食用菌多糖的保健作用探讨与提取工艺研究

第24卷第5期

哈尔滨师范大学自然科学学报

NATURALSCIENCESJOURNALOFHARBINNORMALUNIVERSITY

Vo.l24,No.52008

食用菌多糖的保健作用探讨与提取工艺研究

顾 红 于丽薇

(哈尔滨学院)

*

=摘要> 对食用菌多糖的保健功能和一般提取方法进行了探讨.期望能对今后

食用菌多糖的研究和应用有所帮助.

关键词:食用菌多糖;保健作用;提取

统,诱导产生IFN(干扰素)、TNF(肿瘤坏死因子)

0 引言

食用菌是一大类有大型子实体的高等真菌,

俗称蘑菇或蕈,含有人体所需要的多种营养成分,蛋白质含量非常之高.重要的是,食用菌还含有对人体有保健治疗价值的有效成分.如:真菌多糖、腺苷、嘌呤、黄酮、牛黄酸、有机酸等有效成分.这些有效成分若提纯后配合协同使用,可产生意想不到的结果,对有些疑难杂症有非常好的疗效,可彻底恢复身体的机能.由于这些成分独特的保健治病价值,已引起国内外医药科研工作者的重视,特别是其中的真菌多糖.

等多种免疫因子;(3)促进细胞中RNA、DNA和蛋白质的合成,提高细胞内环核苷酸(cGMP、cAMP)的含量.香菇多糖是一种胸腺依赖型T细胞导向并有巨噬细胞参与的特殊免疫剂,它能增强宿主巨噬细胞吞噬率,活化T细胞,恢复或刺激T细胞的功能.1.2 抑制肿瘤作用

目前已知约有50多种食用菌具有一定的抗癌作用.菇类抑制癌症的主要成分是多糖体,这类化合物具有-13-苷链连接的己糖主链和-16-苷链连接的己糖支链构成的葡聚糖结构.食用菌菌丝体和子实体中含有的多糖类物质,不仅能增强机体的免疫功能,而且还具有抑制肿瘤生长的作用.灵芝多糖、香菇多糖、茯苓多糖和裂褶多糖等已用于临床治疗肿瘤.绝大多数食用菌多糖的抗肿瘤作用是通过增强宿主免疫调节功能即宿主介导抗肿瘤活性来实现的.它们对肿瘤细胞没有直接杀伤力,没有毒素和副作用,而是通过活化巨噬细胞功能、促进T细胞增殖、诱导某些免疫因子产生等方式抑制肿瘤生长.

1 食用菌多糖的保健作用

食用菌具有多种功效因子和较高的药用价

值,部分食用菌本身就是传统的名贵中药.归纳起来,食用菌中的多糖主要有以下几方面的保健功效.

1.1 增强机体免疫力

人体免疫系统是人体内保持健康、避免发生各种疾病的防御安全系统.灵芝多糖作为生物免疫调节剂,主要通过以下几个途径作用于人体免疫系统:(1)激活巨噬细胞和T细胞等免疫细胞活性;(2)激活网状内皮系统、补体系统和免疫系

收稿日期:2008-04-18

*黑龙江省教育厅2004年科学技术研究(指导)项目(10543067)

1.3 降低胆固醇、降血压和抗血栓作用有人研究了24种食用菌对实验小鼠血液中胆固醇含量的影响,发现蘑菇、香菇、金针菇、木耳、毛木耳、银耳和滑菇等9种食用菌的子实体均具有降低胆固醇的作用,其中金针菇、蘑菇和木耳具有与香菇几乎相同的降低胆固醇作用,尤其以金针菇为最强.香菇多糖、银耳多糖可促进胆固醇代谢,从而降低其在血清中的含量.灰树花也有类似的作用.存在于灵芝、香菇等中的皂苷、多酚和黄酮类等活性物质降血脂效果明显.胖症和糖尿病等功效.

2 保健作用研究现状

日本医学专家用灰树花多糖进行抗肿瘤试验,结果表明,灰树花多糖的抑瘤率可达86.5%,比国际认证的抗癌新药香菇多糖抑制率高32%.DrHughes报道,AIDS病人服用灰树花多糖6周后,HIV阳性即可转为阴性.因此,灰树花提取物作为癌症的有效抑制剂,最近已被美国FDA批准1.4 抗疲劳、抗衰老作用

近年来研究认为,衰老与自由基引起生物膜的脂类过氧化,导致膜结构损伤和功能失活具有密切关系.生物膜上不饱和脂肪酸过氧化后,膜功能受损致细胞功能障碍,使细胞变性、死亡,引起多种疾病和衰老.据林志彬等研究,灵芝、冬虫夏草、香菇、银耳和猴头等均可增强机体对运动负荷的适应能力,具有抗疲劳功能.据实验

[4]

,灵芝能

增强老年小鼠血中SOD活力,降低血中MDA的含量,延长果蝇的寿命.提示灵芝通过增强酶的活

力,提高机体清除自由基的能力,从而减少细胞的变性和死亡,达到抗衰老的作用.

