非布索坦的有关物质测定方法研究

非布索坦的有关物质测定方法研究

药品鉴定

21 2第8第期 0年月 1 4 1卷

非布索坦的有关物质测定方法研究张静，文艳 吴其华周，

( .省阜阳市药品检验所，徽阜阳 1安徽安

260;. 3 0 0 2安徽联创药物化学有限公司，徽合肥安

2 03 ) 3 0 1

【摘要】目的：讨非布索坦有关物质测定的最佳方法。方法：探采用高效液相色谱法 ( L, HyeiO— P色谱 HP C)用 sr DS B l柱，用梯度洗脱的方式进行检测。流动相 A为乙腈一 .采 01%醋酸铵溶液 (04, 6:0用冰醋酸调节 p H值至 46; .)流动相B为乙腈；测波长 3 0n流速 1 / n结果：测纯度因子均为 09 99检测限为 01n。论： L检 4 m; . ml。 0 mi检 .9, . g结 HP C测定非布索坦有关物质准确、简便、速，对产品中的有关物质进行准确监控。快可 『关键词】布索坦；非高效液相色谱法；关物质有【图分类号】 8 .中 R2 60【文献标识码] C【文章编号】 6 4 4 2 ( 0 )2(一 4— 3 1 7— 7 1 2 1 O a) 0 4 0 1

De e m i to O ea e ub t nc s0 e x sa y HPLC t r na i n fr l t d s sa e ffbu o t tbZ AN 窖 z U We yn, U Oh a H G 1, Ho n a 2W iu?(.u a gIstt rD u o t l A h i rvn e F y n 2 6 0, hn; . h i in h a gP am et a C e 1 yn ntuef rgC nr, n u oic, u ag 3 0 0 C ia 2 F i o o P An u a cu n h r c ui l hm— L cityCo An u r vn e Hee 2 0, ia sr, h i o ic, fi 3 03 Chn 1 P 1

『 s at 0 et e T s bi nHP C meh dfrtedtr nt no ea d sbtn e ffb xsa. eh i: Abt c] r ci: oet l h a L to eemiai frl e u s cso e u ottM tol v a s o h o t a sHP C me o r ea d s b tn e s te c lmn Hye i 0— P 46mmx 5 L t d f lt u s c s et h o

h o r e a t, u: s r DS B ( . l 2 0 mm, m) te mo i h s, a 5;h bl p ae A w s ea eo i ie 0 1 a c tn t l一 .% mmo n u a eae B wa c tt;te d tce v sa 4 m.Re u t:T eln a a g si r u i m c tt. sa eae h ee td wa ewa t3 0 n sl s h i e rr e wa n n te c n e t t n rn e f3 3 0 tgm1= 9 9 9 h o c nr i a g so — 0￣/ .r 0.9 .Co du in:T ea ayia to Srla l n a s d t o— a o n so h n lt lmeh d i eibe a d c n u e o c n c t l h r d c u lv o b x sa oho h a l n h eee c rd c. r ep o u tq ai f e u o ttb t ft esmp ea dt erfrn ep o u t o t t f

[ ywo d] e u ottRe tdS btn e HP C Ke r s F b x s; l e u s c; L a a a

美国食品药品监督管理局于 2 0 0 9年 2月 1 3日批准武田制药北美公司的非布索坦 (品名 U oi)于治疗痛风商 lr用 c病。非布索坦可降低尿酸水平，尿酸产生于消化及正常代谢过程。血液中的尿酸水平过高，可以在大脚趾、部、足脚踝或

品中杂质尽可能检出 .本试验选择 3 4n 1 m作为检测波长。22溶液制备 .

称取供试品约 1, 5mg精密称定， 5 量瓶中，流置 0ml加动相超声使溶解并稀释至刻度，匀，过 (.5 m)续滤摇滤 O4 ,

膝盖形成结晶。F A药品评价与研究中心新药办公室主任 D Jh n is表示， lr o nJ kn e U oi c获得批准为 (风病 )者治疗疼痛痛患提供了另外的选择。者参考有关文献合成了非布索坦，笔 其有关物质方法学研究尚少见。高效液相色谱法 ( L ) HP C是测定有关物质的常用方法。为此，者建立了高效液相色笔谱法 ( P C)定非布索坦的有关物质， H L H L测以 P C对非布索坦降解产物进行检测并进行了方法学研究。现报道如

下：1仪器与试药

液作为供试品溶液；密量取供试品溶液 1ml置 1 0m量精 , 0 l瓶中，流动相稀释至刻度，用摇匀，作为对照溶液 ( .。 1%) 023试验操作方法 .

按药典方法调试好高效液相色谱仪，流速为 1 Y n . m mi, 0检测波长为 3 4n,温为室温，样量为 2 l 1 m柱进 0。24色谱柱的选择 .

