实验一 果蔬呼吸强度测定

实验一 果蔬呼吸强度测定

一、目的及原理

呼吸作用是果蔬采收后进行的重要生理活动，是影响贮运效果的重要因素。测定呼吸强度可衡量呼吸作用的强弱，了解果蔬采后生理状态，为低温和气调贮运以及呼吸热计算提供必要的数据。因此，在研究或处理果蔬贮藏问题时，测定呼吸强度是经常采用的手段。 呼吸强度的测定通常是采用定量碱液吸收果蔬在一定时间内呼吸所释放出来的CO2，再用酸滴定剩余的碱，即可计算出呼吸所释放出的CO2量，求出其呼吸强度。其单位为每公斤每小时释放出CO2毫克数。

反应如下：

2NaOH + CO2→Na2CO3 + H2O

Na2CO3 + BaCl2→BaCO3↓ + 2NaCl

2NaOH + H2C2O4 →Na2C2O4 + 2H2O

测定可分为气流法和静置法两种。气流法设备较复杂，结果准确。静置法简便，但准确性较差。

二、药品与器材

苹果、梨、柑橘、番茄、黄瓜、青菜等。

钠石灰、20%氢氧化钠、0.4mol/l氢氧化钠、0.1mol/l草酸、饱和氯化钡溶液、酚酞指示剂、正丁醇、凡士林。

真空干燥器、大气采样器、吸收管、滴定管架、铁夹、25ml滴定管、15ml三角瓶、500ml烧杯、φ8cm培养皿、小漏斗、10ml移液量管、洗耳球、100ml容量瓶、万用试纸、天平。

三、操作与步骤

气流法：

气流法的特点是果蔬处在气流畅通的环境中进行呼吸，比较接近自然状态，因此，可以在恒定的条件下进行较长时间的多次连续测定。测定时使不含CO2的气流通过果蔬呼吸室，将果蔬呼吸时释放的CO2带入吸收管，被管中定量的碱液所吸收，经一定时间的吸收后，取出碱液，用酸滴定，由碱量差值计算出CO2量。

1.按图（暂不连接吸收管）连接好大气采样器，同时检查不使有漏气，开动大气采样器中的空气泵，如果在装有20%NaOH溶液的净化瓶中有连续不断的气泡产生，说明整个系统气密性良好，否则应检查各接口是否漏气。

2.用天平称取果蔬材料1kg，放入呼吸室，先将呼吸室与安全瓶连接，拨动开关，将空气流量调节在0.4l/min；将定时钟旋钮反时钟方向转到30min处，先使呼吸室抽空平衡0.5h，然后连接吸收管开始正式测定。

3.空白滴定用移液管吸取0.4mol/l的NaOH10ml，放入一支吸收管中；加一滴正丁醇， 稍加摇动后再将其中碱液毫无损失的移到三角瓶中，用煮沸过的蒸馏水冲洗5次，直至显中性为止。加少量饱和的BaCl2溶液和酚酞指示剂2滴， 然后用0.1mol/l H2C2O4（草酸）滴定至粉红色消失即为终点。记下滴定量，重复一次，取平均值，即为空白滴定量（V1）。 如果两次滴定相差0.1ml，必须重滴一次，同时取一支吸收管装好同量碱液和一滴正丁醇。放在大气采样器的管架上备用。

4.当呼吸室抽空0.5h后，立即接上吸收管、把定时针重新转到30min处，调整流量保持0.4l/min。待样品测定0.5h后，取下吸收管，将碱液移入三角瓶中， 加饱和BaCl2 5ml和酚酞指示剂2滴，用草酸滴定，操作同空白滴定，记下滴定量（V2）。

计算公式：

(V1-V2)×0.1mol/l×44

呼吸强度（CO2mg/kg.h）=————————————

W×H

W= 样品重量

h= 测定时间

也可直接查换算表、将所得到CO2的毫克数除以样品重和测定时间，即为呼吸强度。

静置法：

静置法比较简便，不需特殊设备。测定时将样品置于干燥器中，干燥器底部放入定量碱液，果蔬呼吸释放出的CO2自然下沉而被碱液吸收，静置一定时间后取出碱液，用酸滴定，求出样品的呼吸强度。

用移液管吸取0.4mol/l的NaOH20ml放入培养皿中，将培养皿放进呼吸室，放置隔板，放入1kg果蔬，封盖。测定1小时后，取出培养皿把碱液移入烧杯中（冲洗4—5次），加饱和BaCl2 5ml和酚酞指示剂2滴，用0.1mol/l草酸滴定，用同样方法作空白滴定。计算同气流法。

四、结果与计算

1.将测定的数据填入下列表中

2.列出计算式并计算结果