噬菌体裂解酶的研究进展(2)

PlyGBS是经研究获得的较为全面的链球菌重组裂解酶，Cheng等［26］通过体外试验，证明重组裂解酶PlyGBS对链球菌A、B、C、G和L型具有杀灭作用，而对D、E、N型链球菌无作用。通过小鼠体内试验，证明单剂量的PlyGBS能够杀死小鼠阴道和口腔中的B型链球菌，在最适pH5.0条件下，并没有对小鼠体内诸如乳酸杆菌等具有抵抗病原微生物作用的共生微生物产生杀灭作用。重组裂解酶PlyGBS 可用于B型链球菌的感染和治疗，为其进一步开发成新型药物奠定了良好的基础。

金黄葡萄球菌能引起奶牛乳房炎，影响产奶量，也可引起肺部感染及脑、肝、肾、乳腺等脏器的脓肿，具有很高的发病率和致死率，其中甲氧西林耐药葡萄球菌是影响范围最广和结果较严重的。Obeso 等［27］研究了重组裂解酶LysH5，该酶在pH7.0，37℃条件下，能够快速杀死经巴氏消毒的牛奶中生长的金黄葡萄球菌，在37℃培养4h后并未检测到含有病原菌，因此，可用于乳制品的生物防治。

Zimmer等［28］研究了产气荚膜杆菌噬菌体裂解酶Ply3626，该酶包含N-端酰胺酶作用区和C-端结合区，能抵抗产气荚膜杆菌的感染，对多株测试的产气荚膜杆菌具有裂解活性。重组Ply3626对产气荚膜杆菌高效的裂解活性，使其可作为新型食品防腐剂，用于食品的生物防治。

Hoopes等［16］研究了马链球菌重组裂解酶PlyC，作为一种抵抗马链球菌的消毒制剂，用于马场的消毒。重组裂解酶PlyC的宿主谱较窄，可以杀死马链球菌亚种和兽疫链球菌亚种，可控制马链球菌的扩散和传播，且对环境无污染，能快速杀死20%以上临床分离的马链球菌，消毒效果是消毒药卫可的1000倍；在30min内1μg的PlyC灭菌效果相当于杀死108CFU／ml的马链球菌培养液。通过标准的稀释法和喷雾法测试消毒效果，结果表明，PlyC可以杀死马厩里各种设备上的病原菌，消毒效果良好。

5.结语

近年来，细菌耐药性的问题越来越严重，呈全球蔓延趋势，抗生素的局限性也越来越明显，因此，迫切需要研究新型的抗菌制剂，噬菌体的出现给人们提供了一个新的思路。早在20世纪20年代，人们就开始利用噬菌体来治疗细菌的感染，并取得了良好的效果。随后，科学家从各种感染了噬菌体的致病菌，包括肺炎链球菌、炭疽杆菌、乳酸杆菌、金黄葡萄球菌等中都分离出了噬菌体。但是，随着抗生素的出现，人们的注意力又转移到抗生素上面来，从而忽略了细菌的天敌噬菌体。现在，细菌耐药性愈发显著，才使人们重新探索裂解酶的抗菌作用。要真正实现全面利用噬菌体及其裂解酶治疗细菌性感染，还需要解决诸如活噬菌体对人的影响和工程化生产噬菌体裂解酶等等问题。随着对噬菌体及其裂解酶的深入研究，会开发出新型抗菌制剂，用于细菌性疾病的治疗。

参考文献

［1］Twort FW．An investigation on the nature of ultra-microscopic viruses［J］．Lancet，1915，186（4814）：1241-1246．

［2］D＇Hérelle F．Sur un microbe invisible antagoniste des bacilles dysentériques［J］．C R Acad Sci Paris，1917，165：373-375．［3］Fischetti VA．Bacteriophage lysins as effective antibacterials［J］．Curr Opi Microbiol，2008，11（5）：393-400．

