转基因肿瘤动物模型的研究进展

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全世界恶性肿瘤发病率和死亡率均呈增加的趋势

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转基因肿瘤动物模型的研究进展

加快肿瘤病因和发病机制的研究以及探索有效的肿瘤

治疗新方法显得尤为重要 利用转基因技术建立人类肿瘤疾病的转基因动物模型， 研究外源基因在整体动物中表达的调控规律，从而对 揭示人类肿瘤的病因、发病机制和治疗学研究将会起

到极大的促进作用。

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原癌基因是细胞的正常基因，其表达产物对细胞的生理功能极其

重要，只有当原癌基因发生结构改变或过度表达时，才有可能导

致细胞癌变。 抑癌基因，正常时起抑制细胞增殖和肿瘤发生的作用。许多肿瘤

均发现抑癌基因的两个等位基因缺失或失活，失去细胞增生的阴

性调节因素，从而对肿瘤细胞的转化和异常增生起作用。

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原癌基因的结构改变形式与其表达激活

（一）点突变 C--ras：12、13、61位密码子点突变，存在于多种肿瘤． （二）染色体易位 染色体易位（translocation）：是染色体的一部分因断裂脱 离，并与其它染色体联结的重排过程。 因染色体易位造成的原癌基因激活：

1、 因易位使原癌基因与另一基因形成融合基因，产生一个具有

致癌活性的融合蛋白， 如t（9：22）使c-abl与bcr融合，产生一 个致癌的P210蛋白 。

2、 因易位面使原癌基因表达失控，如t（8：14）易位使c-myc

表达失控． （三）基因扩增 基因扩增（gene amplification）即基因拷贝数增加．如HL-60 和其它白血病细胞，C-myc扩增8-22倍．

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一.常用的转基因技术。

显微注射法 逆转录病毒感染法 精子载体法 体细胞核移植（克隆）法 胞质内精子微注射介导 胚胎干细胞法

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1.显微注射法

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2.逆转录病毒感染法

反转录病毒（Retroviruses）作为转基因载体是目前应 用较成功的一种基因转移方法。 利用反转录病毒的LTRs（长末端重复序列）区域具有 转录启动子活性这一特点，将外源基因连接到LTR下部 进行重组后，再使之包装成为高滴度病毒颗粒，去直 接感染受精卵或徽注入囊胚腔中，携带外源基因的反 转录病毒DNA可以整合到宿主染色体上。

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3.精子载体法

将受精前的精子适当处理,使其携带上外源目的基因, 在受精时导入卵母细胞,外源目的基因在精子内或早期 胚胎阶段整合进入基因组,最终获得转基因动物。 直接注射的方法,将脂质体包裹的含目的基因的重组质 粒注入雄性动物睾丸组织或输精管中,然后与正常雌性 动物自然交配。生产子代动物中获得转基因动物。

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在构建重组质粒pcDNA3.1-HBx和pEGFP-N1-Kras的基础上， 采用直接注射的方法，将脂质体包裹的重组

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