药用植物硒多糖的研究进展(3)

　　多糖分子中含有大量的羟基， Se Cl O2的酰氯基团等， 能与多糖分子中的羟基形成酯键， 进而将硒与多糖相连， 形成硒多糖。光气COCl2与糖作用时， 相邻成顺势关系的两个羟基能生成环形结构的碳酸酯， 因为Se Cl O2与COCl2结构、性质相似， Klayman认为氯氧化硒 （Se Cl O2） 与多糖作用时， 多糖中的单糖上具有顺式关系的相邻2个羟基同样能生成五元环形的亚硒酸酯， 因此利用Se Cl O2硒化黄芪多糖， 与有顺式关系的C1, C2相邻羟基能形成五元环结构的亚硒酸酯[97]

　　多糖分子中C6位的羟基较为活泼， 在硝酸、氯化钡等化学试剂的催化下， 能促进亚硒酸钠与C6位上羟基的结合， 形成硒多糖。在HNO3-Ba Cl2催化作用下， 亚硒酸钠取代罗望子多糖中C6位上的羟基， 形成Se=O键和Se-C[98].

　　4.3 天然硒多糖的多糖结构

　　天然硒多糖的结构的复杂性主要在于多糖结构的复杂性， 而其结构的多样性在于硒与多糖结合所带来插入位置的多样性。已鉴定的硒多糖中硒以两种结构形式存在， 即Se-H和R1-Se O2-R2.硒多糖的单糖组成一般分为2类 （1） 单一聚糖， （2） 由半乳糖 （Gal） 、葡萄糖 （Glu） 、鼠李糖 （Rha） 、木糖 （Xyl） 、岩藻糖 （Fuc） 和甘露糖 （Man） 等多种单糖中的几种组成的杂聚糖， 而且各种单糖一般以D-构型存在， 它们在硒多糖分子中的比例也不尽相同。硒多糖的主链一般是由1→3糖苷键键合而成， 支链形式多样， 如以D-葡萄糖残基、β-D-葡糖醛酸残基、β- （1→6） -D-葡萄糖残基、β- （1→2） -D-木糖残基等作为支链；也有少数其他键合方式， 如1→2糖苷键、1→4糖苷键等。研究显示硒多糖活性与糖苷键的键合方式相关， 大多数具有活性的葡聚多糖都具有β- （1→3） -D-葡聚糖的主链结构， 而α-葡聚糖一般没有活性；具有活性的甘露多糖为 （1→6） 键型；具有活性的半乳糖则以 （1→3） 键连接[99].

　　从天然富硒灵芝中提取的灵芝硒多糖Se GLP-1, 是一种以α-糖苷键键合而成的吡喃多糖， 由葡萄糖、甘露糖、木糖、半乳糖和鼠李糖5种单糖组成， 其多糖可能的结构式， 见图3, 核磁共振分析表明Se取代了灵芝多糖-OCH3基团中的CH3, 与O以双键的形式结合形成硒酸酯 （Se=O） [100];红外光谱分析发现富硒使得金针菇水溶性多糖吡喃环的3个吸收峰发生了红移， 因此硒可能是以Se-H形式存在于金针菇水溶性多糖的支链上[101];南瓜硒多糖中的硒以Se=O键和Se-C键的形式存在[92];螺旋藻硒多糖由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-葡糖醛酸组成[102];将纯化后的灰树花硒多糖经甲基化反应后， 通过核磁共振分析、气相色谱-质谱连用的方法检测其硒多糖结构， 见图4, 同时检测发现在667.9, 759.9, 1 024.5 cm处发现了硒的特征性吸收峰Se-O-C、Se=O键和O-Se-O键5 硒多糖的生理活性
 

　　5 硒多糖的生理活性
 

　　5.1 硒多糖的抗氧化作用

　　目前对于药用植物硒多糖的研究发现， 硒多糖相对于其他多糖， 具有更显着的抗氧化作用， 药用植物硒多糖的抗氧化活性可能通过以下几个方面来体现： （1） 清除引起体内生物大分子氧化损伤， 破坏细胞结构， 及引发一系列相关疾病的自由基， 如二苯代苦味酰基自由基 （DPPH） , 羟自由基 （·OH） 和超氧阴离子 （·O2） 等[104]; （2） 提高体内相关的抗氧化酶活性， 如超氧化物歧化酶 （SOD） 、过氧化氢酶 （CAT） 和GSH-Px等[105]; （3） 直接或间接清除体内活性氧 （ROS） [106].

