o; u m t N e c o ga v e l l tn e t c i o i用于 D A检测的 Wht n T锄卡具备室温环 N a ma F A境下长期保存生物样本等技术特性…,已被国内外越

取方法作了进一步的改进，以供同行借鉴。

来越多的法庭科学实验室用于 D A建库样本的采集 N和保存。国外采用 F A卡自动化提取 D A, T N多采用常规提取程序 l,了建立一种简单、 3为]易操作且为我国法庭科学 D A建库使用的 F A D A自动化提 N T -N取程序，文在先行设计定制的“津市公安局 D A本天 N数据库专用 m@卡”础上， F A卡血样 D A提基对 T N【

作者简介】匡金枝 (92,, 16一)女河北霸州人，主任法医师，学士，主要从事法医生物物证检验及研究。

1材料与方法1 1样本 .

从采用本实验室定制的 F A T@卡 ( a a美 Whtn m国)采集的 2万余份建库血样中随机选取 2 0份； 0已知 S R分型健康无血缘关系志愿捐献者 F A卡血样 T T 2 0份 (阳性对照 ) 。1 2仪器与试剂 .

12 1仪器 B I￣ -ut样机 ( S澳大利 . . S) D e取 6 BD

亚) T C N 5 -型自；E A 108动化提取工作站及T C N 52 E A 7-

1 08