1.5 抗病毒作用

许多研究证明,多糖对多种病毒,如艾滋病毒(HIV1)、单纯孢疹病毒(HSV1,HSV2)、巨细胞病毒(CMV)、流感病毒、囊状胃炎病毒(VSV)等有抑制作用.香菇中双链核糖核酸(d-RNA)能使小鼠体内诱导生成干扰素,并进一步阻止鼠体内流感病毒和兔口炎病毒的增殖.裂褶菌多糖可提高感染仙台病毒(Sendaiviru)小鼠的存活率,且有效抑制病毒的扩散.带有肽残基的云芝多糖也具有明显的抗病毒作用,已经制成药物用于临床治疗慢性肝炎,并用于肝癌的预防.

1.6 抗氧化作用

已发现许多食用菌多糖具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的活性,起到保护生物膜和延缓衰老的作用.具抗氧化活性的多糖还有灵芝多糖、凤尾菇多糖、香菇多糖、虫草多糖、短裙竹荪多糖、糙皮侧耳多糖、猴头多糖、木耳多糖和虎奶菇多糖.另外,食用菌所含的多种维生素如VC、VA、VE及胡萝卜素和SOD等也具有消除人体的自由基的功效.食用菌除上述功能外,还有止血消炎、清热解毒、润肺益气、健脾和胃、补肾利尿、强精护扶、健脑等医疗保健功能.有些食用菌或其多糖还有抗辐射、抗突变、抗菌、预防肥

直接进入二期临床.由于其剂量小,毒副作用少,而受到癌症患者的欢迎.灵芝多糖是灵芝中含有的主要生物活性成分,具有抗肿瘤、抗氧自由基、抗衰老、提高免疫力、活血化淤等生物活性.

3 提取的一般方法

3.1 材料与试剂3.111 材料

实验用的食用菌干燥子实体(实验前将材料洗净凉干备用);SpehadexG75:上海医药采购站供应;真空浓缩仪;离心机(3000r/min);超声波细胞粉碎机(400W,2s,150次);真空干燥器;搅拌器;电热恒温水浴锅;温度计;过滤装置.3.112试剂

分析纯试剂:95%乙醇;0.1mol/L的氯化钠溶液;其他试剂均为国产分析纯试剂3.2 提取工艺3.211 工艺流程

食用菌实体)粉碎)热水浸提)过滤)浓缩)脱蛋白)沉淀)离心分离)多糖粗品)

SpehadexG75柱层析分离)多糖精品.3.2.2 提取方法

称取一定量的食用菌实干燥子体,粉碎,过40目筛,于不锈钢锅中热水浸提,在浸提液中用超声波细胞粉碎机(400W,2s,150次),数小时后,用4层尼龙纱布过滤,除滤渣;真空浓缩仪浓缩;用Sevag法去蛋白,用3倍的95%的乙醇沉淀5小时,进行离心(离心机,3000r/min),得到食用菌多糖粗品,然后将多糖粗品用0.1mol/L氯化钠溶液配制成1%溶解液,在Speha2dexG75柱层析分离上进行柱层析分离,利用0.1mol/mL氯化钠溶液洗脱至无糖检出,用苯酚-硫酸法比色跟踪检测;收集含糖部分洗脱液,经透析冷冻干燥得多糖精品.3.3 食用菌多糖的分离纯化

为进一步纯化多糖,对提取的粗多糖分别进行醇析和Sevage法处理去除蛋白.

醇析提纯食用菌多糖:将粗多糖溶于蒸馏水中配成8%~10%浓度,边搅拌边加入一定量95%乙醇,使最终混合液中乙醇浓度达到70%,乙醇添加完毕后继续搅拌5min,静置30min后经4000rpm离心15min,收集沉淀物并反复3次醇析沉淀直至得到较纯真菌多糖.适当干燥后采用Sevage法去除蛋白.操作时将一定量10%浓度的真菌多糖(经酒精提纯)置适量大小烧杯中,控制温度25e,按比例加入氯仿-正丁醇混合液,搅拌30min,再经4000rpm离心20min,分离出水层,浓缩并干燥后即得较纯食用菌多糖.

醇析法不一定能得到纯的多糖,若要得到单一多糖还需要更加精细的方法,例如色谱、电泳、

超滤等技术进行分离纯化,其中最常用的方法是色谱法.

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