高效液相色谱法在食品工业上的应用.doc

来源：网络收集时间：2026-08-31

导读：仪器分析论文高效液相色谱法在食品工业上的应用高效液相色谱法在食品工业上的应用高效液相色谱法是六十年代末、七十年代初发展起来的快速分离分析的方法。它的基础是液相柱层析［1］。由于新型固定相、性能良好的高压输液泵以及具有选择性的高灵敏的检测

仪器分析论文

高效液相色谱法在食品工业上的应用

高效液相色谱法是六十年代末、七十年代初发展起来的快速

分离分析的方法。它的基础是液相柱层析［1］。由于新型固定相、性能良好的高压输液泵以及具有选择性的高灵敏的检测器的使用, 尤其是近年来利用电子计算机进行自动化控制及数据处理, 使液相色谱法得到了很大的发展。

高效液相色谱法被广泛应用于许多领域, 同样亦被应用于

食品分析领域。它不仅可以对食品中各类营养成分及含量进行分离和测定, 而且还可以对食品中残留的一些有害的微量物质及在食品腐败过程中产生的各种毒素进行分析［2］, 从而向人们展示出高效液相色谱法在食品分析中的重要地位。

食品是人类生活中不可缺少的必需品。各种食品具有不同的

特性和营养成分,直接关系人体的健康。在食品生产过程中往往需要添加防腐剂、抗氧化剂、人工合成色素、甜味剂、保鲜剂等化学物质,它们的含量过高对人体健康不利。此外食品在生产、包装和运输过程中可能会被化学物质污染,如发生农药残留、兽药残留等,危害人体健康。因此食品分析的重要性日益显著。

在食品分析中应用较广泛的是高效液相色谱法(HPLC)。因此

广泛应用于食品、生物、医药、环境等方面,为食品工业中原材料筛选、生产过程中质量控制、成品质量检测等提供了有效的分析手段。

1、食品中营养成分的分析

1．1糖类的分析

糖的含量是食品质量控制的一个指标。由于糖的结构特殊及

其本身中不含有强紫外和荧光吸收的官能团,一般采用示差折光检测器检测,但该检测器灵敏度较低,对糖的检测限一般在微克级水平,且不能使用梯度洗脱,使糖的分离测定受到一定限制，对糖类物质的检测已报道多种方法，如高效液相色谱法、气相色谱法、纸层析法及酶法等。其中气相色谱法是测定糖及酸类物质较常用的方法，但因糖类物质沸点高，不易气化而需对其进行衍生化处理，方法繁琐且易产生误差；纸层析法灵敏度较低，操作过程繁琐，定量困难，难以满足检测需求；酶法进行样品测定时常受微生物培养基成分的干扰，且用该法对乳糖测定需先将其还原为单糖再进行，样品处理较复杂，易产生误差；高效液相色谱法(high pressure liquidchromatography，HPLC)用于测定糖类物质，可快速、准确、可靠的对样品组分进行定性或定量检测，样品处理方法简单、快速

1．2 食品中蛋白质的分析

蛋白质是由几十到几千个氨基酸分子借助肽键和二硫键相

互连接的多肽链,相对分子质量达104～106,而且在溶液中的扩散系数比较小,粘度大,易受外界温度、pH、有机溶剂的影响而发生变性,并引起结构改变。这些特性使它们的色谱分离行为远非理想情况,给其HPLC分离带来了实际困难。因此蛋白质的分离和分析问题至今仍是具有挑战性的课题。目前,主要采用灌注色谱【5】[4][3]。

对蛋白质进行分离,根据灌注色谱的种类可分为以下4种:灌注反相色谱,灌注离子交换色谱,灌注疏水色谱,灌注亲合色谱。

1．3 有机酸的测定

食品中有机酸和酸味剂是食品酸味和鲜味的重要成分,也对

食品的防腐保鲜起重要作用。食品中的有机酸主要有乙酸、乳酸、丁二酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸等,少量存在的有机酸还有甲酸、顺丁烯二酸、马来酸、草酸等。

HPLC分析有机酸不仅简便快速,而且选择性好,准确度高。用

HPLC法检测食品中的有机酸,一般用反相C18柱进行分离,流动相为磷酸盐缓冲溶液,磷酸调pH至215～219 ,常用的磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸二氢铵等。

