乳腺癌组织拓扑异构酶Ⅱα基因检测方法对比研究

中国药物与临床 2 0 1 3年1月第 1 3卷第 1期C h i n e s e R e m e d i e s&C l i n i c s, J a n u a r y 2 0 1 3, V o l 3, N o . 1

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乳腺癌组织拓扑异构酶 I I O L基因检测方法对比研究王跃华郗彦凤高 宁白玮李亚玲 .徐恩伟王晋芬

【摘要】 目的对比研究免疫组织化学 ( I H C )法检测乳腺癌组织拓扑异构酶Ⅱ o￣ ( T O P 2 A )蛋白表达水平和荧光原位杂交 ( F I S H)法检测 T O P 2 A基因状态，并探讨 F I S H法和显色原位杂交 ( C I S H)法检测 T O P 2 A基因状态的临床意义。方法用I H C法和 F I S H法分别检测 9 6例乳腺浸润性导管癌组织 T O P 2 A蛋白水平和 T O P 2 A基本组 9 6例乳腺癌组织 T O P 2 A蛋白阳性表达 5 2例因扩增状态 (已有 C I S H结果 ),并进行比对分析。结果

( 5 4%),阴性表达 4 4例 ( 4 6%); T O P 2 A基因扩增 1 5例( 1 6%),无扩增 8 1例( 8 4%), 2种方法检测结果差异有统计学意义 ( P< 0 . 0 5 )。1 7号染色体多体在 T O P 2 A蛋白(+ )和(一 ) 2组中的发生率分别为 4 6%和 2 7%, 2组多体发生率比较，差异无统计学意义 ( O . 0 5 ); 1 7号染色体在本组 9 6例乳腺癌中总发生率为 3 8%。F I S H法与 C I S H法检测T O P 2 A基因结果的一致性尚可( K a p p a= 0 . 6 6, P< 0 . 0 5 )。结论测T O P 2 A基因状态尚需大样本量进一步验证。

以F I S H法检测 T O P 2 A基因状态，用于指导临床

选择蒽环类药物的辅助化疗方案，可能更有助于提高乳腺癌的治疗疗效； C I S H法能否替代 F I S H法用于临床检

【关键词】乳腺肿瘤；原位杂交，荧光；免疫组织化学；T O P 2 A基因；染色体I I h e d e t e c io t n me t h o d s o f t o p o i s o me r a s e I I a l p h a g e n e i n b r e a s t c a n c e r:a c o mp a r i s o n s t u d y AⅣG Ya e— h u a,

X I r￣- f e n g,G A0 N i n g, B i l l We i, L I

Y a - l i n g, X U E n - w e i, WA N G b n . D e p a r t m e n t o fP a t h o l o g y, S h a n x i T u m o rHo s p i t a l,T a i y u a n 0 3 0 01 3, C h i n a

【 A b s t r a c t】 Ob j e c i t v e T o c o mp a r e i mm u n o h i s t o c h e mi s t r y( I HC ) f o r d e t e c t i o n o f t h e e x p r e s s i o n o f t o p o i s o me r a s eI I a l p h a( T O P 2 A 1 p r o t e i n a l l d f l u o r e s c e n c e i n s i t u h y b r i d i z a t i o n( F I S H ) f o r d e t e c i t o n o f T O P 2 A g e n e s t a t u s . a n d t o e x—p l o r e t h e c l i n i c a l s i g n i i f c a n c e o f F I S H a n d CI S H f o r d e t e c t i o n o f T OP 2 A g e n e s t a t u s . Me t h o s I d HC a n d F I S H we r e

u s e d t o d e t e c t T OP 2 A p r o t e i n l e v e l a n d a n d T OP 2 A g e n e a mp l i f i c a t i o n s t a t u s f C I S H r e s u l t s h a d b e e n o b t a i n e d 1 i n 9 6p a t i e n t s wi t h i n v a s i v e d u e t￣b r e a s t c a r c i n o ma s, r e s p e c t i v e l y . T h e r e a f t e r, t h e r e s u l t s we r e t h e n c o mp a r e d a n d a n a l y z e d .

