酶工程考试复习题及答案(2)

11. 酶活力的测定方法可用＿终止＿反应法和＿连续＿反应法。

12. 通常酶的固定化方法有＿吸附法＿、＿交联法＿、＿键合法＿、和＿包埋法＿。

13. 酶分子的体外改造包括酶的＿化学酶工程＿修饰和＿生物酶工程＿修饰。

14. 模拟酶的两种类型是＿全合成＿酶和＿半合成＿酶。

15. 抗体酶的制备方法有＿引入＿法和＿拷贝＿法。

16. 根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有＿热变性＿法和＿酸碱变性＿法。

17. 酶的生产方法有＿提取法＿、＿发酵法＿和＿化学合成法＿。

18. 日本称为“酿素”的东西，中文称为＿酶＿，英文则为＿Enzyme＿是库尼于1878年首先使用的。其实他存在于生物体的＿细胞外＿和＿细胞内＿中。

19. 酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的＿活性＿、减少＿抗原性＿，增加＿稳定性＿。

20. 借助＿双功能试剂＿使＿酶分子之间＿发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。

21. 酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别的分离方法有＿凝胶过滤＿法、＿超滤＿法和＿超离心＿法三种。

22. 由于各种分子形成结晶条件的不同，也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶，因此酶结晶既是＿纯化手段＿，也是＿纯化标志＿。

23. 酶催化的作用机理在于能降低反应的＿活化能＿。

24. 非竞争性抑制的特点是最大反应速度Vm＿＿＿＿＿，米氏常数Km＿＿＿＿＿。

25. 细胞破碎的主要方法有机械破碎，物理破碎，＿化学破碎＿和＿酶促破碎＿。

26. 酶的提取方法主要有盐溶液提取，酸溶液提取，碱溶液提取和＿有机溶剂提取＿。

27. 结晶的方法主要有＿盐析结晶＿，有机溶剂结晶法，透析平衡结晶法，等电点结晶法。

28. 加压膜分离可分为微滤，＿超滤＿和反渗透。

29. 常用的萃取方法有有机溶剂萃取，双水相萃取，＿超临界流体萃取＿和反胶束萃取。

30. 固定化酶是固定在载体上并在一定的空间范围内进行＿催化反应＿的酶。

31. 固定法细胞是固定在载体上并在一定空间范围内进行＿生命活动＿的细胞。

32. 固定化对酶反应有：＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿。

33. 用带负电荷的载体制备的固定化酶，其最适pH比游离酶的最适pH＿向碱性方向移动偏高＿，用带正电荷的载体制备的固定化酶，其最适pH比游离酶的最适pH＿向酸性方向移动偏低＿，用不带电荷的载体制备的固定化酶，其最适pH与游离酶的最适pH＿相近＿。

34. 酶催化反应的产物为酸性是，固定化酶最适pH比游离酶的最适pH＿高＿。

35. 定点突变是在DNA序列的＿某一特定位点上＿进行碱基的改变，从而获得＿基因突变＿的操作技术。

36. 模拟酶在结构上必须具有两个特殊位点，一个是＿结合＿位点，一个是＿催化＿位点。

37. 抗体酶常用的制备方法有＿细胞融合法＿、＿抗体结合位点化学修饰法＿、＿引入辅助因子法＿、＿拷贝法＿等。

38. 搅拌罐式反应器主要由反应罐，＿搅拌器＿和温度调节装置组成。

39. 填充床式反应器是通过＿底物溶液＿的流动，实现物质的传递和混合。

40. 鼓泡式反应器是＿有气体参与＿的酶催化反应中最常用的一种反应器。

41. 膜反应器是将酶的＿催化效应＿与半透膜的＿分离作用＿组合在一起而形成的反应器。

42. 喷射式反应器是利用＿高压蒸汽＿的喷射作用，实现酶与底物的混合，进行＿高温

短时＿催化反应的一种反应器。

问答题

1. 举出四例，说明酶在医学上有广阔的用途。

酶作为一种生物催化剂已经被广泛的利用于各个生产生活领域，在医学方面酶也可用于疾病的诊断与治疗。如葡萄糖氧化酶用于测定血糖、尿糖，诊断糖尿病。尿素酶测定血液、尿液中尿素的量，诊断肝脏、肾脏病变。溶菌酶具有抗菌、消炎、镇痛等作用，用于治疗手术性出血、咯血、鼻出血，分解脓液，消炎镇痛等。超氧化物歧化酶（SOD）催化超氧负离子（O2ˉ）进行氧化还原反应，使机体免遭O2ˉ的损害。因此SOD具有抗辐射作用，并对红斑狼疮、皮炎、结肠炎及氧中毒等疾病有显著疗效。

