中国海洋大学食品考研生物化学2000-2010真题(5)

11、别构效应：多亚基蛋白一般具有多个结合部位，结合再蛋白质分子的特定部位上的配体对该分子的其他部位产生的影响称为别构效应

12、G蛋白：全名GTP结合蛋白，它既与GTP结合，也与GDP结合，是一类信号传递蛋白

13、Na+-K+ATP酶：是一个跨膜的Na+-K+泵，即通过水解ATP提供的能量主动向外运输Na+，而向内运输K+

14、Motif：是具有特殊功能的超二级结构，是二个或三个具有二级结构的肽段，再空间上相互接近形成的一个具有特殊功能的超二级结构

15、质粒：染色体外自主复制的遗传因子，多为共价闭环的DNA分子

五、问答题

1、（1）前处理：分离纯化某中蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来，并保持原来的天然状态，不丢失生物活性就。对于猪肝应先剔除结缔组织和脂肪组织，再用电动捣碎机等设备对猪肝进行细胞破碎，再选择适当的缓冲液把SOD酶提取出来，细胞破碎等不溶物用离心或过滤的方法除去

（2）粗分级分离：当蛋白质提取液获得后，选用一套释放的方法，将所需蛋白质与其他杂质分离开。对于SOD酶可以选用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离法等。

（3）细分级分离：也就是样品的进一步纯化。对于SOD酶可选用层析法进行纯化

（4）结晶：是蛋白质分离纯化的最后步骤，尽管结晶并不能保证蛋白质一定是均一的，但只有某种蛋白质再溶液中的数量占有优势时才能形成结晶，结晶过程本身也伴随这一定程度的纯化。对于细分级分离后得到的SOD酶可以进行结晶。

2、蛋白质的结构和功能之间具有高度的统一性和适应性，二者密切相关。在丝氨酸蛋白酶中胰凝乳蛋白酶的结构是个典型。它的结构是以个紧密球状实体，活性中心位于酶分子表面凹陷的小口袋中，这个沟较深，说明了胰凝乳蛋白酶对芳香族和其他大的疏水性侧链的专一性的功能，在活性中心中His57与Ser195相临近，Asp102的羰基也在其附近，这3个残基形成了催化三联体，这种结构构成了酶的催化活性。在催化过程中，专一性侧链进入酶的口袋，然后通过酸碱催化和共价催化完成催化作用。正是蛋白质结构和功能之间的这种统一性和适应性，才是胰凝乳蛋白酶巧妙的完成了它的催化作用，可见蛋白质结构和功能的密切相关。

3、（1）化学偶联假说：见2007（2）构象偶联假说：见2007

（3）化学渗透假说：这种假说认为电子传递释放出的自由能和ATP合成是与一种跨线粒体

内膜的质子梯度相偶联，也就是电子传递的自由能驱动氢离子从线粒体基质跨过内膜进入到间隙，从而形成跨线粒体内膜的氢离子电化学梯度，这个梯度的电化学势驱动ATP的合成，这种假说可以解释很多关键现象：

①氧化磷酸化作用的进行需要封闭的线粒体内膜

②线粒体内膜对氢离子、氢氧根离子、钾离子、氯离子等离子都是不通透的

③破坏氢离子浓度梯度的形成都必然破坏氧化磷酸化作用的进行

④线粒体电子传递所形成的电子流能够将氢离子从线粒体内膜逐出到线粒体间隙

⑤大量实验表明膜表面不仅能滞留大量质子，而且在一定条件下，质子能沿膜表面迅速转移，其速度超过在大量水相中的速度

4、乳糖操纵子包括启动子、操纵基因和三个结构基因（分别编码分解乳糖所需要的3种酶），乳糖操纵子的操纵基因lacO不编码任何蛋白质，它是另一位点上调节基因lacI所编码的阻遏蛋白的结合部位，阻遏蛋白是一种变构蛋白，当细胞中有乳糖或其他诱导物的情况下阻遏蛋白便和他们结合，结果使阻遏蛋白的构象发生了改变而不能结合到lacO上，于是转录便得以进行，从而使吸收和分解乳糖的酶被诱导产生。如果细胞中没有乳糖或其他诱导物则阻遏蛋白就结合在lacO上，阻止了结合在启动子P上的RNA聚合酶向前移动，使转录不能进行

