分子光谱分析03解析 - 图文(9)

图7-三维荧光光谱的两种表示

6.5 胶束增敏荧光分析

胶束增敏是一种可以用来通过提高荧光效率，来提高荧光分析灵敏度的化学方法。20世纪40年代起人们就观察到胶束溶液对荧光物质有增溶，增敏，增稳作用，70年代后期人们将这种效应用于荧光分析，发展成为胶束增敏荧光分析法。胶束溶液是是具有一定浓度的表面活性剂溶液。表面活性剂的化学结构都具有一个极性的亲水基团和一个非极性的疏水基团。。在极性溶剂中（水）几十个表面活性剂分子聚合成团，将非极性的疏水基尾部靠在一起，形成疏水基向内，亲水基向外的胶束。

溶液中胶束数量开始明显增加时的浓度，成为临界胶束浓度，低于临界胶束

浓度溶液的表面活性剂分子基本以非缔合形式存在，超过临界浓度浓度后，再增加表面活性剂的量，非缔合分子的浓度增加很慢，而胶束数量的增加和表面活性剂浓度的增长基本呈正比。

胶束溶液对荧光物质分子的增容作用是因为非极性的有机物与胶束的非极性尾部有亲合作用使荧光分子定位与胶束的脂性内核中这对荧光分子起到一定的保护作用，减弱了荧光质点之间的碰撞，减少了分子之间的无辐射跃迁，增加了荧光效率，从而增加了荧光强度。这就是胶束溶液对荧光的增敏作用。

此外，胶束溶液提供了一种对激发单线态的保护性环境，荧光物质被分散和定域于胶束中，得到了了有效屏蔽，即降低了溶剂中可能存在的荧光猝灭剂的猝灭作用，也降低了因光物质因为自身浓度太大产生的自猝灭，从而延长了荧光物质的寿命。这就是胶束溶液对荧光的增稳作用。由于胶束溶液增稳和增敏作用，胶束溶液作为荧光介质可以大大荧光分析方法的灵敏度和稳定性， 从而发展了分子荧光分析新技术。

6.6 荧光偏振（polarizer）及各向异性 (anisotropy ) 测量

在荧光光度计的激发和发射光路上分别加上起偏器和检偏器，即可仪对检偏器的取向平行或或垂直于起偏器的取向的情况下分别观察到荧光强度。。荧光偏振不仅与荧光体分子形状荧光物质吸光对偏振激发的取向，光选择性以及与激发矩和发射距是否为共线的共振偶极体有关，而且许多外界因素，如环境的黏度等都会影响和改变其偏振度，从而在生物化学领域获得广泛应用。例如已经用于确定生物分子间的缔合反应量，膜内微黏度膜组成对膜相变的影响。荧光体的偏振度与荧光体的转动速度成反比这一特性，可用于荧光免疫分析中。例如，当小分子荧光体被联结到大分子蛋白质或抗体后，由于体积变大，分子转动速度变慢，偏振度增大。若样品中存在小分子抗原，则连接于抗体上的荧光体可能被抗原夺走，结果偏振度下降，从而可用于抗原或抗体的测定。

7应用

7.1 有机化合物的测定

有机化合物中脂肪族化合物分子结构简单，能够产生荧光的为数不多。芳香