72 临床血液学基础检验测试题
临床血液学基础检验测试题(论述一)
1.试述瑞氏染色中pH对细胞染色的影响及实际工作中应注意的问题。
【答案】细胞的各种成分均由蛋白质构成,由于蛋白质是两性电解质,所带正负电荷的数量随溶液pH值而定。对某一蛋白质而言,如环境pH<pI(蛋白质的等电点),则该蛋白质在酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;相反,当环境的pH>pI即在碱性环境中负电荷增多,易与亚甲蓝结合,染色偏蓝。临床上常用缓冲液(pH 6.4~6.8)来调节染色时的pH值,同时还应注意使用清洁、中性的玻片,优质的甲醇配制染液以期达到满意的染色效果。
2.简述氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定的原理及注意事项。
【答案】原理:红细胞在Hb转化液中溶血后,除SHb,外各种Hb均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi),Hi再与试剂中CN-结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN)。HiCN的最大吸收波峰为540nm,根据测得的吸光度值,即可计算出Hb浓度。注意事项:①试剂中的氰化钾有剧毒,处理不当可造成严重公害;②HiCN转化液不能储存在塑料瓶中,否则会使CN-丢失,结果偏低;③此法不能测定SHb,对HbCO的转化较慢,遇高球蛋白或高白细胞血症时溶液易混浊。
镰状细胞性贫血(HbS病)
性激素结合球蛋白(SHB)
3.试述及溶血后产生的主要影响。
【答案】引起标本溶血的原因主要有:注射器和容器不干燥、不清洁,压脉带捆扎太紧、时间太长,穿刺不顺利产生的损伤,抽血速度太快,未取下针头直接将血液注入容器、抗凝混匀用力振荡等。标本溶血产生的影响主要有:红细胞总数、血细胞比容降低,红细胞内成分外溢,影响钾、镁、氨基转移酶、胆红素等多项指标的准确性。
4.简述血红蛋白测定的方法学评价。
【答案】 (1)HiCN法:①此法是ICSH和WHO推荐的参考方法,具有操作简便、结果稳定可靠、除SHb外其他Hb衍生物均可检测、读取吸光度后可直接定值等优点;②该法致命弱点是试剂中含剧毒药氰化钾,使用处理不当可造成严重公害。废液须经过处理方可排放;③此法也不能测定SHb,对HbCO转化较慢,遇高球蛋白或高白细胞血症时溶液易混浊。
(2)SLS法:①此法突出优点是试剂无毒性;②操作简单,呈色稳定,准确性和精确性符合要求,被推荐为次选方法;③但SLS本身质量差异较大,且SIS会破坏WBC,不适于同时进行白细胞计数和Hb测定。(3)碱羟血红蛋白(AHD575)测定法:准确度、精密度均较高,可用氯化血红素作标准品。但该法反应产物的吸收峰位于575nm处,溶液中碱性较高,目前血细胞分析仪均未采用。 (4)叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法:与HiCN相似,准确度、精密度较高,试剂毒性比HiCN低,但仍存在公害问题。 (5)溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血红蛋白测定法:该法试剂溶血性强又不破坏WBC,可同时进行白细胞计数,可用于血细胞分析仪自动检测Hb和WBC。缺点是对Hb测定结果的准确度和精密度略低于以上各法。
5.简述十二烷基月桂酰硫酸钠(SLS)血红蛋白测定的原理。
【答案】原理:除SHb外,各种Hb均可与低浓度十二烷基月桂酰硫酸钠作用,生成SLS-Hb棕红色化合物。SLS-Hb最大吸收波峰538nm,波谷500nm。,肩峰560nm。由于摩尔消光系数尚未最后确认,因此不能用吸光度“A”值直接计算出浓度。只有借助于经HiCN法定
值的抗凝血或溶血液,制备标准工作曲线,间接得到Hb浓度。
6.简述网织红细胞计数的临床意义。
【答案】(1)判断骨髓的造血功能:①网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性贫血、急性失血性贫血时网织红细胞可明显增高;缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血时,网织红细胞正常或轻度增高;②网织红细胞减少:表示骨髓造血功能低下,多见于再生障碍性贫血。(2)作为贫血治疗的疗效观察指标:缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血的患者治疗后,网织红细胞升高说明治疗有效,贫血愈严重,网织红细胞升得越高,而且其升高在红细胞和出升高之前;反之,如果网织红细胞不见增高,说明治疗无效或骨髓造血功能有障碍。(3)骨髓移植后监测骨髓造血恢复情况。
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