高二生物2.2.1 动物细胞培养和核移植技术学案
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术(学案)
【自主学习】
1.动物细胞工程常用的技术手段有 、 、 、 等,其中 是其他动物细胞工程技术的基础
一、动物细胞的培养
1、概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_________________,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞______________和______________。
2、过程
①将从健康的动物体内取出的组织块剪碎,加入 或 处理一段时间后,组织块就会分散成单个细胞。对动物细胞进行培养时,要求培 养皿或培养瓶内表面 ;当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会 ,这种现象称为细胞的 。人们通常将动物组织消化后的初次培养称
为 。
②贴满瓶壁的细胞需要重新用 处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,这样的培养称为 。细胞传代至10代~50代左右时,增殖会逐渐减慢,以至于完全停止,但少部分细胞会克服寿命的极限, 获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正在朝着等同于癌细胞的方向发展。
3、条件
(1)培养液应进行_________________处理。
(2)合成培养基成分:_________________、_________________、_________________、无机盐、微量元素,通常需加入______________、血浆等。
(3)温度和pH:适宜温度:____________±0.5℃;pH:_________________。
(4)气体环境:主要有O2和CO2,_________________是细胞代谢所必需的,______
_________主要维持培养液的PH。
4、应用:如_________________疫苗、干扰素、_________________的生产。
二、动物细胞核移植技术和克隆动物
1、动物核移植
将动物的一个细胞的_________________,移入一个已经去掉细胞核的___________中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。
2、种类:⑴_________________移植。⑵ _________________移植。
3、过程
(1)取供体_________________ →供体细胞培养。
(2)从卵巢中采集_________________ →在体外培养到_______________________ →去核。
(3)将供体细胞注入_____________________ →使两细胞____________→供体核进人受体卵母细胞→构建_________________。
(4)将胚胎______________到代孕母体内→生出与供体遗传物质基本相同的个体。
4、应用
(1)加速家畜_________________进程,促进优良畜群繁育。
(2)保护_________________物种。 (3)生产_________________。
(4)作为异种移植的_____________。 (5)用于_________________的移植
【重难热点归纳】
1、动物细胞培养的过程
物器官、组织
10代细胞 50代细胞……
2、动物细胞培养与植物组织培养的区别。
动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之处,也有许多不同点。一是它们用的培养基
不同,植物组织培养用的一般是固体培养基,而动物细胞培养用的一般是液体培养基。第二是它们的培养基的成分不同。动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素,另外还有动物血清。植物组织培养所需要的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分,如矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加物,没有动物血清。第三是植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是同一种的细胞。
3、把握动物体细胞移植的特点
动物体细胞移植依据的原理还是细胞的全能性,与植物组织培养一样属于无性生殖。虽
然细胞核内具有发展成为一个完整个体所需的全套基因,但动物体细胞分化程度较高,因此很难表达全能性。卵细胞体积大,易于操作,含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。将体细胞核移植入去核卵细胞内,既保证了重组细胞的完整性,又能刺激体细胞核表达其全能性,发展成为一个新的个体。动物体细胞移植产生的新个体的亲本有三个:体细胞核供体、卵细胞细胞质供体、代孕母体。新个体细胞核基因型与体细胞核供体完全一样,因此新个体性状与体细胞核供体基本相同。卵细胞细胞质中也有少量的DNA,新个体性状与卵细胞细胞质供体有一些地方相同。代孕母体没有为新个体提供遗传物质,新个体性状与代孕母体基本没有联系。
【经典例题剖析】
1.为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液,选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理
A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.盐酸 D.胰脂肪酶
[解析]在动物组织细胞的间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,它们将细胞网络起来形成具有一定的弹性和韧性的组织和器官,而弹性纤维易被胰蛋白酶在中性略偏碱性环境下催化分解,而胃蛋白酶在pH为1.8左右催化效率最高,此环境动物细胞被破坏。 [答案]B
2.下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是
A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株
[解析]考查动物细胞培养与植物组织培养的主要区别。动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之处,也有许多不同点。其主要不同点是它们的培养基的成分不同。动物细胞培养的培
养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素,另外还有动物血清。植物组织培养所需要的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分,如矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加物,没有动物血清。 [答案]A
3.在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到
A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术
[解析]考查克隆羊产生的过程。多利羊的培育过程是:将一只母羊(A羊)卵细胞的细胞核吸出,得到不含核的卵细胞。然后,将实验室中培养的另一只母羊(B羊)的乳腺上皮细胞的细胞核注入到无细胞核的卵细胞中并进行电刺激,这样就通过核移植技术形成了一个同时含有A羊核遗传物质和B羊细胞质的重组卵细胞。融合后的卵细胞经过体外细胞培养形成早期胚胎。然后把这个胚胎移植到第三只羊(C羊)的子宫中,让C羊为胚胎发育提供发育场所和营养物质,这个过程利用了胚胎移植技术。胚胎就在C羊子宫内发育成熟。C羊产下的
羊就是克隆羊多利。从以上分析可以看出,多利产生的过程中没有使用基因工程技术。
[答案]:D
【预习自测】
1、动物细胞工程技术的基础是 ( )
A、动物细胞融合 B、胚胎移植 C、动物细胞培养 D、核移植
2、在生物工程中一般都要用到酶,下列酶中属于动物细胞工程最常用的工具酶( )
A.限制酶 B.DNA连接酶 C.果胶酶 D.胰蛋白酶
3、在动物细胞培养过程中,使用胰蛋白酶的目的是 ( )
A.使动物组织分散为单个细胞进行培养 B.去掉细胞壁成为原生质体
C.去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D.促进蛋白质水解为多肽
4、在进行动物细胞培养时,通常选用的培养材料是 ( )
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