人凝血因子_提取工艺优化研究_邓志华

江西医药年月第卷第期，，，·107·

血管作用，增强了5-羟色胺的缩血管作用[11]。另有学者认为，STBMs不仅直接损伤内皮细胞，并且刺激全身炎症反应[12]。研究表明，STBMs诱导单核细胞产生肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IL-12、IL-18和

kappaBandplacentalapoptosisinpregnanciescomplicatedwithintrauterinegrowthrestrictionandpreeclampsia：animmunohisto-chemicalstudy[J].TheTohokujournalofexperimentalmedicine，2004，204(3)：195-202.

[7]HuppertzB，KadyrovM.Apoptosisanditsroleinthetrophoblast[J].AmericanJournalofObstetricsandGynecology，2006，195(1)：29-39.

[8]蔡霞，乔拉，耿丽红，等.妊娠高血压综合征胎盘细胞凋亡的研究[J].新疆医科大学学报，2003，5：021.

[9]HungTH，SkepperJN，Charnock-JonesDS，etal.Hypoxia-reoxy-genationapotentinducerofapoptoticchangesinthehumanpla-centaandpossibleetiologicalfactorinpreeclampsia[J].CirculationResearch，2002，90(12)：1274-1281.

[10]王林，辛晓燕，王哲，等.妊娠高血压综合征胎盘组织中细胞凋亡的观察[J].第四军医大学学报，2005，26(20)：1895-1897.

γ干扰素（INF-γ）等炎性细胞因子，有学者认为STBMs是单核细胞强有力的活化剂，通过NF-κB

[13]

信号传达通路触发炎症系统[14]。另一方面，同型半胱氨酸可以促进氧自由基的生成，损伤血管内皮细胞，造成其功能异常。

[15]

由此可见，各种因素激活胎盘中合体滋养细胞凋亡信号，通过两种凋亡途径传递，使得Cas-

pase-3酶原激活，从而造成胎盘合体滋养细胞凋

亡。而Caspase-3在妊娠期高血压胎盘组织中表达增多，证明其合体滋养细胞凋亡比正常妊娠组多，相比于正常妊娠而言，STBMs进入母体血液循环增多，继而导致妊娠期高血压疾病的发生和发展。

参考文献

[1]杨雪芳，阮秀兰，钟永兴，等.不同孕周早发型重度子痫前期的临床分析[J].江西医药，2007，41(10)：773-775.

[11]TesseA，MezianiF，DavidE，etal.Microparticlesfrompreeclam￣pticwomeninducevascularhyporeactivityinvesselsfrompregnantmicethroughanoverproductionofNO[J].AmericanJournalofPhysiology-HeartandCirculatoryPhysiology，2007，293(1)：H520-H525.

[12]RedmanCWG，SargentIL.Circulatingmicroparticlesinnormalpregnancyandpre-eclampsia[J].Placenta，2008，29：73-77.[13]GermainSJ，SacksGP，SooranaSR，etal.Systemicinflammatorypriminginnormalpregnancyandpreeclampsia：theroleofcircu-latingsyncytiotrophoblastmicroparticles[J].TheJournalofIm-munology，2007，178(9)：5949-5956.

[14]MesserliM，MayK，HanssonSR，etal.Feto-maternalinteractionsinpregnancies：placentalmicroparticlesactivateperipheralbloodmonocytes[J].Placenta，2010，31(2)：106-112.

[15]樊李平，付芬.妊娠期高血压疾病与亚甲基四氢叶酸还原酶基因的相关性研究进展[J].江西医药，2007，42（2）：171-173.

[2]RedmanCW，http://doc.guandang.nettestadvancesinunderstandingpreecl￣ampsia[J].Science，2005，308：1592-1594.

[3]牟耀华，邢军.重度子痫前期患者胎盘Caspase-3与肝细胞生长因子的表达及意义[J].中国煤炭工业医学杂志，2009，12（8）：

1186-1187.

[4]戴昕，李占全，冀林华.凋亡相关蛋白Caspase研究进展[J].中国现代医药杂志，2010，12(4)：130-132.

[5]赵瑞杰，李引乾，王会，等.Caspase家族与细胞凋亡的关系[J].中国畜牧杂志，2010(17)：73-78.

