青藤碱对脑缺血再灌注损伤大鼠环氧_省略_酶_2表达和血脑屏障通透

时珍国医国药2010年第21卷第4期LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.4

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方脑得生主要有效成分得到了较好的分离,展示了较完整的

HPLC色谱图。

中药提取物复杂成分不经分离直接与模拟生物膜结合,符合中药多成分、多靶点协同作用的特点;由于模拟生物膜可以通过改变相关的影响因子很方便地模拟人体的生理环境,且具有较好的稳定性,从而为研究药物在体内的吸收以及活性成分的筛选和研究提供了一种简便的模型。

参考文献:

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青藤碱对脑缺血再灌注损伤大鼠

环氧化酶-2表达和血脑屏障通透性的影响

俸军林,李 浩,蒋静子,吴 岚,刘开祥,唐永刚

(桂林医学院附属医院,广西桂林 541001)

摘要:目的探讨青藤碱(sinomenine,Sin)对缺血再灌注损伤大鼠脑组织保护作用及对环氧化酶-2(cyclooxygenase-2

,COX-2)表达和血脑屏障通透性的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Sin低剂量治疗组和Sin高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。Sin低(Sin30mg/kg)、高剂量(60mg/kg)治疗组于术前30min分别给予大鼠腹腔注射。用免疫组化法观察缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质COX-2表达及脑含水量和伊文斯蓝(EB)含量变化,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色观察脑梗塞体积变化和神经症状评分。结果Sin高、低剂量治疗组神经功能缺失评分较缺血再灌注组降低,高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05)。Sin高、低剂量治疗组脑梗塞体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,缺血再灌注组额顶部皮质COX-2表达明显增加;与缺血再灌注组比较,Sin高、低剂量治疗组COX-2表达均显著减少(P<0.05),高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,缺血再灌注组脑含水量和EB含量明显升高;与缺血再灌注组比较,Sin高、低剂量治疗组脑含水量和EB含量明显降低(P<0.05),高、低剂量组之间差异亦具有统计学意义(P<0.05)。结论Sin对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能是通过抑制再灌注损伤后COX-2表达,减轻血脑屏障通透性。

关键词:青藤碱; 缺血再灌注; 环氧化酶-2; 血脑屏障

中图分类号:R962 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2010)04-0806-02

EffectofSinomenineontheExpressionofCyclooxygenase-2andthePermeabilityoftheBlood-brainBarrierFollowingCerebralIschemicReperfusionInjuryinRats

FENGJun-lin,LIH

ao,JIANGJin-z,iWULan,LIUKa-ixiang,TANGYong-gang(DepartmentofNeurology,theAffiliatedHospitalofGuilinMedicalCollege,Guilin541002,China)Abstract:ObjectiveTostudythetheeffectofsinomenineonexpressionofcyclooxygenase-2andthepermeabilityoftheblood

-brainbarrierofcerebralischemiareperfusion(I/R)injuryinrats.MethodsInthisexperiment,ratswererandomlydividedinto4groups:shamoperatedgroup,I/Rgroup,lowsinomeninetreatedgroupandhighsinomeninetreatedgroup.Thefocalmiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)modelwasmadebysuture-occludedmethod.Sinomeninewasgivenintraperitoneallytorats30minbeforefocalcerebralischemiaoperationrespectively.After90minMCAOfollowing24hofreperfusion,theexpressionofcyclooxygenase-2withimmunohistochemistrywereinvestigated.BrainwatercontentandthecontentofEvensblue(EB)werein-vestigated.TTCstainingandtheneurologicalscorewerealsoinvestigated.ResultsComparedwithIRgroup,theneurologicalscorewasdecreasedinlowandhighdosesinomeninetreatedgroups(allP<0.05).(2)ComparedwithI/Rgroup,lowandhighsinomeninetreatedgroupsdose-dependentlyreducedcerebralinfarction(allP<0.05).(3)Comparedwithshamoperatedgroup,expressionofcyclooxygenase-2wasincreasedat24hreperfusioninthefrontalandparietalcortex(P<0.05).ComparedwithI/Rgroup,lowandhighsinomeninetreatedgroupsdose-dependentlyreducedexpressionofcyclooxygenase-2(allP<0.05).(4)Comparedwithshamoperatedgroup,paredwithI/Rgroups,lowandhighsinomeninetreatedgroupdose-dependentlyreducedbrainwatercontentandthecontentofEB(P<0.05).ConclusionSinomeninemayobviouslyreducecerebralischemia-reperfusioninjurybydecreasingtheex-收稿日期:2009-06-16; 修订日期:2009-11-16

基金项目:广西壮族自治区自然科学基金(No.0848015)作者简介:俸军林(1965-),男(瑶族),广西桂林人,现任桂林医学院附属医院神经内科副主任医师,硕士学位,主要从事脑血管、癫痫的基础与临床研究工作.

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.4时珍国医国药2010年第21卷第4期

pressionofcyclooxygenase-2andthepermeabilityofblood-brainbarrier.Ithasprotectiveeffectoncerebralischemiainjury.

; Blood-brainbarrierKeywords:Sinomenine; Ischemia-reperfusion; Cyclooxygenase-2 研究表明,炎症反应是脑缺血再灌注损伤的重要病理生理机

制,花生四烯酸环氧化酶途径在缺血后神经元损伤的炎症机制中具有重要作用。诱导型环氧化酶-2(COX-2)是催化花生四烯酸合成前列腺素E2(ProstaglandinE2,PGE2)的关键酶,而PGE2是炎症反应中最主要的炎症介质之一。青藤碱(sinomenine,Sin)是从中药青风藤Sinomeniumacutum中提取的生物碱单体,具有抗炎、免疫抑制、镇痛、降压、抗心律失常等药理作用[1,2]。体外实验表明[3],Sin对COX-2活性有选择性抑制作用。本研究旨在观察Sin对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠COX-2活性和血脑屏障通透性的影响,从而探讨Sin脑缺血再灌注损伤的影响及机制。1 仪器与材料

751分光光度计(上海仪表九厂),青藤碱粉(湖南正清医药公司),TTC试剂(上海医药总公司),COX-2一抗(武汉博士德生物工程公司)。健康Wistar大鼠,雄性,清洁级,共80只,质量(250?30)g(广西医科大学动物实验中心提供)。2 方法

2.1 给药方法将实验动物按随机分组原则分成假手术组(20只)、缺血再灌注组(20只)、Sin低剂量治疗组(20只)及Sin高剂量治疗组(20只)。Sin低剂量治疗组(30mg/kg)和高剂量治疗组(60mg/kg)均于术前30min分别给予大鼠腹腔注射,假手术组和缺血再灌注组给予等量的生理盐水腹腔注射。缺血再灌注组和Sin低、高剂量治疗组建立脑缺血90min再灌注24h动物模型。