实验诊断学实验报告

实验诊断学实验报告

红细胞计数试验

实验目的： 通过红细胞计数实验

1、掌握红细胞计数方原理、方法及注意事项。

2、掌握血细胞计数板的结构

试验器材： 血细胞计数板、显微镜、盖玻片、试管、血红蛋白吸管、 生理盐水

实验原理： 一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中显微镜下

计数一定容积内的细胞，再换算成每升标本的细胞数报告。 操作步骤： 1、取红细胞稀释液2.0ml毫升，放入一小试管内。

2、用血红蛋白吸管吸血至l0ul处。

3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内， 上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。

4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。

5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。

6、待2—3分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低 倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。

红细胞计数的区域： 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。 计数原则： 数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。 计算：

红细胞数/L=5个中方格内红细胞数×5×10×201×106

或

红细胞数/L=5个中方格内红细胞数÷100×1012

式中×5 5个中方格换算成1个大方格

×10 1个大方格容积为0.1ul，换算成1.0 uL。

×201 血液的稀释倍数

×106 由u1换算成L

数据处理： RBC: ×l0/L

12参考值 男:(4～5.5)×10/L

12 女：（3.5～5）×10/L

12 新生儿：（6～7）×10/L 12 答案不唯一，言之有理即可

注意事项： 1、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血

凝块应重新采血。

2充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀， 不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。

3、中方格内红细胞分布应均匀，健康成人每中方格红细胞数约为80—100个， 各中方格内之红细胞相近，如悬殊过大(超过10个细胞以上的)应重混匀再充填。 实验诊断学实验报告

血红蛋白测定

实验目的： 通过血红蛋白测定

1、氰化高铁血红蛋白比色法原理及技术。

2、掌握红血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。

试验仪器： 试管、微量吸管、分光光度计

实验原理： 血红蛋白中的亚铁离子（Fe2+）被高铁氰化钾氧化成高离子（Fe3+），血红蛋

白转化成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白与氰离子（CN-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在540nm波长比色。从HicN参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。

操作步骤： 1、取试剂5毫升加入血液20ul混匀置5分钟

2、用721光电比色仪，540nm波长，试剂为空白调0点比色，读取 光密度，查标准曲线得结果。

计算： 血红蛋白（g/L）=测定管吸光度×367.7

数据处理： 答案不唯一，言之有理即可 Hb ： g／L

参考值 男0.40～0.54L/L

女: 0.37～0.48L/L

儿童：0.35～0.49L/L

新生儿：0.50～0.60L/L

注意事项： 1、做血红蛋白测定，白细胞计数和分类计数，在采血时应先做血膜再做红细胞，然后做白细胞，血红蛋白检验，避免红细胞破坏。