[6]AbanM，CinelL，ArslanM，etal.Expressionofnuclearfactor-

(收稿日期2013-12-22)

实验研究··

人凝血因子Ⅷ提取工艺优化研究

邓志华，何淑琴，梁小明，张丽铃，

(江西博雅生物制药股份有限公司，抚州344000）

摘要:目的优化血浆中人凝血因子Ⅷ提取工艺条件。方法以人血浆冷沉淀为原料，人凝血因子Ⅷ的比活性回收率作

为评价指标，采用单因素试验，对铝胶的加量，铝胶吸附时的pH值、酸沉淀时的pH值等进行研究，优选提取工艺。结果加入冷沉淀重量12%的铝胶，并将pH值调节至7.1进行吸附，上清液中人凝血因子Ⅷ比活性可达9.50IU/mg,酸沉淀时将pH值调节至6.3，离心上清夜中人凝血因子Ⅷ比活性为11.50IU/mg。经过以上两步处理，可将人凝血因子Ⅷ比活性提高近2倍。结论人凝血因子Ⅷ提取工艺优化研究工艺合理、可行，能有效达到纯化提取人凝血因子Ⅷ的效果。

关键词：人凝血因子Ⅷ；铝胶吸附；酸沉淀中图分类号：R973.1

文献标识码：A

文章编号：1006-2238(2014)02-107-02

DOI：10.3969/j.issn.1006-2238.2014.02.006

StudyontheextractionprocessofhumancoagulationfactorⅧDENGZhihua，HEShuqin，LIANGXiaoming，etal.JiangxiBoyaBiopharmaceuticalLimitedByShareLtd，Fuzhou，Jiangxi，344000.

Abstract：ObjectiveOptimalhumancoagulationfactorⅧinplasmaextractsprocesscond-itions.MethodsWithhuman

·108·江西医药年月第卷第期，，，plasmacryoprecipitateasrawmaterials，humanfactorVIIIactivityrecoveryrateastheevaluationindex，thesinglefactortestwasusedtostudytheamountofalumina，theadsorptionofpHvalue，pHvalueofacidprecipitation，optimumextractionprocess.Re-sultsAddcoldprecipitationof12%aluminagelof3%andthepHvalueisadjustedto7.1，thenadsorbed.ThehumanfactorⅧspecificactivityratiocanreach9.50IU/mginthesupernatant，acidprecipitationwhenthepHvalueisadjustedto6.3，humanfac-torⅧspecificactivitywas11.50IU/mginthecentrifugalsupernatant.Af-tertheabovetwosteps，thehumanfactorⅧspecificac-tivityincreasednearly2times.ConclusionTheoptimizationprocessisreasonable，feasible，couldreachpurification，extra-ctionofhumancoagulationfactorⅧ.

Keywords:HumancoagulationfactorⅧ；Aluminagel；Extractionandpurificationprocess

人凝血因子Ⅷ（humancoagulationfactorⅧ，F响时，分别加入冷沉淀重量6%、8%、10%、12%、

Ⅷ）是一种供静脉输注、促进血液凝固的止血制剂。人正常凝血过程中的凝血因子Ⅷ的缺陷会导

致一种严重的遗传性出血性疾病—甲型血友病[1]。该病可分为重型、中型、轻型及亚临床型，轻型多发生在青年期，运动、拔牙或手术后出血不止，亚临床型无临床症状，仅在大手术时才出血不止[2]。根据世界血友病联盟的估算，中国血友病患者数量约为6-10万人，4/5为凝血因子Ⅷ缺乏，其中超过一半为重度患者[3]。但是目前国内市场上的FⅧ产品严重不足，经常会出现断药的情况，危害患者的生命。我们博雅公司近年开始开发FⅧ的分离纯化工艺，以期能为血友病患者提供更多安全、有效的药品。

14%，调节pH值至7.0。在优选出的铝胶加量时，pH值分别调节至6.7、6.9、7.1、7.3，考察pH值对提

取效果的影响。

1.2.4酸沉淀向铝胶吸附离心后的上清液中，根据每毫升上清液体积加入肝素钠2IU的方法加入

肝素钠。调节pH值，使溶液成酸性，降温至10-

13℃，转速14000rmp/min离心12-18min，去沉淀，取上清液进行凝血因子 …… 此处隐藏：5551字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……