上皮钙黏着蛋白对人炎性乳腺癌细胞系生物学特性的影响

上皮钙黏着蛋白对人炎性乳腺癌细胞系生物学特性的影响

200年 16第月 28卷第 1期C Ji Ol cJ ay20,nVl hn n o a,ru0 6 0垫

.

基.研究 .础上皮钙黏着蛋对白人炎性乳腺癌胞系细生物学特性的影响董慧明刘刚吴炅 劲松陆罗建民镇宙邵沈志敏【摘】要的目研究皮钙黏着蛋上白 (ah— )r cE dei人炎对乳性癌腺胞细系 SM91生的长、 n U 4侵袭用脂应质法基因体染转技术，编 E码cdei因显负性调控突变将—ah rn基

等生物学性特的响影。方

法体( k一一—ha )r质粒导入 S M19中，H 2cdEein U4用应—RC流式胞分析法筛选、细 TPR、鉴定出E dec ia rh n基显因性负调 控突变高体表达阳性的克隆。观察转染前后人炎性乳 癌腺细胞系 MS91长、袭 U生4 侵能力特等性的化变以相及关分子的改变。结 R果— C We及tn印迹法结果均示，显对照组 PT Rr se与 (转染及空质粒组)比，染后高表达小鼠 H的 2性阳克隆细的胞内性上皮源钙黏着蛋白表达未相转-k

明显下调，细其生长胞速增度无明殖显化变，而体外侵袭力分能析显其示侵袭力能明显下降，进一研究步发现，质金属白酶蛋 MP1M M -基 M .、9P在 NmR A水 明平显下调 ;胶谱酶分析也显示，明MM P明 9 -

下调显结。其论袭能侵力。在 Ecde n高表的人炎达乳腺性细癌胞 S系MI9,中表达的下可明调抑显制— har i U4其

【主题词】钙黏着糖白类蛋；上皮乳腺肿；瘤；肿瘤侵袭 iBo a i i n i clogc ls fganc fE -d rn n nnaf m tay br a c cnso c a i el i. eo c ehi i a i lm oar e ar it mle n l ONGD i u—Hmi, ng

,UW inJ og,L fnnsL U in mi U— g, OJa n—,S N h zon,S A Oio HE Ze—h u H

— nDae t n i. pmr me t

ro S re s, ca rtu,nh h inne H s liF dnU ri, i nh i h0 02 hn feBt ugr Cn estI tS aga Cc r to, a u n e

t Sa g 2a03, iC aa y i e a pa v s yC e r odn u h r H 0z i n mElaz ia h o h￣ o tm or s ng ait o:s A h— — i mh ia@ ao. o mi p

【ss rc 0】etbe o isgvt teeteo Ecd eo eb ng leai f U 4 Ab at tj cvT e t ah f f c—ah r n ito ihv rb 19, M i i ens ih o c ooSa a n in mfm oayb e s a r cc l e ll tr r a tc ne e l .iMe hd S M1 9 c ir n fr e c i o n n— ae ei n t os U4 el ee w tset d w tdm iat g t ns a hv m au c dnre pr sg piami Th o ii eo e c th g re p es odfm i— a e ie a t nEt a h ie x e sn l s .d ep t s n s lwih ieh x r sn io o n ntn gt v E— vc d rh mn u a r d ni e y R—T e i tnatwee eitf d b i CR nPd ufoe c n a o lr est f wc tm er e hd. hT f e ces i ell y oty m to e idr f e nn c l go h p,ioeai n ap os e we n s e cot e n ot os wee c m p d. R reu slW h ra r w t lrr t n n ai nbt e p ii l ns ad cn rl r oa e fo o s t eesv ot l e ia o n io vc oe fsonh g h epr itr o pfst el n sa ow c e,a c pa e mwih c nto,s t a lt e o na in w a ifn o rdt o rl h b i f yvi o sis

dcee n h era d ad t em N Rlv ol s A esefMMP n 1一 da MM P9 wr o ne u a e. G tl gy a h n lss -e e dw rgl dt e ai z mo r p y aa iyn a s o r fe h e re ai e prs i n

o l o n m c td d c en gx e os fM MP - it sp e tocns o lC i hI se le i si n9 he io i l evn uconsn t i lcn l .

mo e. d w g— lt n o c dei a nii te a i t fiv so f t i i a d o 1 r nu i fa—E a hnr nci hb th l o yna i n o hsn mmao r a tcn e oe b i f lrt be s ac yrc li e . lel

n【 uj e do】C di; e iE ie Be tpema; Nol mi a i s bet r sarh p tlm r; a l o ep a vs nw n h u ns ssn o

