第二十五章 病毒感染的检查方法与防治原则

第二十五章病毒感染的检查方法 与防治原则

第一节

病毒感染的检查

病毒感染的检查电镜直接观察 病毒颗粒 查病毒 检测内容 光镜检查包含体

病毒抗原病毒核酸

分离培养

病毒酶类：如逆转录酶查特异性抗体

一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：1.标本用“双抗”或两性霉素B处理 2.低温保存，尽快送检

3.血清学诊断采双份血清

二、病毒的分离与鉴定(一)病毒的分离培养细胞培养(cell culture) 鸡胚接种(egg inoculation) 动物接种(animal inoculation)

二、病毒的分离与鉴定一般程序：动物接种 标本无菌处理

指标阳性 指标阴性

病毒鉴定 盲传2~3代 指标阴性 病毒阴性

鸡胚培养 细胞培养

(一)病毒的分离培养1.细胞培养单层细胞培养(monolayer cell culture)

分类悬浮细胞培养(suspended cell culture) 原代细胞(primary cell)

细胞种类 二倍体细胞(diploid cell)传代细胞系(continuous cell line)

病毒的细胞培养

细胞培养瓶

单层细胞

1.细胞培养(1)原代和次代细胞培养组织

剪碎培养基

组织块

蛋白酶

分散的单个细胞

单层细胞 (原代细胞)

传代培养 单层细胞 (次代细胞)

1.细胞培养(1)原代和次代细胞培养 特点：①对多种病毒敏感

②生长能力有限, 获取成本高③可携带潜伏病毒

1.细胞培养(2)二倍体细胞培养体外分裂50~100代仍保持二倍体染色体 数目，可用于病毒分离和疫苗生产。特点：①对多种病毒敏感 ②不带异种蛋白(人源性)

③不带病毒，无致瘤潜能④可传50代左右

1.细胞培养(3) 传代细胞培养特点：①对多种病毒敏感性高 ②繁殖能力高，传代时间长

③有致癌危险，不能用于疫苗生产

2.鸡胚培养采用孵化9~14天的鸡胚绒毛尿囊膜(allantocherion) 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔(allantoic cavity) 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔(amniotic cavity) 流感病毒的初次分离 卵黄囊(yolk sac) 嗜神经病毒

接种部位

2、鸡胚培养优点：易管理，不带微生物，成本较低 缺点：操作程序复杂