色谱纯度HPLC分析方法验证报告样式

×××色谱纯度分析方法验证报告

目录

.............................................................................................................................................................................................. ×××色谱纯度分析方法验证报告批准 ----------------------------------------------------3 1. 验证目的 ---------------------------------------------------------------------------4 2. 色谱纯度分析方法 -------------------------------------------------------------------4 2.1 仪器 ------------------------------------------------------------------------------4 2.2 试剂 ------------------------------------------------------------------------------4 2.3 标准品 ----------------------------------------------------------------------------4 2.4 色谱条件 --------------------------------------------------------------------------4 2.5 溶液配制 --------------------------------------------------------------------------5 2.6 进样操作 --------------------------------------------------------------------------5 3. 方法验证 ---------------------------------------------------------------------------6 3.1 专属性 ----------------------------------------------------------------------------6 3.2 系统适用性试验 --------------------------------------------------------------------9 3.3 精密度 ----------------------------------------------------------------------------9 3.4 线性及范围 ------------------------------------------------------------------------11 3.5 准确度 ----------------------------------------------------------------------------17 3.6 检测限及定量限 --------------------------------------------------------------------20 4．验证评价及结论 ---------------------------------------------------------------------21 5. 附件 -------------------------------------------------------------------------------21

×××色谱纯度分析方法验证报告批准

对本验证方案批准表示同意其验证项目和可接受标准、验证方法和本方案内的各种表格格式、内容。在执行本方案的过程中可能会遇到阻碍本方案精确地完成的缺陷。较小的偏差可以在《偏差报告》内陈述。较大的偏差，如，方法的修改，测试/评估参数，接受标准等只有在附带有经过批准的补充材料的情况下才予以承认。所有经批准的偏差报告和补充材料都应附在批准前的验证报告内。

1．摘要

我们按照USP30专论的方法测定×××的色谱纯度。方法的原理是采用HPLC方法，在233nm检测波长下测定，以×××为参考标准，进行色谱纯度的定量分析。该方法用于×××原料药在放行及稳定性试验中色谱纯度的测定。

经评价，实验室色谱纯度的条件，包括色谱柱、流动相、检测波长、进样量、浓度等条件完全与USP专论规定的一致。杂质A, C, D，以及杂质XA、杂质XB和杂质XC是×××实际存在和潜在的杂质。

为了评价实验室的仪器、人员、环境等能否满足色谱纯度测定的要求，按照ICH指南Q2A和Q2B的要求，对分析方法进行了验证，验证的项目包括专属性、系统适用性试验、精密度、线性、范围、准确度、定量限和检测限, 验证结果表明，每个验证项目均符合验证标准。USP色谱纯度的分析方法适合于×××原料药中杂质的测定和控制。验证结果摘要如下：

a.

专属性：溶剂对杂质的测定没有干扰，×××与相邻杂质XA和杂质D的分离度依次为21.1和13.2, 较相邻的杂质D和杂质A的分离度为1.8，杂质XB和XC的分离度为1.6，均大于1.5，表明×××与每个杂质以及每个杂质之间分离度均符合要求。

b.

系统适用性试验：在系统适用性溶液的色谱图中，3-苯甲酰基苯甲酸和×××的分离度R为13.3，大于4；以×××峰计算色谱柱的理论塔板数N为20328，大于2250；×××峰的拖尾因子T为 0.83，小于2.0；标准溶液连续进样6次，其主峰面积的RSD为0.51%，小于5%。

c.

精密度：标准溶液重复进样6次，在重复性项下，杂质C, 杂质XA, ×××, 杂质D, 杂质A, 杂质XB和杂质XC峰面积的RSD依次为0.24%, 0.41%, 0.51%, 0.54%, 0.21%, 1.6%和0.86%, 均小于5%；在中间精密度项下测得的RSD依次为0.20%, 0.23%, 0.60%, 0.60%, 0.24%, 1.1%和0.49%, 均小于5%；F-test结果表明，每个组分的F值均小于F0值5.05, 表明方法的中间精密度和重复性之间的精密度无显著性差异。

d.

线性和范围：杂质A的含量在0.02%~0.24%的范围时，它的线性方程为Y=153.713X-0.214，相关系数为0.99996；杂质C的含量在0.02%~0.24%的范围时，它的线性方程为Y=62.854X-0.236，相关系数为0.9999; 杂质D的含量在0.02%~0.24%的范围时，它的线性方程为Y=27.520X-0.423，相关系数为0.9999; 杂质XA的含量在0.02%~0.24%的范围时，它的线性方程为Y=86.007X-0.725，相关系数为0.9999; 杂质XB的含量在0.02%~0.24%的范围时，它的线性方程为Y=13.160X-0.325，相关系数为0.9997; 杂质XC的含量在0.02%~0.25%的范围时，它的线性方程为Y=65.240X-1.546，相关系数为0.9998; 代表其它杂质的×××含量在0.02%~0.25%的范围时，它的线性方程为Y=33.579X-0.558，相关系数为0.9998; 每个杂质的相关系数均大于0.999, 表明它们的峰面积与浓度均呈线性关系。

e. 准确度：杂质A、杂质C、杂质D、杂质XA、杂质XB、杂质XC和×××的回收率依次为99.4%, 99.2%, 98.5%, 99.0%, 98.7%, 98.5%和100.5%，回收率的RSD依次为1.2%, 1.8%, 1.4%, 1.8%, 2.9%, 2.5%和2.4%；每个杂质的回收率均介于95.0%～105.0%之间。

f. 定量限和检测限：杂质A、杂质C、杂质D、杂质XA、杂质XB、杂质XC和×××的检测限依次为0.0002%, 0.0002%, 0.002%, 0.0004%, 0.005%, 0.001%, 它们的定量限依次为0.001%, 0.001%, ×%, 0.002%, 0.02%, 0.005%,结果表明，方法的灵敏度适合杂质的检测和控制。

2. 分析方法

×××USP30专论 2.1 仪器：高效液相色谱仪 Agilent 1100 HPLC 2.2试剂：

a. 乙腈 (色谱纯) b. 磷酸二氢钾 (分析纯) c. 纯化水 2.3 标准品：

a. ×××标准品 b. 3-苯甲酰基苯甲酸 2.4色谱条件：

a) 色谱柱：YMC Pack ODS-A，4.6mm×150mm，3µm；

b) pH3.5缓冲液：称取68.0g磷酸二氢钾，用水溶解并稀释至1000ml，用磷酸调pH值为3.50

±0.05，过滤。

c) 流动相：水-乙腈- pH3.5缓冲液=550:430:20

配制方法：用适宜的量筒分别量取过滤的水550ml，乙腈430ml和pH3.5缓冲液20ml，于一合适的试剂瓶中，充分混匀。在超声波上脱气10分钟。也可按照待测样品的数量，按照比例配制适量的流动相。 d) 检测波长：233nm； e) 流速：1.0ml/min； f) 进样量：20µl。 2.5 溶液制备

a) 系统适用性溶液：量取0.5ml标 …… 此处隐藏：3649字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……