王镜岩生化知识点(3)

值见P72，PI＝（2.13+2.34）/2＝2.235，很酸。

2.双缩脲反应：见笔记P33，双缩脲（相似于三肽，即2个肽键）、碱性铜离子、紫红色化合物。凡大于三肽的肽都能发生此反应，2肽不行。

3.水解反应：肽可以被酸、碱、酶所水解，其优劣性如下： <1>酸水解：浓酸（6N以上，解释一下N＝M/价），高温（110℃以上），长时（24-36小时），污染，Trp遭到破坏，不消旋，水解彻底

<2>碱水解：浓碱（6N以上），高温（100℃以上），6小时，污染，含-OH和-SH的氨基酸均遭到破坏，Ser、Thr、Tyr、Cys，消旋，水解彻底。

<3>酶水解：胰酶，常温常压，常PH，不消旋、不破坏、不彻底。 常用的蛋白酶，即工具酶：

外切酶：氨肽酶：从N端开始一个个水解肽键 羧肽酶：从C端开始一个个水解肽键：

羧肽酶A：Arg、Lys、Pro除外的氨基酸残基 羧肽酶B：仅Arg、Lys

羧肽酶C：所有的氨基酸残基

内切酶：胰蛋白酶：仅作用于Arg、Lys的羧基与别的氨基酸的氨基之间形成的肽键。产物为C端Arg、Lys的肽链。 糜蛋白酶：仅作用于含苯环的氨基酸的羧基与别的氨基酸的氨基之间形成的肽键。 Trp、Tyr、Phe，产物为C端Trp、Tyr、Phe的肽链。 五.肽的实例

1.谷胱甘肽：其结构见P72，注意Glu与Cys的连接（γ-，而不是正常的α-），还原型GSH和氧化型GSSG，多种酶的激活剂，参与体内多项代谢，主要作用是还原剂，消除体内的自由基（过氧化物，抽烟，黑坳）。

2.催产素和加压素：9肽或环8肽，都是脑垂体后叶激素，结构见《生化制药工艺》P？都有升血压、抗利尿、刺激子宫收缩、排乳的作用，催产素促进遗忘，加压素增强记忆。 3.短杆菌肽和缬氨霉素

4.促甲状腺素释放因子：TRF，三肽，TRF→促甲状腺素→甲状腺素

5.胰高血糖素：29肽，存在，见《生化制药工艺》P？，升高血糖，作用同肾上腺素。 §3.蛋白质

一.种类和性质 1.种类

<1>组成上分：简单蛋白：仅由aa构成

结合蛋白：简单蛋白与其它生物分子的结合物，糖蛋白（共价）、脂蛋白（非共价） <2>形态上分：球蛋白：长/宽≤3～4，血红蛋白 纤维蛋白：长/宽>10，血纤蛋白、丝蛋白 <3>功能上分：酶、抗体、运输蛋白、激素等 <4>理化性质上分：HDL、VHDL、LDL、VLDL <5>构象上分：国际上有蛋白质构象库。 2.性质

<1>紫外吸收：280nm，贡献者是Trp、Tyr、Phe，最主要的是Trp，核酸的紫外吸收峰在260nm。 <2>两性解离：有PI，不能计算，只能测定（等电聚焦）。 等电点沉淀法：PI处蛋白质的溶解度最低。

<3>胶体性质：大分子，多于51个aa残基，最小平均分子量为5000D；在水中能两性解离故而带电，又亲水，所以是胶体，分散好。有电泳、布朗运动、丁达尔现象、不能通过半透膜等等典型的胶体性质。 <4>沉淀反应：凡是能破坏水化膜以及能中和电荷的物质均可使蛋白质沉淀 等电点沉淀：PH值，中和电荷

盐析：高浓度的盐溶液使蛋白质沉淀，离子中和电荷，如(NH4)2SO4 盐溶：低浓度的盐溶液使蛋白质溶解，蛋清的溶解。 有机溶剂沉淀：降低溶液的介电常数。

<5>蛋白质变性：蛋白质在某些外界因素的影响下，理化性质改变、生物活性丧失的现象。这些因素包括热、酸、碱、有机剂等。

蛋白质变性理论：吴宪，1931年提出。蛋白质的功能直接由蛋白质的构象来决定，某些外界因素改变了蛋白质的独特构象，因而使生物活性丧失。但不改变蛋白质的一级结构（即共价结构）。蛋白质的变性与水解是不同的。 当环境条件恢复时，蛋白质的生物活性有可能也恢复，这就是蛋白质的复性。

这一理论在实践中有很重要的指导意义，能够解释酶为什么有最适的PH和最适的温度。 <6>蛋白质的颜色反应：可以用来定量定性测定蛋白质 双缩脲反应：红色，λm＝540nm

黄色反应：与HNO3的反应，生成硝基苯，呈黄色。皮肤遇到HNO3的情况，白→黄→橙黄。 米伦氏反应：与HgNO3 或HgNO2的反应，呈黄色，原理同上。 与乙醛酸的反应：红色，Trp的吲哚基的特定反应。 坂口反应：红色，Arg的胍基的反应。