链脲佐菌素和高脂肪饲料诱导的实验性2型糖尿病大鼠模型

糖尿病实验性动物

115

坐骨神经匀浆iNOS(U mg.prot)活性的变化

　　表2　

组别对照组对照组

0h0199±01030194±0108

6h1135±01051129±01063

12h1158±01181140±01103

3

24h2110±01251164±01293

3

72h1170±01191139±01163

7d1106±01281102±0121

　　与对照组比较,3P<0105,33P<0101

表3　组别对照组实验组

0h5130±01735125±0165

6h6178±01895193±01653

血MDA(Λmol L)活性的变化

12h8151±01967148±01853

3

24h10123±11128183±019433

72h9113±01797195±01813

d6126±01585184±0152

　　与对照组比较,3P<0105,33P<0101

3　讨论

研究表明一氧化氮作为神经递质,一方面对人体可起

到有益作用,另一方面不加控制的高水平NO则对人体具有神经毒和细胞毒作用,NO的体内合成需一氧化氮合酶(NOS)的参与。固有型NOS(cNOS)正常情况下就存在于体内,当受各种因素刺激,激活产生低水平(pmol水平)NO,行使正常的生理功能();O主要存在于巨噬细胞、胞,iNOS,(l水平)的NO,发挥杀伤、。在坐骨神经缺血再灌注后,激活了肿瘤坏死因子,诱导iNOS大量合成,产生高水平NO,由于持续大量的NO与同时产生的超氧阴离子起反应,生成剧毒化合物(过氧硝酸盐和游离羟基),而造成组织损伤[2]。Qi,Wen2Ning研究发现,坐骨神经缺血2小时,iNOSmRNA表达,再灌注3小时后明显升高,但其蛋白质合成的量却很少[3]。本实验研究表明,在缺血5小时坐骨神经内就检测到iNOS合成,再灌注后明显升高,24小时后到达高峰,随后下降,7天后基本恢复正常,血清中的NO也随iNOS相应变化,通过iNOS特异性抑制剂氨基胍腹腔内注射,观察到实验组于再灌注后0小时和7天的血清NO和坐骨神经匀浆iNOS值略低于对照组,但并无统计学意义,可能因为坐骨神经单纯缺血5小时后还未引起iNOS的大量合成,再灌注7天后iNOS的量也基本恢复正常,所以实验组和对照组并无统计学意义;而随着再灌注延续,iNOS开始大量合成,24小时后到达高峰,应用AG后抑制了iNOS的大量合成,所以于再灌注6小时、12小时、24小时、72小时,血清NO和坐骨神经匀浆iNOS值与对照组相比则有统计学意义,特别在再灌注24小时表达的高峰,这说明AG可以明显抑制iNOS的合成,减少血液中NO。根据同时间段NO和iNOS的值进行相关分析表明NO和iNOS间存在正相关,说明缺血再灌注损伤后

[1]

血液中产生的NO主要是由iNOS诱导合成的,证实iNOS参

与坐骨神经的缺血再灌注损伤。

,通过对缺血,但氧自由基MDA,可以反映,间接的反映缺血再灌注损伤的严重[4]本实验研究表明在缺血5小时血清中的MDA接近正常值,再灌注后明显升高,24小时后到达高峰,随后下降,7天后基本恢复正常。说明周围神经组织单纯缺血引起的损伤相对较轻,再灌注则引起更为严重的损伤。通过iNOS特异性抑制剂氨基胍腹腔内注射,观察到实验组于再灌注后6小时、12小时、24小时、72小时则有统计学意义,进一步说明AG可以减轻坐骨神经缺血再灌注损伤。

总之,本实验证明大鼠坐骨神经缺血再灌注损伤要比单纯缺血引起的损伤更为严重,iNOS抑制剂AG可抑制血由iNOS诱生表达所形成的NO在坐骨神经缺血再灌注损伤中的毒性作用,减轻周围神经损害。

参　考　文　献

1　LcfcbvrcRA.Nitricoxidcinthcpcriphcralncrvoussystcm.Ann

～388.Mcd1995,27:379

2　郭荣惠,编译.

(3):183～184.3　WangY,GuoY.

34(1):5～15.