2. 如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂？试用所学过的知识加以叙述。

一般检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂的方法是通过对酶的均一性进行检测而实现的，但是要提出一个酶的均一性的绝对标准很难，因此实际工作中一般采用相对纯度标准。对酶制剂中存在一些小分子物质，不能认为该酶制剂不均一也就是不纯。一般鉴定酶均一性的具体方法有：(1)根据酶分子的大小、形状进行检测（超速离心)(2)根据酶分子的电荷或电荷与分子大小的性质进行检测（电泳、SDS－电泳）(3)根据酶分子的化学性质进行检测（等电聚焦）(4)根据酶分子的免疫学性质进行检测（免疫技术）(5)此外，还有溶解度结晶方法等其它方法（N－末端分析），由于不同工作对酶纯度要求及定义不同以及纯度鉴定方法和纯度标准要求，对酶的均一性鉴定和检测采用的方法和标准也各不相同，所以对具体问题要具体分析，避免简单化。

3. 简述酶催化的特性。

酶是生物催化剂，除了具有化学催化剂降低反应活化能加快反应速率不改变反应平衡点等共同特性外还具有以下特性：1.催化活性易受外界条件影响，对温度、酸碱性、重金属盐等条件敏感。2.高效性，酶的催化活性通常要比化学催化剂高107－1013倍。3.专一性一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某类的反应，对其他底物和反应无催化效应。4.催化活性可调控性，生物体内化学反应和酶种类繁多，但酶活性是可以受到调控的，其调控的方式也很多。5.反应条件温和性，酶一般是生物体内的蛋白质或核酸类物质，由于生物体内环境稳定且较为稳定，因此酶的催化条件也具有温和性。

4. 简述固定化细胞有哪些优缺点。

固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞.该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢，又称固定化活细胞或固定化增殖细胞。固定化细胞是在固定化酶的基础上发展起来的。它的优点如下:(1)省去了酶的分离手续．为多酶系统，无须辅因子再生。(2)细胞生长快、而且多、反应快。(3)可以连续发酵，节约了成本，而且在蒸馏和提取前不用分离去细胞，能一边徘出发酵液，一边进行培养，排除了产物抑制和消耗。(4)保持酶在细胞内的原始状况，增加了酶的稳定、特别是对污染因子的抵抗力增加等。它的缺点如下：(1)必须保持菌体的完整，防止菌体自溶，否则，将影响产品纯度。(2)必须防止细胞内蛋白酶对所需酶的分解，同时，需抑制胞内其他酶的活性止副产物的形成。(3)细胞膜、壁会阻碍底物渗透和扩散（4）利用的仅是胞内酶，且其他胞内酶容易形成不需要的副产物等。

5. 简述生物印迹酶的种类及制备过程。

生物印迹是分子印迹的一种形式，它是指生物材料，如蛋白质和糖类物质为骨架，在其上进行分子印迹而产生对印迹分子具有特异性识别空腔的过程。一般生物印迹酶包括1.有机相生物印迹酶、2.水相生物印迹酶两类。有机相生物印迹酶制备的过程是：1.将底物脂肪以脂质体形式接近酶，2.将适当两亲性的表面活性剂与酶印迹，3.将完成的酶复合物冷冻干燥用

非水溶剂洗去表面活性剂，4.获得活性中心开启的活性有机相生物印迹酶。水相生物印迹酶的制备过程一般是选择印迹分子然后与酶蛋白分子混合，待起始蛋白在变性条件下与印迹分子充分作用后，用交联剂固定印迹蛋白的构象， …… 此处隐藏：2850字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……