技术培训资料_无菌

. .

.专业. .专注. 技术培训资料：无菌检查法

无菌检查法是指检查要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及要求无菌的其他物品是否染有活菌的方法。

一、无菌检查前准备流程：

. .

.专业. .专注.

二、按照SOP 要求更衣，进入洁净室后流程：

三、安装无菌检验系统，操作流程：

. .

1.装好排水盘及硅胶管，确保排水盘上两滤筒间间隔物已装好。

2.取出集菌培养器，检查是否完好，并将其安装在排水盘上。

3.将与集菌培养器连接的软管安装到泵头盖中。

.专业. .专注.

. .

.专业. .专注. 4.检查露在泵头盖两端的软管左右长度是否相等，确保其定位准确。

5.左右拉动软管，确保其走势顺畅。如果软管不能自由被拉动，重复上面操作。

6.确保泵头盖的右边软管与培养器不是绷紧状态，否则需将软管往右挪动点。

7.通过“open\close ”按钮将泵头盖关上

8.将培养器软管上针头扎入0.1%无菌蛋白胨水冲液中，打开蠕动泵泵入缓冲液40-50ml/桶，润湿3-5分钟。

9.

将红色帽子戴在培养器顶部，将针头从缓冲液中拔出，扎入样品中。将一定数量的样

海超加替沙星氯化钠注射液：每柜冷点取20袋，每批任取一柜取20袋做阳性对照。 海超加替沙星注射液：每柜冷点取20支，每批任取一柜取20支做阳性对照。 田力\转化糖：每柜冷点取10袋，每批任取一柜取5袋做阳性对照。

尼莫地平：每柜冷点取20支，每批任取一柜取10支做阳性对照。

10.样品过滤结束，根据每种样品SOP 要求的冲洗量进行冲洗或不冲洗。

. .

.专业. .专注. 11．样品过滤结束或冲洗液冲洗结束，关闭蠕动泵。将培养器上红色帽子拿去，底部的

排液管口用黄色帽子堵上，将冲洗液取下换上相应的培养基瓶。分别往两个培养器中泵入硫乙醇酸盐流体培养基与改良马丁培养基各100ml 。泵一种培养基时，需将另一管在扎针处用夹子夹住。

12.培养基加好后停止泵，用夹子夹住靠近空气过滤器头软管，通过“open\close ”按钮将泵头盖打开，取出软管。 12.

13.阳性对照按照上面1-12步骤做完后，拿出洁净区，在生物安全柜中接种含50-100cfu/ml 阳性对照菌1ml 。

—田力 转化糖电解质注射液、信坦 尼莫地平注射液、转化糖电解质注射液阳性对照菌为金黄色葡萄球菌。

—海超 加替沙星注射液、海超 加替沙星氯化钠注射液阳性对照菌为金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌。

14.阴性对照：按照上面1-8步骤做完后， 取同一批灭菌的0.1％蛋白胨水溶液500ml

进行薄膜过滤，后面步骤同11-12。

四、无菌检验结束后流程：

.专业. .专注.

硫乙醇酸盐流体培养基置于30-35℃培养14天，改良马丁培养基置于23-28℃培养14天。

阳性对照：将集菌培养器置于30-35℃下培养，48-72小时应生长良好。 五、结果判断：

对所有培养管进行逐日观察。

培养14天后，无菌生长判合格；有菌生长时，符合6项条件之一则进行复试，否则判定不合格。 六、复试条件：

1.试验环境及设备的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求；

2.回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素；

3.阴性对照管有菌生长；

. .

4.供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中使用的物品或无菌操作技术不当引起的。

七、复试：重新取同量供试品，依法重试，若无菌生长，判供试品符合规定；否则判不符合规定。

.专业. .专注.