分子生物学I复习题答案(2)

逆转录的生物学意义：

(一）逆转录现象的发现是对传统中心法则的补充与完善。

(二）逆转录现象及随后发现的核酶，使科学界对生命的起源及RNA在进化过程中

的重要性有了更深刻的认识。

(三）逆转录酶的出现为更好地开展分子生物学研究提供了有利的工具，逆转录技

术已成为获取目的基因的重要方法之一。

7、UV导致的DNA损伤常见的为哪种？如何修复？

( 1. ) 嘧啶二聚体 用光修复酶进行修复

（2.）原核切除修复 去除损伤DNA，填补空隙和链接

转录

名词解释

1.转录 :是指以DNA为模板，在依赖于DNA的RNA聚合酶催化下，以4种rNTP（ATP、CTP、GTP和UTP）为原料，合成RNA的过程。

2.启动子 :在DNA模板上，控制RNA合成开始、并且与RNA聚合酶结合的特异部位或区域，称为启动子(Promoter)

3.RNA拼接 : RNA拼接（RNA splicing）：一个基因的外元和内元共同转录在一条转录产

物中，将内元去除而把外元连接起来形成成熟RNA分子的过程

左、右拼接点 5’ 拼接点或左拼接点（内元上游）, 3’ 拼接点或右拼接点（ 下游）

不连续转录：

反式拼接

转录终止子 终止子（terminator）：在转录的过程中，提供转录终止信号的RNA序列

简答题

④ 说明RNApol全酶各个亚基的主要功能

。

⑤ 以E.coli为例，说出Prok.启动子结构及各部分功能。

答大部分启动子都存在这两段共同序列，即位于–10 bp处的TATA区和–35 bp处的TTGACA区，它们是RNA聚合酶与启动子的结合位点。

位于-10bp左右，A.T较丰富，易于解链。其功能是：(1) RNA pol紧密结合;(2) 形成开放启动复合体；(3) 使RNA pol定向转录。

位于-35序列又称为Sextama盒（Sextama box）其功能是:(1) 为RNA pol的识别位点。σ亚基识别-35序列，为转录选择模板(2) -35和-10序列的距离是稳定的，此与RNA pol的结构有关。

⑥ 以Prok.为例简述转录起始过程。

答 1.全酶与模板的DNA接触，生成非专一的,不稳定的复合物在模板上移动；

2. 起始识别：全酶与－35序列结合，产生封闭的酶-启动子二元复合物（closed binary complex）；

3.全酶紧密地结合在-10序列处，模板DNA局部变性，形成开放的启动子二元复合体；

4. 酶移动到I，第一个rNTP转录开始,σ因子释放,形成酶-启动子-rNTP三元复合（ternary complex）。

⑦ 试述Prok.中转录终止子的类型及终止机制。

答： 1、 终止子的种类

（1） 内在终止子（不依赖 ρ因子的终止子）体外实验中，只有核心酶和终止子就足以使转录终止

机制：① 新生RNA链发夹结构形成与RNApol发生作用从而阻止RNA链的释放造成

高度延宕（典型的有60秒左右）② RNApol暂停为终止提供了机会，6 ~ 8个连续的U串可能为RNApol与模板的解离提供了信号 （RNA－DNA之间的 rU－dA 结合力较弱）于是： RNA－DNA解离，然后三元复合体解体，接着RNApol解离，最后转录终止

（2） 依赖ρ因子的终止子蛋白质辅助因子－－ρ因子存在时，核心酶终止转

机制：RNApol 转录了IR序列之后，发生一定时间的延宕，a、ρ因子与RNA结合（终止子上游的某一处，RNA的5’端 ）b、ρ因子沿RNA从5’→3’移动（NTP水解供能）（终止子处的较长时间的延宕给ρ因子追赶的机会）c、ρ因子与 RNApol 相互作用而造成转录的终止