4　LinYH,ChiuJH.Preconditioningsomatothermalstimulationon

rightseventhintercostalnerveterritoryincreaseshepaticheatshockprotein70andprotectstheliverfromischemia2reperfusion

Ischemicpreconditioningupregulatesinducible

nitricoxidesynthaseincardiacmyocyte.JMolCellCardiol2002,

一氧化氮和两面性.中国医药导刊,2001,3

～334injuryinrats.JSurgRes2001,99(2):328

链脲佐菌素和高脂肪饲料诱导的实验性2型糖尿病大鼠模型

福建省立医院内分泌研究室(350001)　李连涛　林丽香　陈　刚

【摘　要】　目的　制备一种发病过程类似人类2型糖尿病的动物模型。方法　雌性Wistar大鼠喂以高脂饲料9

糖尿病实验性动物

116

周后,继以小剂量链脲佐菌素(STZ,25mg kg,腹腔注射)诱发胰岛素代偿分泌障碍,使之产生高血糖症。结果　高脂饮食后一个月,大鼠出现胰岛素抵抗、高血糖、肥胖。结论　本研究通过饮食方法成功复制出2型糖尿病模型。

【关键词】　糖尿病;动物模型;大鼠

【中图分类号】R58711　【文献标识码】B　【文章编号】100222600(2003)0220115203　　人类疾病的动物模型可为人类疾病研究提供重要线索。目前国外2型糖尿病的研究,采用的动物模型多为遗传相关模型,如ob ob小鼠、db db小鼠[1]及OLETF大鼠[2]和肥胖型zucker大鼠等,由于遗传因素在其发病过程中起主导作用,这不完全与临床相符。此外最主要的原因是,其来源在我国相当困难且十分昂贵,不利于研究的发展。本次研究用雌性Wistar大鼠为对象,通过特殊的膳食喂养,使其发生肥胖及高胰岛素血症,从而出现胰岛素抵抗。现将我们用Wistar大鼠建立的2型糖尿病模型报告如下。1　材料与方法

111　动物选择与喂养:清洁级近交系雌性Wistar大鼠(中山医科大学实验动物中心提供)23只,重约250g左右,单笼喂养,室温18～25℃,相对湿度50%～80%,每日光照12小时,自由摄食、饮水。

112　饲料:高脂肪饲料按蛋白质、脂肪(%,w w)1315、3715、411脂肪、,)462。113　实验方法A(常规饲料喂养组,n=4),B(,n=6),C(高脂饲料喂养+STZ组,n=13)三组。分别用相应饲料喂养9周,第九周末禁食12小时后,C组腹腔内一次性注射STZ(STZ25mg kg体重,用011mol L无菌柠檬酸缓冲液pH414配制);A、B组腹腔注射相应体积的011mol L无菌柠檬酸缓冲液。继续喂养4周。各组大鼠于第9周末(给药前)及第10、11、13周末(给药后的第1、3、4周末)剪尾取血,测空腹血糖,每周测1次体重、摄食量;第13周末麻醉大鼠,从心脏取血,测

表2　时间

组别

A

5周末

BCA

8周末

BCA

13周末

BC

空腹血清胰岛素、甘油三酯、胆固醇水平(分别由我院同位素

室和心研所免疫室检测)。

(1)血糖:用美国雅培公司的114　指标及测定方法:

PrecisionQ3I3D血糖仪和血糖试纸条测定。(2)胰岛素:用北京北方生物技术研究所生产的胰岛素放射免疫分析测定盒测定。(3)体重、摄食量:每周固定时间测定。(4)STZ购自Sigma公司。

115　统计学处理:统计分析用SPSS统计软件进行t检验,显著性界值定为0105。2　结果

211B、C组大鼠的体重增加值从第,直到实验结束B、C。见表1。

表组别

A组B组

5周末23167±514038166±91543

8周末35167±1114357162±31383

10周末42133±1012367133±131673

3

13周末46167±1213877100±8100379150±111043

3

C组42125±11175363121±20114382175±201123

　　与正常对照组相比,3P<0105,33P<0101

212　各组大鼠的糖耐量实验(GTT)及糖耐量曲线下面积(AUC):见表2。 …… 此处隐藏：5208字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……