唾液淀粉酶最适pH值的测定实验设计

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验

小组成员:刘倍材何标才揭春晓李芮

实验目的：

1. 掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告。 2. 掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。 3. 熟悉影响酶促反应速度的因素。

实验原理：

1．酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH、激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响，可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色，来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。

2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时，淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于660nm处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同，吸光度值也不同。因此，通过测量660nm处的吸光度值，可以了解PH对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。

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实验步骤：

1.缓冲溶液的配制。取12支试管进行编号1-12，分别按下表加入试剂。

2.唾液的采集。

先给备取者一杯纯净水让其漱口，将漱口液吐掉,让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口，在备取者眼前放上一些话梅，这时，备取者的唾液会不停地流出来。

3.唾液的稀释。取10支试管，进行编号1-10＇,进行稀释。

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＇

4.唾液稀释倍数的选取。

另取10支试管，分别编上A-K号，各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入1ml的0.02％的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出，滴加2～3碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一支，记录稀释倍数。 5.最适PH的测定。

另取12支试管,进行编号,按下表加入试剂。进行测定。

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6.结果分析

当在最适PH下反应时,淀粉被水解最完全,剩余最少,颜色最浅,吸光度最小,所以吸光度最小对应的PH为最适PH。

思考讨论:

1. 2.

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