DNASTAR中文使用说明书(5)
需要满足两个标准:切割一或两次,用Apo I切割。我们手动过滤器包括频率过泸器的单一切点的内容,所以他自动的覆盖了频率过泸器的结果。下述过泸器一览表允许我们随意编辑、组合各
个过泸器。
l 从Map Document,单击过泸器调色板工具(在窗左上的漏斗图标)打开过泸器一览表(如下)。当前应用的所有过泸器都出现于窗口的左边。
l 为了除掉Apo I过滤器,点击选中它,从左窗口拖到右边的窗口,单击应用即可。现在由于只有Two-cuts-max过泸器被应用,所以序列上的酶切位点数目立即增加了。
l 把Apo I过滤器拖回,放在And旁,单击Apply再次应用Apo I过滤器,序列上的酶切位点数目又立即减少了。(如果把Apo I过滤器拖回,放在Or旁,单击Apply再次应用Apo I过滤器,序列
上的酶切位点数目不会改变,因为Apo I过滤器是Two-cuts-max过泸器的一部分)。 l 按上面的方法把两个过滤器都去除。
使用Must Cut Here / Don’t Cut Here调色板工具
Must Cut Here / Don’t Cut Here工具是另一种酶切位点过滤限制方法。我们将用这个方法再次重复上面的操作。 l 从MAP MENU,选Site & Sequence。
l 向下滚动,直到你看在大的向右指的箭头,上写“histone”。
单击选中。点击Don’t Cut Here调色板工具(红色园圈起的剪刀样图标),去除所有切割选定区的酶切位点。(点击Must Cut Here工具——剪刀样图标——序列上将展示所有切割选定区的
酶切位点。)
这样,仅仅剩下那些不切割选定区的位点。 显示酶信息
内切酶编辑器(Enzyme Editor)使你能够查看内切酶的各种相关信息,包括其名字,识别序列,isoschisomers,种类,价格,销售公司和有效性等详细的信息。你对这些信息可以进行添加
或删除操作。
l 打开酶编辑窗(如左),双击任意一个酶的名字。 l 箭头显示酶识别序列和切割位点。
l 你可以按照“GeneQuest”上的方法在序列上添加新Feature,并作注释。 环形展示
你可以以环形图展示环形或线性序列,但是,如果序列是线性的,MapDraw会提示你。如果你想在环形序列上进行酶切位点限制,那末,我们前面提到的Don’t Cut Here filter完全可以做到 这一点。
l 通过点击过滤器调色板工具检查当前是否只有Don’t Cut Here过泸器应用。如果已经应用,则Don’t Cut Here过泸器应该在过泸器一览表的左边的窗口里,而其他的过滤器在右边。如果
这不是这样,请进行调整。
l 从MAP MENU,选择Circular Illustration,打开左边的窗口。(如果此时有太多的酶切位点,你可以加入其他的过泸器)。
l 通过OPTIONS MENU的Drawing Size调整图画的大小。2条红线相会的角是你可以做的最小图画的范围。在窗口内点击任何位置,图形大小将显示为那末大。 l 单击同意。 ORF图
l 从MAP MENU,选ORF Map打开右边显示的六读框的开放读框窗口。默认的终止和开始codons可以使用指定的遗传密码。方法见EditSeq。
l 从OPTIONS MENU中选择ORF Criteria可以设定参数。你能调整最小的ORF长度,定义上游启动子和距上游启动子的距离,选定后单击同意即可。
l 放大ORF以查看翻译的序列。方法是点击调色板工具中Zoom In (有+的图标),接着,单击分析界面。重复这些2步直到你能看翻译。 显示选择
MapDraw’s OPTIONS MENU提供各种指令允许你做下面的事情: l 选择1个或3个字母的编码。
l 显示不同的读框组合(Reading Frames 或 Line Layout)。
l 编辑用于翻译的遗传密码(Genetic Codes and Edit Selected Code)。酶显示可以选择垂直或者水平展示。 l 线性化环形序列(Linearize Sequence)。 l 显示不确定位点。 保存退出
l 从编辑菜单(EDIT MENU),选保存地图(Save Map)。 l 选择保存位置,命名。
l 单击保存(苹果计算机)或同意(视窗)。
l 从文件菜单(FILE MEN),选择放弃(苹果计算机)或者退出(视窗),电脑提示保存或放弃;选择保存,则你操作的所有结果都会保存起来,否则结果会全部丢失。
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