肿的瘤生发、侵袭转移是和一个多基因参、与多

同程不度的表达调，下转高移潜能肿瘤细株胞，在其表达多降低，果将如源外性 cE end基导因人并 —hr a i使其达表可，制抑其侵袭与转移能力的 _。一则 , 2般认为，— ahr cEdei达降低可 与能肿细瘤侵胞 n袭表与移转能力增的加及细以胞去化分等物生行为的学阶演进的极其复段的杂物生学过程，中肿瘤细胞其

黏性附低降脱并离发灶是肿瘤侵袭与转移原早阶期 段重要的始动节环。大多研究数表明，上皮钙黏 蛋着白 (—ah r )肿瘤组 中较织正常织多有组 Ecd e 在 in金基项目：家杰出青年科学基资金助项目 (0 20 )5国家 国051;3改变有关。而，然年近来研的究却发现，生在学物行为高恶度性人的炎性腺乳癌的织组标本和细系胞中 —,ha有一致性 r的异高常的功能性表 cdEei n达’;提示其与炎性腺乳癌侵、袭移潜能密切并5j转五十攻关助资项 (目0 A 10 B )4复旦学肿瘤大院医金基助资 20项 B 37;目 ( 00 J 1 3Y2 0 0

作 )者单位：002海上，旦大 附学属肿瘤院医乳腺科外，腺 2 03复乳相关’。我将编们码并表 达Edce因 i的显— hr na基性负调突变体的控质导人粒 cEde .iharn高表达人炎乳性腺细癌胞系 S M 19,中 E建 d ce定 iU 4构 a h r. n

稳癌究研[董所

慧明 (工作单位现： 043安徽埠医蚌院学属医院外附230科)刘刚、炅、劲、松建、民镇宙、志敏]、吴陆 沈邵罗 讯作者：通敏志，— i: i ho aon. 邵 oEma zmi sayho@ c lh n

下调的r细模胞型，并探讨Edei其c侵袭、 .hr an对转移

上皮钙黏着蛋白对人炎性乳腺癌细胞系生物学特性的影响

l2o . 200 6年月第1 2卷第 81 C i J e alu r 0,6oV 8, N1￣—h n J nO o,J n a y 2 0—潜能影响的及可能作的机制用。材料与法方一

.We3 bt o迹印：法 sm lte总蛋白质的提取 D、/ S S

P GAE电泳、膜等步骤 考参《子克隆第 2》版分和转文献[ 01]方法行进，检按测PEC I R E公的 E L检 C司测试剂盒说明进书。 4行.胶明酶谱：基质 属金蛋 白 _酶9m( x a t ri

、材料

人炎性腺乳癌细 胞系 SM1由美 9国U 4M ci n大学 hEe t h n授教惠，—赠 a r h i g a thiSe e r Epcd e n i

mlpoet ea le trsn ao i9.M MP9)用 接的酶谱分直析-采法。:细在胞含 5胎牛血清的 M FD 2培养 ME 1%显性负调突变控体表达质粒 ( 2d cE d e)n H一k_— h ar iD DA3 c1N .一()由美加州大国旧金山学分校t a Ke da1 H教授惠赠 c, N .一)(r m r nRa 1 D Ap 13空质粒购自 l v gt司。n nie o r公瓶中生至 8长%汇合， 0后然换成更无血清的D MME F 2培养液继续培 养 收集 2无清血D MF 2 4h1后M E 1培养液，消化下培瓶养内细胞数记，并据根细胞记数结果量上化样量。用含 l采明的胶聚丙酰凝胺胶

引物%序列： E e dei E游：5一 GC T ah—r n AC A—G GC GA ,游一 : C A;GC CG G— CC r G 3G r下 5一 C (AG TTT C TCC 3 b5:鼠 H2上游： A G F A C F 6 3小 p一5一T C—C G G T AGFA C 3T,游： C C C C FC— G一下 5一 G C G TTT进行电泳,电结泳束后， 2 5T in一

0用 . ro X% 0漂洗 t1 3, i c 0 3 nm在c7条件，于孵下化液 1中置 h进 6行酶降明胶 .再解 2用5考马司蓝染色显示条带。.% .体外5侵实袭验： B i cn e公司明说 按 Do iBcs seG TG一 2 4 b:MMP9上游 : C G C—C G TF3 6 p -一 G 5 T A T T G CCA G一，游： C C AG C G G— GA C TTT 3下 5 .T A AA AC T C A C .4 p9MMP 卜.游： T'A T—C G T 3 6 b : .5一 I T ICG C唧 …… 此处隐藏：8986字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……