德州地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定及灭活疫苗免疫保护效力研究

山东农业大学

硕士学位论文

德州地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定及灭活疫苗免疫保护效力研

究

姓名：宋凤香

申请学位级别：硕士

专业：兽医·兽医病原微生物学

指导教师：姜世金

20090606

东农、Ｊｋ大学硕Ｉ：专业学位沦文

德州地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定

及灭活疫苗保护效力研究

中文摘要

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌所引起的猪的多发性浆膜炎、多发性关节炎、脑膜炎、支气管炎和败血症。ＨＰｓ是一种ＮＡＤ依赖型、不运动的革兰氏阴性细小杆菌，属于巴斯德菌科（Ｐａｓｔｔｅｕｒｅｌｌａｃｅａｅ）嗜血杆菌属（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）。随着我国规模化养猪场的发展，副猪嗜血杆菌感染有明显增加趋势，已成为猪场保育仔猪发病率和死亡率增加的重要原因之一，并给养猪业造成严重经济损失。

本研究主要分四部分进行：

１．本研究从德州地区３２个规模化猪场分离到副猪嗜血杆菌２０株，这些菌株在菌落形态、菌体形态、染色特性、生化反应等方面符合副猪嗜血杆菌的基本特征，ＰＣＲ检测也进一步证实分离菌株为副猪嗜血杆菌，证实了山东省德州地区规模化猪场中普遍存在副猪嗜血杆菌的流行。

２．药敏试验结果显示，这２０株副猪嗜血杆菌对上霉素、链霉素、四环素、林可霉素等药物不敏感，而对头孢他啶、头孢噻吠、氧氟沙星、多西环素、环丙沙星等５种药物比较敏感。

３．对德州地区副猪嗜血杆菌ＤＺ０２分离株的生长曲线研究表明，副猪嗜血杆茼在ＴＳＢ液体培养基中培养到１３＂－１５小时菌体的数目达到最高峰，因此，副猪嗜血杆菌菌液在培养１５ｈ左右时是用于副猪嗜血杆菌灭活疫苗制备的最佳时机。

４．以副猪嗜ｍ杆菌ＤＺ０２分离株为抗原研制的副猪嗜血杆菌油乳剂灭活疫苗物理性状稳定，安全性良好，并具有较好的免疫保护效力。含菌数为８×１０“ｃｖｕ／头副猪嗜血杆菌油乳剂灭活疫苗加强免疫后１４天可有效保护免疫猪免受同源副猪嗜血杆菌菌株攻毒发病，在德州市五个规模化猪场

德州地区剐猪嗜阻杆菌的分离豁定及火活疫苗保护效力研究

实际应用可保护大群发病率降低至１．９％，比未免疫猪群发病率下降９．０％，且五个免疫猪群的副猪嗜血杆菌病的发病率均控制在２．５％以下。关键词：副猪嗜血杆菌，分离鉴定，药敏试验，生长曲线，灭活疫苗

ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｐａｒａｓｕｉｓｉｎＤｅｚｈｏｕＣｏｕｎｔｙａｎｄＳｔｕｄｙ

ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｏｎＥｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＩｎａｃｔｉｖａｔｅｄＶａｃｃｉｎｅ