［4］Catalao MJ，Milho C，Gil F，et al．A second endolysin gene is fully embedded in-frame with the lysA gene of mycobacteriophage Ms6［J］．PLoS ONE，2011，6（6）：1-12．

［5］Gil F，Grzegorzewicz AE，Catalao MJ，et al．Mycobacteriophage Ms6LysB specifically targets the outer membrane of Mycobacteri－um smegmatis［J］．Microbiology，2010，156（Pt5）：1497-1504．

659

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中国生物制品学杂志2012年5月第25卷第5期Chin J Biologicals May2012，Vol.25No.5

［6］杨文慧，于龙，胡凌飞，等．分枝杆菌噬菌体D29裂解酶基因的表达与鉴定［J］．军事医学科学院院刊，2009，33（2）：113-116．［7］刘爽，刘军，周博，等．出血性大肠杆菌O157菌壳的制备研究［J］．中国人兽共患病学报，2010，26（7）：672-675．

［8］Resch G，Moreillon P，Fischetti VA．PEGylating a bacteriophage endolysin inhibits its bactericidal activity［J］．AMB Express，2011，1（1）：29-33．

［9］Martínez V，García P，Garcíal JL，et al．Controlled autolysis facil－itates the polyhydroxyalkanoate recovery in Pseudomonas putida KT2440［J］．Microb Biotechnol，2011，4（4）：533-547．

［10］Schmelcher M，Tchang VS，Loessner MJ．Domain shuffling and module engineering of Listeria phage endolysins for enhanced lyt－

ic activity and binding affinity［J］．Microb Biotechnol，2011，4

（5）：651-662．

［11］Paul VD，Sundarrajan S，Rajagopalan SS，et al．Lysis-deficient phages as novel therapeutic agents for controlling bacterial infec－

tion［J］．BMC Microbiol，2011，11（1）：195-204．

［12］Becker SC，Dong SL，Baker JR，et al．LysK CHAP endopepti－dase domain is required for lysis of live Staphylococcal cells［J］．

FEMS Microbiol Lett，2009，294（1）：52-60．

［13］Sainathrao S，Mohan KVK，Atreya C．Gamma-phage lysin PlyG sequence-based synthetic peptides coupled with Qdot-nanocrys－

tals are useful for developing detection methods for Bacillus an－

thracis by using its surrogates，B．anthracis-Sterne and B．cereus-

4342［J］．BMC Biotechnol，2009，9：67-73．

［14］Wang S，Kong J，Zhang X．Identification and characterization of the two-component cell lysis cassette encoded by temperate bac－

teriophageφPYB5of Lactobacillus fermentum［J］．J Appl Micro－

biol，2008，105（6）：1939-1944．

［15］朱才众．布鲁氏菌噬菌体裂解酶因表达、生物活性鉴定及裂菌动力学研究［D］．重庆：第三军医大学，2009．

［16］Hoopes JT，Stark CJ，Kim HA，et al．Use of a bacteriophage lysin，PlyC，as an enzyme disinfectant against Streptococcus e－

qui［J］．Appl Environ Microbiol，2009，75（5）：1388-1394．［17］孟祥朋．猪链球菌生物被膜的生物学特性及噬菌体裂解酶对生物被膜的降解作用［D］．上海：上海交通大学，2011．

［18］Schuch R，Nelson D，Fischetti VA．A bacteriolytic agent that detects and kills Bacillus anthracis［J］．Nature，2002，418（6900）：

884-889．

［19］Vasala A，VaLkklla M，Caldenter J，et al．Genetic and bio－chemical characterization of the Lactobacillus delbrueckii subsp．

lactis bacteriophage LL-H lysin［J］．Appl Environ Microbiol，

1995，61（11）：4004-4011．

［20］Kikkawa H，Fujinami Y，Suzuki S，et al．Identification of the amino acid residues critical for specific binding of the bacteri－

olytic enzyme of gamma-phage，PlyG，to Bacillus anthracis［J］．

Biochem Biophys Res Commun，2007，363（3）：531-535．［21］Nelson D，Loomis …… 此处隐藏：4200字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……