用反相高效液相色谱法测定样品，一般首选 O色谱柱。 DS 经试验筛选，现选用 Hye lO S B发 sf D— P色谱柱柱效高，离 i分效果好。故本试验采用 Hye l S B sf i OD— P色谱柱用于样品检测。 25流动相的选择 .

U 0 0紫外分光光度计 ( V1 0上海天美科学仪器有限公司 );HP C仪，:hma z 0 L泵 S i du2 A型、外检测器 S i du2 A型紫 hmaz 0 (日本岛津公司 )色谱柱为 Hye l DS B,. m 2 0m ; sf— P 46 mx 5 m, iO 5 I大连依利特分析仪器公司 )A 3一 m( x; B1 5 S型分析天平 (梅特勒一托利多仪器有限公司 )雷磁 P S 2; H一 5酸度计 (海精上密科学仪器有限公司 )非布索坦原料 (品批号：0 9 9 1。产 20 00、 2 0 0 0、0 9 9 3:徽联创药物化学有限公司。乙腈为 0 9 9 2 2 0 0 0 )安色谱纯，醋酸钠、酸为分析纯。醋2方法与结果 21检测波长的选择 .

本试验首先考察了甲醇及甲醇一系统，验发现用常水试规系统不能对样品进行很好分离，试验采用梯度洗脱的方本式进行检测。流动相 A为乙腈一 .%醋酸铵溶液 ( 04用冰 01 6: 0,醋酸调节 p H值至 4 )流动相 B为乙腈； .; 6流速为每分钟 1 ; .ml 0 检测波长为 3 4n按表 1进行梯度洗脱。论板数按非布 1 m。理索坦峰计算不低于 2 0主成分峰与相邻杂质峰的分离度 5 0,

应符合要求。26方法专属性的研究 .

取非布索坦适量与非布索坦合成过程中 5个关键中间体，甲醇和磷酸盐缓冲液 (H 66作溶剂，成一定浓度用 p .)制的样品溶液， 2 0 4 0n波长范围内扫描，品分别在在 0

~ 0 m样 2 6n和 3 4n波长处有最大吸收。非布索坦合成过程中 1 m 1 m 5个关键中间体均在 3 4n波长处有最大吸收，了使样 1 m为4中国当代医药 CHIA M0D N ME CIE 4 N lER DI N

261样品与各中间体混合溶液高效液相色谱图： ..取样品及各中间体适量，流动相 A制成每 1升中约含各组分分别加毫为 2 g的溶液，上述方法， 2 l 0按取 0注入液相色谱仪，记录色谱图见图 1与各中间体均能有效分离。,

非布索坦的有关物质测定方法研究

21 0 1年 2月第 1 8卷第 4期

药品鉴定264碱降解试验：取非布索坦约 1, 5 量瓶中， ..称 5mg置 0ml

表 1流动相梯度洗脱 ( ) %

加入 1m] o L氢氧化钠溶液 1 l摇匀， (0 2￣水浴中放] 5m,置 9+ ) C置 1h取出， 1mo/,用 l L盐酸溶液调节 p值为 68后，流 H .用

动相 A稀释至刻度，过，续滤液 2 1入液相色谱仪，滤取 O注记录色谱图见图 4。样品几乎完全分解，主要降解杂质峰保

留时间分别为 32、 .3 46、 02 n此流动相对碱降解 . 42、 . 1 .8mi。 3 5产物有较好分离效果。

图 4碱破坏色谱图

262高温降解试验：样品适量， 2 0 ..取置 0%烘箱中，置 1 ,放 0h

265强氧化降解试验：取非布索坦约 1, 5 量 ..称 5mg置 0m1瓶中，加入 3%过氧化氢溶液 1,摇后放置 4取出， 0 0ml振 8h,女

称取适量，流动相 A制成约 03mgm溶液， 2 1入用 ./l 取 0注液相色谱仪，录色谱图见图 2记。样品在高温破坏下有轻微分解，解物出峰时间为 2 . mi此流动相体系对高温降降 45 n, 解产物能取得较佳的分离效果。

用流动相 A稀释至刻度，过，续滤液 2 注入液相色滤取 0

谱仪，录色谱图见图 5样品有轻微分解 (记。降解率小于 01, . %)降解杂质峰均能有效分离。●

图 5氧化破坏色谱图

263酸降解试验：取非布索坦约 1, 5 量瓶中， ..称 5mg置 0ml 加入 1mo L盐酸溶液 1 l振摇后置

( 0 2℃水浴中放置 l/ 5m, 9￣ ) 3h,出， 1mo]氢氧 …… 此处隐藏：5985字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……