水稻旱育抛秧的特点及高产对策

水稻旱育抛秧的特点及高产对策

23(1)68-72　　　　　　　中国生物防治　ChineseJournalofBiologicalControl　　　　　　　2007年2月

水稻内生细菌的分离及其拮抗性与潜在

致病性测定

朱　凤1,2,陈夕军1,童蕴慧1,纪兆林1,徐敬友13

(11扬州大学园艺与植物保护学院,扬州225009;21江苏省植保站,南京210036)

摘要:从江苏省扬州、南通、常州和徐州等地水稻根、茎和种子分离获得内生细菌736个菌株,

其中对稻瘟病菌、稻恶苗病菌、稻纹枯病菌和稻白叶枯病菌拮抗的菌株分别占2017%、514%、311%和111%,且主要来自根和茎,并有24个和3个菌株分别对2种和3种病菌有拮抗活性。对稻瘟病菌和稻恶苗病菌拮抗的内生细菌转管培养20代后,,对其他,高拮抗菌株G87(对稻瘟病菌、稻恶苗病菌、和(、稻恶苗病菌拮抗)为枯草芽孢杆菌,少数(314%～418%)。

关　键　词;枯草芽孢杆菌;致病性;水稻

中图分类号:111114;S476　文献标识码:A　文章编号:100529261(2007)0120068205

IsolationofRiceEndophyticBacteriaandTheirAntagonismandPotentialPathogenicity

ZHUFeng,CHENXi2jun,TONGYun2hui,JIZhao2lin,XUJing2you

(SchoolofHorticultureandPlantProtection,YangzhouUniversity,Yangzhou225009,China)

Abstract:736endophyticbacteriawereobtainedfromtheroots,stemsandseedsofhealthyriceplantsinYangzhou,Nantong,ChangzhouandXuzhouofJiangsuProvince,China.Amongtheendophyticbacteri2a,thereweremanyisolatesantagonisticagainstthericepathogenssuchasMagnaporthegrisea,Gibberel2

lafujikuroi,RhizoctoniasolaniandXanthomonasoryzaepv.oryzae,withthepercentageof2017%,

514%,311%and111%,respectively,andtherewereafewofisolatesantagonistictotwoorthreepathogens.Theantagonisticbacteriafromricerootsandstemsweremorethanfromtheseeds.Aftertheantagonisticisolatesweretransferredfromtubetotubefor20times,mostofthemkepttheantagonismstableagainstM.griseaandG.fujikuroi,buttheantagonismtoR.solaniandX.oryzaepv.oryzaewassignificantlydecreasedorlost.Throughthetestsofmorphology,physiologyandbiochemistry,iso2latesG87antagonisticstronglyagainstM.grisea,G.fujikuroi,X.oryzaepv.oryzae,andJ215an2

收稿日期:2006203224

基金项目:江苏省科技攻关项目(BE2002303)

作者简介:朱凤(1979-),女,硕士;3通讯作者,E2mail:jyxu@http://doc.guandang.net。

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水稻旱育抛秧的特点及高产对策

　第1期　　　　　　　　朱凤等:水稻内生细菌的分离及其拮抗性与潜在致病性测定　　　　　　　　　　　

tagonisticstronglytoM.grisea,G.fujikuroiwereidentifiedasBacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn.Allendophyticbacteriawereinoculatedonricestemsbyneedle2prickingandontheleavesbyscissors2cuting.Theresultsshowedthatthegreatmajorityoftheendophyticbacteriawerenotvirulenttoriceplantsthoughafew(314%-418%)hadobviousorpotentialpathogenicity.

Keywords:endophyticbacteria;antagonism;Bacillussubtilis;pathogenicity;rice

植物内生菌是能够定殖在植物各种组织和器官的细胞间或细胞内,并与植物建立和谐联合关系的一类微生物[1],即在植物体内不引起明显组织变化的真菌或细菌[2]。它们与植物的关系可有三种:一是中性,对植物的生长发育和环境无明显影响;二是有益,能抑制植物病原物的侵染或促进植物的生长发育,如拮抗菌、促生菌、联合固氮菌等;三是有害,在适宜的条件下可引起植物病害[3,4]。许多研究者已从棉花、玉米、小麦、油菜、马铃薯、辣椒、葡萄等多种植物分离获得内生拮抗细菌,[5～10]。但是,水稻内生细菌及其拮抗性与致病性则报道很少[11],,并试图筛选出拮抗性强且稳定的内生细菌菌株,1　材料与方法