Re s I I l t s 0f 9 6 c a s e s o f i n v a s i v e d u c t a l b r e a s t c a n c e r,5 2 c a s e s f 5 4%1 we r e f o u n d p o s i t i v e e x p r e s s i o n o f T 0P 2 A

p r o—

t e i n a n d 4 4 c a s e s( 4 6%) ou f n d n e g a t i v e e x p r e s s i o n . T h e r e w e r e 1 5 c a s e s f 1 6% )o f T0 P 2 A g e n e a mp l i i f c a t i o n a n d 8 1

c a s e s( 8 4%) o f n o n— a m p l i i f c a t i o n f P< 0 . 0 5 ) . T h e o c c u r r e n c e r a t e s o f c h r o m o s o me 1 7 p o l y s o m y w e r e 4 6%a n d 2 7%i n

T O P 2 A p r o t e i n(+ ) a n d(一 ) g r o u p s, r e s p e c t i v e l y( P> 0 . 0 5 ) ., r h e t o t a l o c c u r e n c e r a t e o f c h r o m o s o m e 1 7 w a s 3 8%i n 9 6c a s e s o f b r e a s t n e o p l a s ms . T h e c o n s i s t e n c y o f F I S H a n d C I S H or f d e t e c t i o n o f T O P 2 A g e n e r e s u l t s w a s a c c e p t a b l e

f K a p p a= 0 . 6 6 .P< 0 . 0 5 ) . Co n c l u s i o n F I S H mi g h t b e h e l p f u l i n i mp r o v i n g t h e e f i f c a c y o n t r e a t m e n t o f b r e a s t n e o—p l a s ms wh e n u s e d i n g u i d i n g c l i n i c a l s e l e c t i o n o f a n t h r a c y c l i n e . b a s e d r e g i me n . Wh i l e . i t s t i l l n e e d e d mo r e s a mp l e s t o c o n i f r m a s t o w h e t h e r C I S H c a n r e p l a c e F I S H t o d e t e c t T OP A g e n e s t a t u s i n c l i n i c .

【 Ke y w o r s】 d B r e a s t

n e o p l a s ms;I n s i t u h y b r i d i z a t i o n, l f u o r e s c e n c e;I mm u n o h i s t o c h e m i s t r y;T 0 P 2 A g e n e;Ch r o mo s o me

乳腺癌是多基因变异导致的分子异质性疾病 .

近年来对其生物学行为的研究在不断深入。国外研究显示， He r - 2基因扩增或蛋白过表达的乳腺癌患者不仅获益于 H e r c e p t i n靶向药物治疗。还获益于含葸环类药物的辅助化疗[ ,然而这类患者的获益可

的靶点 E 3]。那么，如果将 T O P 2 A基因与 H e r . 2基因检测相结合，可能更有助于筛选合适的乳腺癌患者进行蒽环类药物辅助化疗。我们已在前期研究中采用显色原位杂交( C I S H)法检测了乳腺癌组织 T O P 2 A 基因状态，本文采用荧光原位杂交 ( F I S H)法.旨在

能与拓扑异构酶 ( t o p o )Ⅱ o r . ( T O P 2 A )基因的改变有关l 2 _,因为 T O P 2 A基因与 H e r . 2基因毗邻于 1 7 q 1 2— 2 1, T O P 2 A基因编码的 t o p o I I仅是蒽环类药物作用DOI: 1 0 . 1 1 6 5 5/ z g y wy l c 2 01 3 . 01 . 0 0 4

探索一种更方便可行准确的方法，以期为临床提供

科学客观的用药参考。 1材料与方法1 . 1标本来源：收集山西省肿瘤医院 2 0 0 8年1月至2 0 0 9年 4月问手术切除的乳腺浸润性导管癌标本9 6份，术前均未接受任何治疗。标本经 1 0%中性

基金项目：山西省卫生厅科技攻关项目( 2 0 1 0 0 2 0 3 )

作者单位： 0 3 0 0 1 3太原，山西省肿瘤医院病理科通信作者：王晋芬， E m a i l: j f e n w@ h o t m a i l . e o m