⑧ 解释E.coli的λ噬菌体调控不同发育阶段基因表达的抗终止机制。

答

⑨ 简述内元的种类及拼接方式。

答Ⅰ类内元（group Ⅰ）:含有中部核心结构的细胞器基因（核基因）

Ⅱ类内元（group Ⅱ）:不含有中部核心结构 细胞器线粒体基因内 （核基因） Ⅲ类内元 （group Ⅲ）:具有 GU－AG 特征的边界序列核基因mRNA前体

tRNA基因的内元均位于 tRNA 的反密码环上

⑩ 说明tRNA内元拼接的简单步骤和特点。、

tRNA基因的内元均位于 tRNA 的反密码环上，需要蛋白质酶参与的拼接

8、 tRNA基因的类型及各类型的前体在加工过程中所要解决的问题。

答Ⅰ型 具有3’端的CCA序列，Ⅱ型 没有3’端的CCA序列

加工中要解决Ⅰ型需在酶的作用下切除CCA下游一段序列 （Prok. 的tRNA多为Ⅰ型） ，Ⅱ型需要在酶的作用下添加CCA序列（少数 Phage 、 Euk.）

9、说明poly(A)在分子生物学实验中的应用价值。

答： a、 可将 oligo (dT) 与载体相连，从总体RNA中分离纯化mRNA，b、 用寡聚dT（oligo (dT)）为引物，反转录合成 cDNA

10、为什么在细菌（Prok.）中很少涉及到ρ因子？

答

11、Euk.mRNA帽子的种类。

帽子0（Cap-0）m7GpppXpYp----------（共有） m7G N7—甲基鸟苷

帽子1 （Cap-1m7GpppXmpYp----------第一个核苷酸的 2’-O 位上产生甲基化 （A N6 位甲基化）

帽子2（Cap-2）m7GpppXmpYmp第二个核苷酸的 2’-O 位上产生甲基化（A、G、C、U）

12、以四膜虫的大rRNA前体的拼接为例，说明第Ⅰ类内元拼接

的简单过程及特点。

13、真核生物mRNA的3‘poly(A)的编码情况及其准确生成的机制为何？

答 准确是由于：内切酶的识别位点 切点上游 13－20bp处的有AAUAAA序列，切点下游的

有GUGUGUG序列 （单细胞Euk.除外）

机制a、 RNA末端腺苷酸转移酶（poly(A) 聚合酶）催化前体－－ATP，b、添加位点内切酶(360KDa)切除一段序列， 由poly(A) 聚合酶催化添加poly(A)

14、解释“套索结构”，及内元中的套索结构中的磷酸二酯键有何特殊之处。

答

翻译

1． 翻译是基因表达的第一步，是根据遗传密码的中心法则，将成熟的信使RNA分子

（由DNA通过转录而生成）中“碱基的排列顺序”（核苷酸序列）解码，并生成对应的特定氨基酸序列的过程。

2． 密码子(codon)： mRNA上每3个相邻核苷酸编码多肽链中一个氨基酸，这三个核苷酸

称一个密码子或三联体密码。

3．密码的简并性（degeneracy）由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并

4．同义密码子（synonymous codon）由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为简并,对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子

5．变偶假说Crick提出摆动假说（wobble hypothesis）根据摆动假说，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。

6．移码突变在正常的DNA分子中，某位点插入或者缺失的碱基数目为非3的倍数，造成该点之后的蛋白质三联体密码子阅读框发生改变，从而使一系列基因编码序列产

8．多核糖体

1．参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能?

(1)参与蛋白质合成的RNA mRNA：蛋白质的DNA序列信息的中间体。tRNA：运送特定氨基酸到核糖体上合成蛋白质。rRNA：核糖体的组成元件。

(2)mRNA与遗传密码

(3)rRNA与核糖体 核糖体是翻译进行的场所

(4)tRNA与氨基酰-tRNA tRNA“译员”的作用 既是密码子的受体,也是氨基酸的受体 氨基酰-tRNA 为肽建的合成提供能量 和执行遗传信息的解读 。

(5)蛋白质因子 多种翻译因子组成翻译起始复 …… 此处隐藏：3212字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……