第17节糖化血红蛋白电泳操作与扫描
第18节 糖化血红蛋白电泳操作与扫描
血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的叶琳。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。血红蛋白的蛋白部分(多肽链)称之为球蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ四种形式。
红细胞内的血红蛋白主要有三种类型:HbA,HbA2和胎儿血红蛋白(HbF),它们都由两条α链和两条非α链组成。
血红蛋白的主要功能是在体内运输输氧和二氧化碳。
血红蛋白糖基化是红细胞内的葡萄糖和血红蛋白β链N末端氨基之间的一非酶促反应过程,是一种不可逆反应。这一反应发生于细胞整个生命周期。
糖化血红蛋白的形成速率与血糖浓度(红细胞内的葡萄糖浓度)有关, 而与胰岛素无关;糖化血红蛋白存在于红细胞整个120天的生命周期中。
糖化血红蛋白(Hb A1)通常占总血红蛋白的 5~8%,由 HbA1a。、HbA1b和HbA1c三种成分组成。 HbA1c。占 HbA1的 70 %~90%,其血红蛋白 β链 N一末端颉氨基残基通过非酶促糖化作用以共价键与葡萄糖分子相连接。
HbA1c的形成仅仅与葡萄糖有关,特异性地反映体内葡萄糖水平。 糖化血红蛋白的水平与测定前数周(一般认为6~8周)内的血糖水平有关,糖化血红蛋白比例高,并发症相对严重,预后相对较差。糖化血红蛋白的量还可作为评价治疗效果的一项指标。因为HbA1C的测量较为客观,不依赖于病人的其他条件(如饮食、服用降糖药、抽血、时间等),所以逐渐被临床广泛应用。
糖化血红蛋白电泳操作与血红蛋白电泳操作完全一样
但不须要染色。
简述如下:
样品处理:抗凝血标本离心(5000转)5分钟,去除血浆。用10倍生理盐水洗涤红
细胞2次
取: 红细胞10μL + 溶血素130μL 。震荡混匀10秒钟,室温下培育5分钟。
加样10μL-→保湿5分钟-→挂缓冲条-→电泳底版加200μL蒸馏水-→吸去胶片表面水分-→ 放
进电泳舱-→放下电极架-→放入加样梳-→关上电泳盖-→电泳选项目--
检查染脱色液--→胶片放入染脱色舱--→ 选染脱色项目--→ --
加样梳: 15人份- 4号位。
糖化血红蛋白电胶片
糖化血红蛋白电泳的扫描与血红蛋白操作也完全一样 正常标本的扫描条带如图 少儿标本的扫描条带如图 Hb A0 Hb A1c < 6%
Hb A1(a+b)
附一高血糖标本报告单:
:
复习题:
1. 简述糖化血红蛋白电泳的操作与扫描步骤。 2. 糖化血红蛋白电泳标本的前处理是怎样进行的? 3. 糖化血红蛋白电泳中常见哪些条带?其异常标准是什么?
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