ａｇａｉｎｓｔＧｌａｓｓｅｒ’ＳＤｉｓｅａｓｅ

ＡＢＳＴＲＡＣＴ

ＨａｅｍｐｏｈｉｌｕｓＰａｒａｓｕｓｉ（ＨＰｓ）ｉｓｔｈｅｅｔｉｏｌｏｇｉｃａｌａｇｅｎｔｏｆＰｏｒｃｉｎｅＧｌｓｓｅｒ，ＳＤｉｓｅａｓｅ，ｗｈｉｃｈ

ｂｙｃａｎｉｎｖａｄｅａｎｄｃａｕｓｅｓｅｖｅｒｅｓｙｓｔｅｍｉｃｄｉｓｅａｓｅ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｉｓａｆｉｂｒｉｎｏｕｓｐｏｌｙｓｅｒｏｓｉｔｉｓ，ａｒｔｈｒｉｔｉｓａｎｄｍｅｎｉｎｇｉｔｉｓ．ＨＰｓｋｉｎｄｏｆＮＡＤ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ，ｎｏｎ－ｍｏｔｉｏｎ，Ｇｒｍａ．ｎｅｇｍｉｖｅ，ｒｏｄ—ｓｈａｐｅｄｂａｅｔｅｒｉｕｍ．ｗｈｉｃｈｂｅｌｏｎｇｓｔｏｔｈｅｆａｍｉｌｙｏｆＰａｓｔｔｅｕｅｒｌｌａｅｅａｅ，ｔｈｅｇｅｎｕｓＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ．ＴｈｅｈｉｇｈｅｒｐｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆＨＰｓｉｎｉｎｔｅｎｓｉｖｅｐｉｇｆａｒｍｓｈａｓｂｅｃｏｍｅｔｈｅｍａｉｎｒｅａｓｏｎｆｏｒｔｈｅｈｉｇｈｍｏｒｔａｌｉｔｙｏｆｙｏｕｎｇｐｉｇｓａｎｄｌｅｄｔｏｔｈｅｈｕｇｅｅｃｏｎｏｍｉｃｌｏｓｓｅｓ．

ＴｈｒｅｅＰａｒｔｓｈａｖｅｂｅｅｎｉｎｅｌｕｄｅｄｉｎｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：

１．Ｔｈｅｏｐｅｒａｔｉｏｎｏｆｐｕｒｅｃｕｌｔｕｒｅ，ｄｙｅａｎｄｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ。ａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆ２０ｉｓｏｌａｔｅｓｏｆＨＰｓｆｒｏｍ３２ｐｉｇｆａｒｍｓｏｆＤｅｚｈｏｕｃｏｕｎｔｙｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｃｕｌｔｕｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｐａｔｔｅｍｓｏｆｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｂａｓｉｃｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅ２０ｓｔｒａｉｎｓａｒｅｂａｓｉｃａｌｌＶ

ＰＣＲｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｐｕｂｌｉｓｈｅｄｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＨＰｓ．１６ｓｒＲＮＡ－ｂａＳｅｄ

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ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＨＰｓｉｓｐｒｅｖａｌｅｎｔｉｎＤｅｚｈｏｕｃｏｕｎｔｙｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ．

２．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆＡＳＴｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅ２０ｉｓｏｌａｔｅｓｏｆＨＰｓａｒｅｉｎｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｆｏｒＴｅｒｒａｍｙｃｉｎ，Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ，ＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅａｎｄＬｉｎｃｏｍｙｃｉｎ，ｂｕｔｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｆｏｒＣｅｆｉａｚｉｄｉｍ，Ｃｅｆｌｉｏｆｕｒ，Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ，ＤｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅａｎｄＣｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ．３．ＳｔｕｄｙｏｎｇｒｏｕｔｈｃｕｒｖｅｏｆＤＺ０２ｉｓｏｌａｔｅｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆ

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３

德州地区副猪嗜血杆菌的分离豁定及火｝玉疫茁保护效力研究

４．ＴｈｅｉｎａｃｔｉｖｅｄｖａｃｃｉｎｅｍａｄｅｆｒｏｍＤＺ０２ｉｓｏｌａｔｅｐｏｓｓｅｓｓｅｄｇｏｏｄｓａｆｅｔｙ，ｈｉｇｈｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｅｎｏｕｇｈｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ａｔ１４ｄａｙｓａｆｔｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｄｏｓｅｏｆＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｐａｒａｓｕ必ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄｖａｃｃｉｎｅｗｉｔｈ８×１０５ＣＦＵｐｅｒｐｉｇ．ｔｈｅｖａｃｃｉｎｅｄｐｉｇｌｅｔｓｗｅｒｅｐｒｏｔｅｃｔｅｄｆｒｏｍｌｅｔｈａｌｃｈａｌｌｅｎｇｅ．ＡｔｆｉｖｅｌａｒｇｅｓｃａｌｅｐｉｇｆａｒｍｓｉｎＤｅｚｈｏｕｃｏｕｔ５ｔｈｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆＰｏｒｃｉｎｅＧｌｓｓｅｒ’ＳＤｉｓｅａｓｅｏｆｖａｃｃｉｎｅｄｐｉｇｌｅｔｓｗａｓｄｒｏｐｐｅｄｔｏ

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Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＨａｅｍｐｏｈｉｌｕｓＰａｒａｓｕｓｉ，ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉ …… 此处隐藏：2136字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……