天然胡萝卜素的提取及分离

从胡萝卜中提取胡萝卜素

第24卷

第3期　

Vol.24No.3

重庆理工大学学报(自然科学)

JournalofChongqingUniversityofTechnology(NaturalScience)

2010年3月Mar.2010

天然胡萝卜素的提取及分离

王　敏,祝渊静,赵国良,李　彪,宋　磊

(重庆理工大学化学化工学院,重庆　400050)

3

摘　　　要:采用浸取法从胡萝卜中提取胡萝卜素,响。使用薄层色谱(TLC)、,素含量。研究结果表明:用丙酮(,提取的胡萝卜素含量可达995μg∕,两者比例为9∶1时分离;,洗脱剂为石油醚和乙醚的混合液时色带分离明显关

键

词:胡萝卜;胡萝卜素;薄层色谱;柱色谱

文章编号:1674-8425(2010)03-0028-05

中图分类号:Q562　　　　文献标识码:A

StudyonExtractionandSeparationofNaturalCarotene

WANGMin,ZHUYuan2jing,ZHAOGuo2liang,LIBiao,SONGLei

(CollegeofChemistryandChemicalEngineering,ChongqingUniversityofTechnology,Chongqing400050,China)

Abstract:Caroteneisextractedfromcarrotwithextractionimmersion.Thisarticlestudiestheeffectofextractionagentonthecaroteneextractionwiththeapplicationof.ThinLayerChromatography(TLC)andColumnChromatographyareusedtoseparateandpurifytheextractedcarotene,andspec2trophotometryisusedtodetectthecontent.Theresultsshowthattheextractionwithactone-petrole2umether(3:7)isbetter,withcontentashighas995μg/g.Theseparationisbetterwhenthemix2tureofpetroleumetherandaetherischosentobethedevelopingagents(9∶1).ThewashingspeedandeffectofColumnChromatographyisrelatedtothepolarityofagent.Thecolorstripeseparationisclearwhenthemixtureofpetroleumetherandaetherisusedaswashingagent.Keywords:carrot;carotene;thinlayerchromatography;columnchromatography

　　胡萝卜属伞形花科根菜类蔬菜,口味甘甜,营养价值极高,享有“小人参”的美誉。研究表明,胡萝卜中含有蛋白质、脂肪、糖类、胡萝卜素等多种生命体基本物质,也含有丰富的钙、铁等矿物质

[1-2]

转化成维生素A以外,还能消灭单线态氧,清除自由基,提高人体免疫力,延缓细胞和机体衰老,减少疾病的发生,其护肝等独特功能越来越受到医药、保健食品行业的研究人员的关注与重视

[3]

。

,其中所含的β-胡萝卜素除了可以在体内

由此可见,胡萝卜素有着无可替代的食用和药用

　3　收稿日期:2009-10-15

项目基金:重庆市教委科学技术研究项目(KJ090617)

作者简介:王敏(1975—),女,四川资中人,硕士,实验师,主要从事有机化学研究。

从胡萝卜中提取胡萝卜素

王　敏,等:天然胡萝卜素的提取及分离

价值,所以对胡萝卜素的研究也一直成为行业领域研究的热点。

胡萝卜素的来源主要是有2种途径,一种是化学方法合成而得:另一种是天然物质提取而得到。采用化学合成的方法得到的胡萝卜多少都含有其它化学成分导致产物不纯:而采用从天然物质中提取的方法就能避免这个问题。目前,天然胡萝卜素的生产来源主要有盐藻提取,生物发酵,高等植物提取等。但这些方法存在生产条件苛刻,产量小等缺点。从胡萝卜中提取胡萝卜素,因其原料丰富,产物得率高受关注。谱法分离

[4-5]

29

油醚稀释定容到50mL容量瓶中,分别准确移取1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00mL

定容至25mL,在波长450nm处测定吸光度,绘制标准曲线,相关系数为0.9997。实验结果见图1和2

。

,

,操作简单,经济实用,,易于控制。本文中主要研究用非极性溶剂从天然胡萝卜中提取胡萝卜素,并采用薄层色谱和柱层色谱相结合的方法进行分离纯化,其工艺投资小,效果好,可为胡萝卜的深加工提供有力参考。

