微生物实验报告思考题答案

思考题

1、脱色环节，脱色不足会把革兰氏阳性菌染成阴性菌，脱色过度会把阴性菌染成阳性菌；复染环节，染液不能干涸。 最关键的环节是乙醇脱色环节。

2、菌龄太老会造成着色不均染色效果不好~阴性阳性不明显分不太清楚,不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌~

3、不可以。因为革兰氏碘液的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的亲和性或附

着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落。改变顺序可能会对效果有影响，所以最好按步骤做；脱色后复染前，理论上革兰氏阳性菌呈紫色，阴性菌无色。

4、可以，因为脱色后G+是紫色的而G-是无色的，这时，已经可以区分了，但是如果不经复染的话，镜检时看不清G-的细胞形态，而且如果没有和G+一起混染的话，基本看不清什么，但是如果只做区分的话，可以不经过复染。

5、注意菌龄，12-18小时的培养物；注意乙醇的脱色时间，20-30秒，时间过长或过短都会和结果不符。

6、 因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察。

另外,一般作细菌装片不用盖盖玻片,所以待干燥后才能观察.如果盖上盖玻片后就不用考虑需要干燥的问题.

7、未经热固定，在剩下的步骤中，菌体会被液体冲走，镜检时出现在视野中的细菌极少，甚至没有；加热温度过高或时间过长会导致菌体变形或形态破坏。