111　参照[13]:取新鲜并经水冲洗的水稻组织,浸入75%乙醇5min,再转入011%升汞中2～3min。水稻组织表面消毒后,以无菌水清洗,并转入研钵中,加入少量灭菌石

英砂和无菌水研磨。然后取汁液在肉汁胨培养基(BPA)平板上划线,28℃温箱中培养36～48h。以无菌水清洗液涂平板作对照。挑取单菌落,经纯化后保存备用。112　内生细菌对水稻病菌的拮抗性测定

11211　抑菌带测定　被测定的病菌为稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)、稻恶苗病菌(Gibberellafu2

jikuroi)、稻纹枯病菌(Rhizoctoniasolani)和稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae),由本实

验室提供。内生细菌对病原真菌的拮抗性测定采用平板对峙法[14]:将病原真菌菌丝块(直径5mm)移至马铃薯蔗糖培养基(PSA)平板中央,26℃下培养。待菌落直径长至3cm左右时,分别μ在距菌落边缘115cm处打孔并移去孔内培养基,每孔加入20l内生细菌液(109cfu/ml),28℃下培养48h,测量抑菌带宽度。以无菌水为对照,每处理重复3次。

内生细菌对病原细菌的拮抗性测定方法:将病原细菌液与BPA混匀制成含菌培养基,在

μ平板上打孔并移去孔内培养基,每孔加入20l内生细菌液(109cfu/ml),28℃下培养48h,测量抑菌带宽度。以无菌水为对照,每处理重复3次。

11212　拮抗稳定性测定　将内生拮抗细菌移至BPA斜面上,28℃下连续转管培养5代、10代

和20代后,测定其拮抗性变化,每处理重复3次。113　水稻内生拮抗细菌的种类鉴定

参照文献[15]、[16]对拮抗活性高且稳定的内生细菌菌株G87和J215进行各种形态和生理生化试验,以确定其细菌种类。114　水稻内生细菌的致病性测定

接种试验在水稻池进行。水稻品种为武育梗14号。以内生细菌液(109cfu/ml)分别在水

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　　　　　　　　　　　　　　　　　　中国生物防治　　　　　　　　　　　　　　　第23卷

稻苗期针刺茎秆接种和分蘖期剪叶接种,每处理10株幼苗或10张叶片,以无菌水接种作对照。接种后适当喷水保湿,定期调查水稻发病情况。

2　结果与分析

211　水稻不同部位内生细菌的分离结果

从江苏省扬州、南通、常州和徐州等地不同水稻品种的根、茎和种子分离获得内生细菌736个菌株,其中根中321个菌株,占4316%;茎中215个菌株,占2912%;种子内200个菌株,占2712%。结果表明,水稻根部内生细菌远多于茎和种子(表1)。

表1　水稻不同部位对几种重要病菌拮抗的内生细菌菌株数量

水稻

部位根茎种子合计

内生细菌总数

321215200736

拮抗细菌总数

978115193

占比例

(%)301237177152511( x)

稻瘟病菌

(株)

746711152

稻恶苗病菌(株)

1227140

稻纹枯病菌(株)

1373稻白叶枯病菌(株)

701拮抗2种病菌(株)

518拮抗3种病菌(株)

2103

212　21211　　(个,,其中多数拮抗菌来自水稻根和茎,而种子内较少。、稻恶苗病菌、稻纹枯病菌和稻白叶枯病菌表现拮抗的有152、40、23和,分别占内生细菌总数的2017%、514%、311%和111%;其中对两种和三种病菌有拮抗能力的菌株分别有24个和3个。21212　内生拮抗细菌的拮抗能力　根据抑菌带宽度,可将水稻内生细菌的拮抗能力分为三类:一是拮抗能力强,抑菌带宽≥810mm,这类拮抗细菌有22株,占拮抗菌总数的919%,除1个菌株对稻白叶枯病菌高拮抗外,其他21个菌株 …… 此处隐藏：6547字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……