1　实验

1.1　仪器与试剂

仪器:TU-1901紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司生产;石英比色皿;AB2S/FACT分析天平,梅特勒-托利多仪器有限

1.3　胡萝卜中胡萝卜素的提取

鲜胡萝卜洗净,于研钵中捣烂,加入无水硫酸钠,用提取液进行提取。合并几次的提取混合液,静置,用分液漏斗将水相分去,再用无水硫酸钠干燥约1h。随后将混合液转移至蒸馏烧瓶,水浴加热蒸馏,除去溶剂,得到的固体物即为胡萝卜素粗品。

1.4　薄层色谱分离胡萝卜素

公司生产;色谱柱(20cm×1cm)。

试剂:β-胡萝卜素标准品,天津市光复精细化工研究所生产;市售新鲜胡萝卜,个体完整、均匀,颜色橙红;硅胶G,青岛裕民源硅胶试剂厂生产;丙酮、石油醚(bp60℃～90℃)、无水乙醚、乙醇、氨水、无水硫酸钙等试剂均为分析纯。1.2　胡萝卜素含量测定方法和标准曲线的

称取10g硅胶G,与蒸馏水以体积比1:4比例混合。加入羧甲基纤维素钠(CMC)0.4g,充分研磨调成均匀糊状,制板,每块薄层板的厚度为0.25～1mm。晾干后在l10℃活化1h,备用。点

绘制

[6-7]

取一定量的胡萝卜素标准样品用石油醚稀释,在波长200～800nm范围内,用TU-1901紫外可见分光光度计进行波谱扫描,测定胡萝卜素的最大吸收波长,作为胡萝卜素的测定波长。结果显示,在波长450nm处有最大吸收峰,如图1所示。再精确称取胡萝卜素标准样品5mg,用石

样时,在微量注射器将提取样品和标准品同时点在同一层析板上,用不同的展开剂展开,观察记录其层析情况,计算Rf值。1.5　柱色谱分离胡萝卜素

先在色谱柱中加入体积比为1∶7的乙醚。石

从胡萝卜中提取胡萝卜素

30重庆理工大学学报

油醚混合液至柱高的3/4,打开活塞,控制流速,通过玻璃漏斗加入层析硅胶,以避免装柱过程中产生气泡。再将色素混合物全部进入柱体,然后在层析柱上面装一滴液漏斗,内装9∶1(体积比)石油醚-丙酮洗脱剂,打开上下2个活塞,让洗脱剂逐滴放出,层析即开始进行。用锥型瓶收集,当第一个有色圈(橙黄色)将滴出时取另一锥形瓶收集,即得胡萝卜素。待黄色组分大部分洗出时,换用另一瓶子接收。继续洗脱,又可分出2个黄色组分。

1.6　紫外-可见光谱测定胡萝卜素含量

2.1　提取溶剂的确定

2　结果与分析

胡萝卜素属于脂溶性色素,极性较小,根据相似相溶原理,提取时应该采用极性较小的有机溶剂作为浸提液

[8]

。分别考察实验室中常用的极性

较小的有机溶剂如乙醚、石油醚丙酮、乙酸乙酯及其混合剂在不同配测量其浸取7份(每份50g),,分别用体积相等的不同提取液进行提取,得到的混合液稀释相同倍数后,用TU-1901紫外可见分光光度计在波长450nm处测定各个吸光度。根据吸光度值的大小可以得到最佳的提取溶剂,如表1所示。

,1m的比色皿中,,长450nm。根据其吸光度值。

表1　不同溶剂的提取效果比较

实验序号

1234567

溶剂名称丙酮石油醚乙醚乙酸乙酯丙酮∶石油醚乙醚∶石油醚苯∶石油醚

溶剂极性

5.10.012.94.3

溶剂配比(体积比)

————

3∶73∶73∶7

吸光度(Abs)

0.280.360.310.250.480.400.37

———

　　　　注:水的极性为10.2.

由上述实验结果可以看出:提取效果与溶剂的极性关系很大,用纯溶剂做提取液时,非极性溶剂石油醚的提取效果表现出明显的优势;中极性溶剂丙酮和乙酸乙酯的提取效果较差。但在混合溶剂中,丙酮和非极性的石油醚又表现出良好的提取效果 …… 此处隐藏：5307字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……