5、（1）关键调控步骤：

在糖酵解中：

①葡萄糖在己糖激酶作用下生成葡萄糖—6—磷酸

②果糖—6—磷酸在磷酸果糖激酶作用下生成果糖—1，6—二磷酸

③磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶作用下生成丙酮酸

其中第②步是主要的

TCA循环中：

①草酰乙酸和乙酰辅酶A在柠檬酸合酶作用下缩合形成柠檬酸

②异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下形成α—酮戊二酸

③α—酮戊二酸在α—酮戊二酸脱氢酶作用下生成琥珀酰辅酶A

其中第①步是主要的

(2) 氧化还原步骤：

①甘油醛—3—磷酸在甘油醛—3—磷酸脱氢酶作用下氧化成1，3—二磷酸甘油酸(NADH) ②异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下形成α—酮戊二酸(NADH)

③α—酮戊二酸在α—酮戊二酸脱氢酶作用下生成琥珀酰辅酶A(NADH)

④琥珀酸在琥珀酸脱氢酶作用下形成延胡索酸（FADH2）

⑤苹果酸在苹果酸脱氢酶作用下生成草酰乙酸（NADH）

⑥丙酮酸在丙酮酸脱氢酶作用下生成乙酰辅酶A（NADH）

(3)ATP数目：

①底物水平的磷酸化作用：在糖酵解起始阶段先消耗了2分子ATP用于底物的磷酸化，然后形成的1，3—二磷酸甘油酸和磷酸烯醇式丙酮酸，分别可以形成3—磷酸甘油酸和丙酮酸，并各产生1分子ATP，这样1分子葡萄糖糖酵解就在底物水平的磷酸化作用上净形成了2分子ATP。在TCA循环中琥珀酰辅酶A转变为琥珀酸形成了1分子GTP（相当于ATP），1分子葡萄糖就生成了2个GTP

②氧化磷酸化作用：如上1分子葡萄套共产生10分子NADH和2分子FADH2，共生成ATP为2.5*10+1.5*2=28个

1分子葡萄糖有氧氧化共产生ATP28+4=32个

2005年

一、填空

1、 α—1，4糖苷键：

①糖原磷酸化酶（a活、b）：只能催化α—1，4糖苷键磷酸解，发生在碳和氧之间，形成葡萄糖—1—磷酸，需要辅助因子：磷酸吡哆醛（PLP，氨基转移作用中也是一个重要的辅助因子）

②糖原脱支酶：催化α—1，6糖苷键水解，产生葡萄糖

③磷酸葡萄糖变位酶：需要少量葡萄糖—1，6—二磷酸的存在才能充分发挥活性

④UDP—葡萄糖焦磷酸化酶：催化葡萄糖—1—磷酸与UTP生成UDP—葡萄糖（UDPG），葡萄糖形成UDPG的重要生物学意义就在于它使葡萄糖变为更活泼的活化形式

⑤糖原合酶：不能从0开始合成，需要引物：生糖原蛋白（糖原素），它具有自动催化功能，可催化8个UDPG连续以α—1，4糖苷键连接，形成糖原分子的核心，在此基础上糖原合酶在进行合成，糖原分子的延长与否取决于糖原合酶与生糖原蛋白的相互作用，糖原合酶一旦脱离生糖原蛋白，就不在进行合成

⑥糖原分支酶：从非还原末端约7个葡萄糖残基（至少已经有11个残基了）处断开α—1，4糖苷键，转移到同一或其他糖原分子靠内部的某个葡萄糖残基上，形成α—1，6糖苷键，糖原分支增加了糖原的可溶性，还增加了非还原末端的数目，从而大大提高了糖原的分解、合成效率

2、细胞溶胶 果糖—6—磷酸形成果糖—1，6—二磷酸 线粒体 草酰乙酸与乙酰辅酶A缩合成柠檬酸 琥珀酰辅酶A转化成琥珀酸生成GTP

3、Vmax·[S]/(Km+[S]) 增大：Km的物理意义，Km是当酶反应速率达到最大反应一半时的底物浓度，单位是mol/L。1/Km可以近似的表示酶对底物亲和力的大小，大大、小小

4、丙酮酸 α—酮戊二酸 5、帽子（3’端有多聚腺苷酸尾巴） 6、丙氨酸 核内不均一RNA ribozyme 聚丙烯酰胺凝胶电泳

二、名词解释

++2+1、福林—酚反应：福林—酚试剂定量的与Cu反应，Cu是由蛋白质的易氧化成分还原Cu

产生的

2、无规则卷曲：或称卷曲，它泛指那些 …… 此处隐藏：3019字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……