微生物学考研复习资料(7)
3)病毒核酸的结构特征
不同病毒的核酸均可能具有各自不同的结构特征:粘性未端;循环排列;未端重复等 2、病毒的蛋白质 1)非结构蛋白
病毒基因组编码的,在病毒复制过程中产生并具有一定功能,但并不结合于毒粒中的蛋白质。 2)结构蛋白
构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质。
有壳体蛋白;包膜蛋白;存在于毒粒中的酶等病毒结构蛋白的主要生理功能:
1)构成蛋白质外壳,保护病毒核酸免受核酸酶及其它理化因子的破坏;2)决定病毒感染的特异性,与易感细胞表面存在的受体具特异性亲和力,促使病毒粒子的吸附和入侵; 3)决定病毒的抗原性,能刺激机体产生相应的抗体;
4)构成毒粒酶,或参与病毒对宿主细胞的入侵(如T4噬菌体的溶菌酶等),或参与病毒复制过程中所需要病毒大分子的合成(如逆转录酶等);
3、病毒的脂类;4、病毒的糖类;5、病毒的其它组成。
第三节 病 毒 的 复 制病毒的特点:严格细胞内寄生物,只能在活细胞内繁殖。
病毒的复制:病毒感染敏感宿主细胞后,病毒核酸进入细胞,通过其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质,然后由这些新合成的病毒组分装配(assembly)成子代毒粒,并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊繁殖方式称做复制(replication)。
一、 病毒的复制周期1、一步生长曲线(one step growth curve)
1939年,Max Delbruck & Emory Ellis以(E. coli / bacteriopage)为研究系统方法步骤如下: 1)用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞;
2)数分钟后,加入抗噬菌体的抗血清(中和未吸附的噬菌体);
3)将上述混合物大量稀释,终止抗血清的作用和防止新释放的噬菌体感染其它细胞; 4)保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价(对噬菌体含量进行计数);
以感染时间为横坐标,病毒的感染效价为纵坐标,绘制出病毒特征性的繁殖曲线。
该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立,Max Delbruck因此荣获1969年Nobel Prize。
A 噬菌体复制(繁殖)的三个阶段: 1)吸附期;游离的噬菌体吸附到宿主细胞,
2)潜伏期;从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期, 3)裂解期;随着菌体不断破裂,新噬菌体数目增加,直到最高值。 B 裂解量:每个受染细胞所产生的子代病毒颗粒的平均数目。
其值等于潜伏期受染细胞的数目除以稳定期受染细胞所释放的全部子代病毒数目,即等于稳定期病毒效价与潜伏期病毒效价之比。 2、隐蔽期(eclipse period)
自病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间为隐蔽期。
在潜伏期的前一段,受染细胞内检测不到感染性病毒,后一阶段,感染性病毒在受染细胞内的数量急剧增加。
病毒一步生长曲线:以适量的病毒接种于标准培养的高浓度的敏感细胞,待病毒吸附后,离心除去未吸附的病毒,或以抗病毒抗血清处理病毒—细胞培养物以建立同步感染,然后继续培养并定时取样测定培养物
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中的病毒效价,并以感染时间为横坐标,病毒的感染效价为纵坐标,绘制出病毒特征性的繁殖曲线,即一步生长曲线。
潜伏期长短:不同病毒的潜伏期长短不同,噬菌体以分钟计;动物病毒和植物病毒以小时或天计。 裂解量:噬菌体的裂解量一般为几十到上百个,植物病毒和动物病毒可达数百乃至上万个。 3、病毒的复制周期
自病毒吸附于细胞开始,到子代病毒从感染细胞释放到细胞外的病毒复制过程。 ① 吸附;② 侵入;③ 脱壳;④ 病毒大分子的合成;⑤ 装配与释放。 二、病毒感染的起始(① 吸附;② 侵入;③ 脱壳) 吸附
1)病毒吸附蛋白(反受体 antireceptor); 2)细胞受体;3)病毒的吸附过程。
不同种系的细胞具有不同病毒的细胞受体,病毒受体的细胞种系特异性决定了病毒的宿主范围(如噬菌体吸附于大肠杆菌性毛上)。 2、侵入
不同的病毒-宿主系统的病毒侵入机制不同。 有尾噬菌体:注射方式将噬菌体核酸注入细胞;
动物病毒:①移位:完整病毒穿过细胞膜的移位方式;②内吞:细胞的内吞功能;
③融合:粒包膜与细胞质的融合;
植物病毒:①伤口:通过因人为地或自然的机械损伤所形成的微伤口进入细胞;
②昆虫:靠携带有病毒的媒介,主要靠是有吮吸式口器的昆虫取食将病毒带入细胞。
3、脱壳
脱壳是病毒侵入后,病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸的过程。 三、病毒大分子的合成
病毒利用宿主的生物合成机构和场所,使病毒核酸表达和复制,产生大量的病毒蛋白质和核酸。四、病毒的装配与释放
1、装配:新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒,称做病毒的装配,亦称成熟(maturation)或形态发生(morphogenesis)。 2、释放:成熟的子代病毒颗粒然后依一定途径释放到细胞外。 大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放;有些子代毒粒以分泌方式。 释放方式: 裂解; 分泌;芽出第三节 病毒的非增殖性感染 一、基本概念
1、增殖性感染(productive infection):感染发生在病毒能在其内完成复制循环的允许细胞内,并以有感染性病毒子代产生为特征;
2、非增殖性感染(non productive infection):感染由于病毒、或是细胞的原因,致使病毒的复制在病毒进入敏感细胞后的某一阶段受阻,结果导致病毒感染的不完全循环。在此过程中,由于病毒与细胞的相互作用,虽然亦可能导致细胞发生某些变化,甚至产生细胞病变,但在受染细胞内,不产生有感染性的病毒子代。
3、烈性噬菌体(virulent phage):感染宿主细胞后能在细胞内正常复制并最终杀死细胞,形成裂解循环(lytic cycle)。
4、温和噬菌体或称溶源性噬菌体(lysogenic phage):感染宿主细胞后不能完成复制循环,噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内,没有成熟噬菌体产生。这一现象称做溶源性(lysogeny)现象。
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5、溶源性(lysogeny)现象
A 温和噬菌体的基因组整合于宿主染色体中(如λ噬菌体,多数情况);
B 温和噬菌体以质粒形成存在(如P1噬菌体,少数情况)。6、原噬菌体:把整合在寄主细胞的染色体上的噬菌体(或病毒核酸),称为原噬菌体。
7、溶原性细菌:含有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。
细菌的溶原性是一种遗传特性,溶原性细菌的子代一般也是溶原性的。(溶原性细菌的命名是在敏感菌株后加一括弧,其上写上温和噬菌体。如E.coli K12(λ)表示λ噬菌体是一种温和噬菌体,寄生在大肠杆菌K12菌株细胞内)。 二、溶源性感染对细胞的影响
溶源菌中的温和噬菌体基因组通常不影响细胞的繁殖功能,但它们可能引起其他的细胞变化。 (1)免疫性
(2)溶源转变:原噬菌体引起的溶源性细菌除免疫性外的其他的表形改变,包括溶源菌细胞表面性质的改变和致病性转变被称为溶源转变(lysogenic conversion)。
第 8 章 微生物遗传
表型饰变:表型的差异只与环境有关。
特点:暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为。遗传型变异(基因变异、基因突变):遗传物质改变,导致表型改变。
特点:遗传性、群体中极少数个体的行为(自发突变频率通常为10-10)
第一节 遗传的物质基础一、DNA作为遗传物质
1)Griffith肺炎球菌转化实验(192 …… 此处隐藏:4645字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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