　　硒处理假单胞菌PT-8菌株， 能够通过深层发酵形成代谢终产物--硒多糖 （Se-EPS） .该硒多糖糖醛酸含量较低， 对引起体内生物大分子的氧化损伤的自由基DPPH, 羟自由基 （·OH） 和超氧阴离子 （·O2-） 的清除作用大大提高[107].黄芪硒多糖-3显着降低了天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、丙二醛的水平， 同时增加细胞自噬相关蛋白ATG7和LC3-Ⅱ的总抗氧化能力， 提高了谷胱甘肽， 谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性[108].针对醋酸催化制备的硒化米胚多糖 （Se-REP1） 、硝酸催化制备的硒化米胚多糖 （Se-REP2） 抗氧化活性研究证明， Se-REP1、Se-REP2可提高小鼠组织及血清中抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性， 增加机体总抗氧化能力， 且作用效果均强于米胚多糖， 并且显着增强了脂质过氧化物 （LPO） 氧化后产生的代谢产物丙二醛 （MDA） 在血清和心脏中的含量。枸杞多糖在乙酸催化下与亚硒酸钠反应合成枸杞硒多糖 （Se-LBPS） , 试验结果表明Se-LBPS对羟自由基的清除率可达60.51%, 对超氧自由基的清除率可达47.9%[109].

　　利用各种损伤试剂诱导形成氧化损伤模型， 进一步验证硒多糖可显着提高细胞抗氧化活性。H2O2处理人角质形成细胞 （Ha Ca T） , 导致细胞活力降低和凋亡率升高， 且细胞核中的染色质凝聚。然而， 随着秀珍菇硒多糖 （SPMP-2a） 的加入， Ha Ca T细胞活力提高、核凝聚减少、细胞凋亡率显着下降、减少了H2O2处理后细胞的肿胀和空泡线粒体数量。此外， SPMP-2a提高了SOD和CAT活性， 降低了ROS含量[110].氧化损伤处理大鼠嗜铬细胞瘤细胞 （PC12） , 可导致细胞体收缩， 树突网络被破坏， 细胞间隙增大。桔梗硒多糖 （PGP1） 的加入可抑制氧化损伤导致的PC12细胞活性下降， 降低细胞凋亡率， 释放乳酸脱氢酶防止细胞膜损伤， 减轻细胞内ROS的形成。同时， PGP1可增加PC12细胞SOD活性， 降低MDA水平和减少其它脂质过氧化产物的生成[111].当归硒多糖 （s CAP） 能显着降低肝损伤模型小鼠中MDA和ROS含量， 提高肝匀浆中SOD活性和总抗氧化力 （T-AOC） [112].甘草硒多糖处理CCl4诱导的肝损伤小鼠模型， 结果表明甘草硒多糖能够显着抑制毒性药物CCl4引发的小鼠体内自由基大量释放所致的血清中谷丙转氨酶 （ALT） 和谷草转氨酶 （AST） 的含量升高现象；同时甘草硒多糖也能够显着提高CCl4所致肝损伤小鼠中GSH-Px的活性， 降低MDA的含量[113].

　　此外， 药用植物硒多糖与抗氧化剂的对比试验同样发现硒多糖的抗氧化作用更为显着。N-乙酰半胱氨酸 （NAC） 作为谷胱甘肽的前体， 补充细胞内半胱氨酸， 是一种非毒性药物， 能够很容易地进入细胞， 起到直接清除自由基的作用， 抵消活细胞中一些活性氧中间体[181].在鸡胚肝细胞中以五味子多糖 （SCP） 和NAC作为五味子硒多糖 （s SCP） 的对照， 结果表明s SCP的作用远远强于SCP和NAC, 能够显着提高SOD, CAT和GSH-Px等抗氧化酶的活性和细胞存活率[114]. …… 此处隐藏：1576字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……