第九章 抗生素类药物的分析

第九章 抗生素类药物分 析与生物检定法

第九章 检定法

抗生素类药物分析与生物

基本要求： 了解药物的特点及效价的表示方法，掌握抗生素的鉴 别方法，熟悉抗生素含量的理化测定方法，熟悉微生 物检定方法的原理及种类，掌握抗生素效价测定的计 算式，熟悉影响抗生素效价测定的因素，了解管碟法 测定的操作步骤，了解管碟法测定所使用的基本设备 、用具和试验材料，理解总体与样本、概率、自由度 、标准差、变异系数、标准误、t值、可信限、误差 项、回归的统计含义，掌握随机设计和随机区组设计 ，理解t测验、F测验和X2测验，了解可靠性测验的目 的，掌握生物统计法计算抗生素效价的方法。

第九章 检定法

抗生素类药物分析与生物

基本内容： 第一节 抗生素类药物分析 一、抗生素药物 二、抗生素的鉴别与含量测定 第二节 抗生素效价的微生物检定法 一、微生物检定方法 二、管碟法测定效价 第三节 生物统计法在抗生素效价检定中的应用 一、基本概念 二、抗生素效价测定生物统计计算步骤

第一节

抗生素类药物分析

一、抗生素药物 1、抗生素 抗生素是指在低微浓度下即可对某些生命活动有特异 抑制作用的化学物质。 抗生素主要是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产 物，对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。

第一节

抗生素类药物分析

2、抗生素药物的特点及检查项目 抗生素药物具有以下特点： (1)结构、组成复杂 经过微生物发酵，化学纯化， 精致，化学修饰等过程，最后制成制剂。 (2)化学纯度低 同系物多，异构体多，降解物多。 发酵过程不易控制。生产工艺复杂易受污染。分子结 构大多不稳定，降解后疗效下降、失效或增加毒副作 用。活性产物易发生变异。 (3)稳定性差 抗生素分子结构中通常含有活泼基团 (往往是抗生素的活性中心)。

第一节

抗生素类药物分析

抗生素药物的检查项目包括：①鉴别试验 ②异常毒性试验 ③无菌试验 ④热原试验 ⑤降压试验 ⑥酸碱度试验 ⑦水分测定 ⑧溶液澄清度检查 ⑨效价测定 ⑩其他检测(抗生素组分、有关物质、比重度、熔点、 晶型、溶媒残留量、重金属、溶出度等)。

第一节

抗生素类药物分析

3、抗生素效价单位 抗生素效价的标示量，原则上应按所含特定的抗菌活 性部分的重量来计算。 在应用中，抗生素类药物有效成分的表示方法，是按 照各种抗生素的特点及使用经验，采用符合客观实际 的效价单位表示。 常用的抗生素效价单位有重量单位、类似重量单位、 重量折算单位、特定单位。

第一节

抗生素类药物分析

(1)重量单位 以抗生素中所含特定的抗菌活性部分 (纯游离碱或游离酸)的重量1μg作为1单位，即 1mg=1000单位。 如链霉素、红霉素、卡那霉素、新霉素、庆大霉素、 土霉素；氯霉素、新生霉素酸、利福霉素SV等均以重 量单位表示。 用这种方法表示，对不同有机酸根的同一抗生素，只 要单位一样或有效部分重量一样，则这一抗生素的各 种盐类虽然称重不同，但实际有效含量是相同的。

第一节

抗生素类药物分析

(2)类似重量单位 以特定的纯抗生素制品盐的重量 1μg作为一个单位，即1mg=1000单位，其中包括了 无抗菌活性的酸根在内。 如四环素盐酸盐(包括无生物活性的盐酸根在内)。 这种类似重量单位，虽然并不合理，但在国际上已经 习惯沿用。 (3)重量折算单位 以特定的纯抗生素制品的某一重 量为一个单位而加以折算。 如 青 霉 素 国 际 标 准 品 ( 1952 年 ) 青 霉 素 G 钠 称 重 0.5998μg为1单位，即1mg=1670单位，则80万单位的 青霉素G钠称重应为0.48g。

第一节

抗生素类药物分析

(4)特定单位 以一特定量的抗生素标准品(或对照 品)作为1单位。 如第一批杆菌肽国际标准品(1953年)杆菌肽A为 1mg=55单位。 制霉菌素(1963年)为1mg=3000单位等。 这类抗生素的效价单位的精确定义很难确定，折算效 价也难以计算，只能以国际标准品的效价单位，作为 比较的基准。 目前，抗生素的剂量原则上以纯品的重量表示，并加 注单位。如土霉素0.25g(250000单位);但个别品 种仍以习惯沿用，如青霉素仍用单位表示剂量。

第一节

抗生素类药物分析

4、抗生素微生物检定用标准品 标准品是指与商品同质且纯度较高的抗生素，每1mg含 有一定的活性单位，用作供试品效价测定时的标准。 国际标准品是经过国际有关机构协议认定的每1mg含有 一定单位的标准品。其单位称为国际单位。 抗生素标准品效价单位的含义，世界各国应一致。 抗生素的国际标准品是在联合国世界卫生组织生物检 定专家委员会主持下，委托英国(伦敦)国立生物标 准检定所负责(如标准品原料的挑选、理化分析、分 装与分发等)。

第一节

抗生素类药物分析

国际标准品效价单位的标定由世界卫生组织邀请有条 件的国家检定所或药厂实验室，对准备作为国际标准 品的抗生素，进行协作效价标定，然后通过统计分析 ，观察标定结果的误差和真实性，最后由生物检定专 家委员会通过决定。 我国自1976年起参加了部分品种的国际协作标定。 国际标准品主要提供各国在标定本国国家标准品时作 对照品。

凡国际上已制备的国际标准品的品种，在制备国家标 准品时，均应与国际标准品比较而确定效价。

第一节

抗生素类药物分析

我国抗生素国家标准品就是按上述原则制订的。 但是我国的特有品种则以理论上的纯品一定量定为1个 单位，即为1μg,以某批精制纯品作为原始标准品， 再去标定暂行标准品或国家标准品。 我国药典和部颁标准所规定的抗生素效价检定用标准 品，是由中国人民共和国卫生部主持，由中国药品生 物制品检定所统一负责，与国内有关的药检所或药厂 对原料进行选择，理化分析、协作标定效价单位、分 装、稳定性考查、分发等工作。 每批标准品都有有效期的规定。

第一节

抗生素类药物分析

表9-1 常用抗生素理论效价和国家规定产品效价

第一节

抗生素类药物分析

表9-1 常用抗生素理论效价和国家规定产品效价(续)

第一节

抗生素类药物分析

二、抗生素的鉴别与含量测定 1、抗生素的鉴别 抗生素包括很多种类，如β-内酰胺类、氨基糖苷类、 四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤 类、林可霉素类、其他抗生素类等。 这里以β-内酰胺类抗生素为例，讲述抗生素的鉴别方 法。 该类抗生素包括典型β-内酰胺类抗生素，如青霉素类 (Penicillins)、头孢菌素类(Cephalosporins); 非典型β-内酰胺类如克拉维酸(clavulanicacid)、 噻纳霉素(Thienamycin)和Sulfazecins等。