医学免疫学 第12讲 免疫检测与防治

第11讲 免疫学检测技术 的基本原理

免疫学检测方法：

依据免疫学理论设计的测定抗原、抗体、免疫细胞及细胞因子 的实验方法。

体外抗原抗体结合反应 的特点及其影响因素 一、基本原理抗原与相应抗体特异性结合，并呈现 某种反应现象，如凝集或沉淀，以此检测 抗原或抗体。

第一节

㈠抗原抗体反应的特点

1.抗原抗体结合的特异性抗原抗体结合除空间构型互补外，还以氢键、

静电引力、范德华力和疏水键等非共价方式结合，一定条件下复合物可解离成游离状态，

且仍保持原有性质。

2.抗原抗体结合的可逆性复合物解离度主要取决于特异性抗体超变区

与相应抗原表位三维空间构型的互补程度，互补程度越高，分子间距越小，作用力越大，

两者结合越牢固，不易解离；反之，则容易发生解离。

3.抗原抗体结合的比例与浓度抗原与抗体结合比例合适，则可形成 肉眼可见的大结合物；反之形成肉眼 不可见的小结合物。

4.抗原抗体反应的阶段性第一阶段：特异结合阶段。 仅几秒到几分钟、尚无可见反应； 第二阶段：可见反应阶段。 数分钟、数小时至数日，因素影响多。

㈡抗原抗体反应的主要影响因素

1.抗原和抗体浓度、比例2.电解质

3.温度 4.酸碱度

二、血清学反应的种类1.凝集反应

细菌、细胞等颗粒性抗原与相应的抗体，或表面包被抗原的颗粒状物质与相应的

抗体在电解质存在的条件下结合，出现肉眼可见的凝集团现象。

2.沉淀反应 毒素、组织浸液以及血清中的蛋白等 可溶性抗原与相应抗体反应后，出现 肉眼可见的沉淀物。

3.免疫标记技术

用酶、荧光素、同位素等物质标记 抗体或抗原进行抗原抗体反应，检 测抗原或抗体的技术。 如免疫酶技术、免疫荧光技术、 放射免疫测定。

生物酶

显色

第一抗体

抗原

第一抗体—抗原

第二抗体

第一抗体—抗 原-第二抗体

第二节 免疫细胞的测定淋巴细胞是机体内主要的免疫细胞，检测其数量和 功能是了解机体免疫状态的重要手段。一 、淋巴细胞的分离

常用ficoll(淋巴细胞分离液)密度梯度离心除去红 细胞、粒细胞而获得外周血单个核细胞(PBMC),再 经吸附除去单核细胞而得到淋巴细胞。若要分离T细胞 ，可用尼龙毛柱、抗CD3单抗、E花结试验等分离。