2、HPLC在食品中的各种添加物质检测中的应用

食品添加剂，指为改善食品的质、色和香味以及防腐保鲜和

加工工艺的需要而加入食品的人工合成或者天然物质主要分为防腐剂、甜味剂、天然或人工合成色素抗氧化剂、香精香料等天然食品添加剂一般对人体无害，但目前所使用的绝大多数是化学合成添加剂，有的具有一定的毒性，如不加以限制使用，对人体健康会产生危害因此，测定食品中添加剂的含量以控制其使用量，对保证食品质量保障人民健康具有十分重要的意义。

2.1食品防腐剂的分析测定

苯甲酸和山梨酸是食品中最常使用的两种防腐剂。对于它们

的分析过去常用分光光度法和气相色谱法进行, 但要经过繁杂

的预处理操作。近年来发展了高效液相色谱法只需经过简单的处理, 就可直接进行测定。我国秦皇岛卫生检验所的赵惠兰等报导了用高效液相色谱法快速测定饮料中苯甲酸、山梨酸的方法［6］。他们将饮料过滤后直接注入液相色谱系统。10—20min 可同时测定这两种防腐剂及糖精钠的含量。该法的色谱条件是：以

uBandapak C18柱为分析柱，含有0.02M醋酸胺的甲醇水（35：65）溶液为流动相, 洗脱速度1ml/min,在 254um的紫外检测器进行检测。该法的回收率97%。标准差为0.29，变异系数为0.038。

武汉市产品质量监督检验所的周胜银、李增也报导了用高效

液相色谱法测定酱油及软饮料类的样品中防腐剂的方法

2.2测定食品中非食用色素

酸性橙Ⅱ、碱性橙2 和碱性嫩黄O 均为工业染料，用于染丝、麻、皮革等，这3 种物质均可以使人致癌，根据GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》规定，这3 种物质严禁作为品使用。但不法商贩利用其颜色鲜艳、着色稳定、价廉的特点非法添加于豆制品中，使腐竹、豆皮的色泽光亮，欺骗消费者，严重危害了广大消费者的身体健康。建立食品中的酸性橙Ⅱ、碱性橙2 和碱性嫩黄O 染料残留的高效液相色谱同时测定的方法，样品通过提取之后，采用基质固相分散法净化，然后分别用乙醇和乙醇-氨水-水（7∶2∶1）分步洗脱，最后进行HPLC 分离、检测。此法的回收率平均为79 ％，酸性橙Ⅱ的检出限为0.01 mg/kg、碱性橙2 的检出限为0.02 mg/kg，碱性嫩黄O 染料的检出限为0.01 [8]［7］。

mg/kg，相对标准偏差平均为3.53 ％。

3. HPLC 在食品中农药和兽药残留检测中的应用

高效液相色谱法是常用来测定沸点高和热稳定性差的农药

残留，使用的色谱分析柱常为C18 或C8，常用的检测器有紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器以及极具应用潜力的蒸发光散射检测器(ELSD)。荧光检测器当前应用较质监园地多，根据氨基甲酸甲酯类农药在碱性条件下易产生甲胺，甲胺与苯二醛反应能产生高灵敏度荧光的特点，可用柱后衍生法、荧光检测器测定氨基甲酸酯类农药残留量。

3.1 蔬菜水果中农药残留量的测定

目前蔬菜水果中不同种类农药的残留测定方法主要是气相

色谱法(GC)或气相色谱－质谱法 (GCMS )，但GC对沸点高或热稳定性差的农药需进行衍生化处理，这样就不可避免地增加了样品前处理的难度，也使它的应用受到一定程度的限制。李永新［10］[9]等建立了同时测定蔬菜水果12种农药残留的反相高效液相色谱分析方法。将样品捣碎，用乙酸乙酯超声提取，经Florisil固相萃取柱净化、正己烷二氯甲烷( 1∶1)洗脱、氮气吹干、甲醇溶解并定容后，采用高效液相色谱柱分离、紫外检测，以外标法定量。结果表明：5种有机磷农药、6种拟除虫菊酯类农药和除草剂二甲戊乐灵的检测限为0.114～2.65 ng。应用该法对从市场上随机购买的莲白、小白菜、黄瓜等20个蔬菜样品和苹果、梨等20个水果样品进行检测，其中氧化乐果的检出率分别为55%和

45%，辛硫磷的检出率分别为50%和30%，由此可见，国家明文规定的不得用于蔬菜、瓜果的剧毒、高毒 …… 此处隐藏：2980字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……

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