SphK1抑制剂SKI II抑制肝癌HepG2细胞周期及细胞侵袭

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药学学报 A c t a P h a r ma c e u t i c a S i n i c a 2 0 1 4, 4 9( 2 ): 2 0 4— 2 0 8

S p h K1抑制剂 S KI I I抑制肝癌 He p G2细胞周期及细胞侵袭张彩霞，刘虹，宫玉艳，何红伟，邵荣光(中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所，北京 1 0 0 0 5 o )

摘要：鞘氨醇激酶 1 ( s p h i n g o s i n e k i n a s e l, S p h K1 )在调控细胞基本生物学功能方面发挥重要作用，本研究考察了 S p h K1抑制剂 S K I I I对肝癌细胞 He p G2周期及侵袭的影响。采用 S R B方法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞周期分布，Ma t r i g e 1 . T r a n s we l l方法检测细胞侵袭能力，We s t e n r b l o t t i n g检测蛋白表达变化。结果表明， S KI I I能够抑制 He p G2细胞的存活，诱导 He p G2细胞发生 G1期阻滞以及抑制 He p G2细胞的侵袭； S KI I I能降低细胞 G 期相关蛋白 C D K2、C D K4以及 C d c 2的表达水平，同时降低与细胞侵袭相关的 MMP 2和 MMP 9的蛋白水平。结果提示， S p h K1抑制剂 S K I I I能引起细胞 Gl期阻滞及降低细胞侵袭能力，提示 S p h K1可能成为肝癌治疗的一个潜在靶点。

关键词： S p h K1: S KI I I;肝癌； He p G 2;细胞周期；侵袭中图分类号： R 9 6 3 文献标识码： A文章编号： 0 5 1 3 . 4 8 7 0( 2 0 1 4 ) 0 2— 0 2 0 4— 0 5

I n hi b i t i o ns o f S ph Kl i nh i bi t o r S KI I I o n c e l l c y c l e pr o g r e s s i o n a n d c e l l i n va s i o n o f he pa t o ma He pG 2 c e l l sZ HAN G Ca i— x i a, L I U Ho n g, G ON G Yu . y a n, HE Ho n g— we i, S HA O Ro n g . g u a n g

f I n s t i t u t e o f Me d i c i n a l B i o t e c h n o l o g y, C h i n e s e A c a d e m y f

Me o d i c a l S c i e n c e s&P e k i n g U n i o n Me d i c a l C o l l e g e B e i j i n g 1 0 0 0 5 0, C h i n a )

Ab s t r a c t:S p h i n g o s i n e k i n a s e 1 ( S p h K1 )p l a y s c r i t i c a l r o l e s i n c e l l b i o l o g i c a l f u n c t i o n s . He r e wei n v e s t i g a t e d t h e e f f e c t s o f S p h K1 i n h i b i t o r S KI I I o n h e p a t o ma He p G2 c e l l c y c l e p r o g r e s s i o n a n d i n v a s i o n . Ce l ls u r v i v a l W8 . S d e t e r mi n e d b y S RB a s s a y,c e l l c y c l e p r o g r e s s i o n wa s a s s a y e d b y lo f w c y t o me t r y,t h e a bi l i t y o f c e l l i n va s i o n wa s me a s u r e d b y Ma t r i g e l— Tr a n s we l l a s s a y a n d p r o t e i n e x p r e s s i o n wa s d e t e c t e d b y We s t e r n b l o t t i n g . T h e r e s ul t s s h o we d t ha t S KI I I ma r k e d l y i n h i b i t e d He pG2 c e l l s u r v i v a l i n a d o s e . d e p e n d e n t ma n n e r,i n d u c e d G1 p h a s e a r r e s t i n He p G2 c e l l a n d i n h i b i t e d c e l l i n v a s i o n. S KI I I ma r k e d l y d e c r e a s e d t h e e x p r e s s i o ns o f G1 - p h a s e . r e l a t e d p r o t e i n s CDK2. CDK4 a n d Cd c 2 a n d t h e l e v e l s o f c e l l

i n v a s i o n . a s s o c i a t e d p r o t e i n s MM P 2 a n d MMP 9. Th e r e s u l t s s h o we d t h a t S KI I I i n h i b i t e d c e l l c y c l e p r o g r e s s i o n a nd c e l l i n v a s i o n. i mpl y i ng S p h K1 a s ap o t e n t i a l t a r g e t f o r h e pa t o ma t r e a t me n t . Ke y wo r d s: S p h K1; S KI I I; h e p a t o ma; He p G2; c e l l c y c l e; i n v a s i o n

肝癌是严重威胁人类健康的疾病，据统计， 2 0 0 8 年全球有 7 4 8 3 0 0例肝癌新发病例和 6 9 5 9 0 0例肝癌收稿日期： 2 0 1 3 . 0 9 . 1 7;修回日期： 2 0 1 3 - 1 0— 1 6 .

死亡病例，其中 5 0%发生在中国【 1】。肝癌的发生与细胞内复杂的信号通路有关，找到对肿瘤发生发展起关键作用的靶点是肿瘤治疗的关键与难点。 鞘氨醇激酶 1( s p h i n g o s i n e k i n a s e 1, S p h K1 )是细胞生物学功能的重要调控分子。S p h K1能将促凋

基金项目：国家重点基础研究发展计划 ( 9 7 3计划 )资助项目 ( 2 0 0 9 C B5 2 1 8 0 );国家重大新药创制项目 ( 2 0 1 2 Z X0 9 3 0 1— 0 0 2 );国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 7 0 1 0 1 1, 8 1 2 7 3 5 5 4 ) . 十通讯作者T e l: 8 6 . 1 0— 6 3 0 2 6 9 5 6, F a x: 8 6— 1 0 - 6 3 0 1 7 3 0 2,

亡的鞘氨醇 ( s p h i n g o s i n e, S p h )磷酸化生成促存活的鞘氨醇 1一磷酸 ( s p h i n g o s i n e 1 - p h o s p h a t e,S I P ),从而

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