尼美舒利对舌鳞癌移植瘤血管内皮生长因子的影响

目的研究环氧化酶-2(COX-2)抑制剂尼美舒利(NIM)对人舌鳞癌裸鼠移植瘤的抑制作用,分析NIM对血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响,进一步探讨其抑癌机制。方法取人舌鳞癌Tca-8113细胞接种于16只裸鼠皮下,建立人舌鳞癌裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组和NIM治疗组,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测裸鼠移植瘤组织VEGF mRNA表达。结果 NIM治疗组裸鼠移植瘤组织VEGF mRNA水平

山西医药杂志 21 00年 1 2月第 3 9卷第 1上半月 S a x Me, ee e 00 Vo. 9 No 1 h i t 2期 hn i dJ D cmbr2 1, 13, . 2teFr s

尼美舒利对舌鳞癌移植瘤血管内皮生长因子的影响山西医科大学( 3 0 1郝凤翔武云霞 000) 【摘要】目的 研究环氧化酶一 ( OX 2抑制剂尼美舒利 ( M)人舌鳞癌裸鼠移植瘤的抑制作用， 2 C -) NI对分取人舌鳞癌 T a8 1细 c-1 3析 NI对血管内皮生长因子 ( GF基因表达的影响，一步探讨其抑癌机制。方法 M VE )进

胞接种于 1 6只裸鼠皮下，立人舌鳞癌裸鼠移植瘤模型，机分为对照组和 NI治疗组，转录一合酶链反应建随 M反聚( - C )测裸鼠移植瘤组织 VE NA表达。结果 NI治疗组裸鼠移植瘤组织 VE NA水平均 RT P R检 GF mR M GF mR低于对照组，异有统计学意义(< 00)差 P . 5。结论 N M可下调 VE I GF基因表达，作用可能是 C -制剂该 OX 2抑

抑制肿瘤血管生成从而抑制肿瘤生长的机制之一。【键词】血管内皮生长因子类；舌肿瘤；尼美舒利关

I lu nc fni e u i a c a n t ei lg o h f c o xp eso o m a o u an e e g a t n n e nf e eo m s ldeon v s ulr e do h la r wt a t r e r s in f hu n t ng e c c r x no r fs i ud

m ie H A O n xi c Fe g- ang,W U n— a. Sh Yu xi anxiM e c dialUni e st, v r iy Tai an 03 001, yu 0 Chia n

[ sr c] Obe t e Toiv siaeteifu n eo i s l e NI Ab ta t jci v n e t t h nle c fnme ui ( M)o a c lre d t eilg o h fc g d n v s ua n o h l rwt a— at r( o VEGF)e p e so fh ma o g e c n e e o r f si u e mie a d t x lr h c a im n i h b— x r s in o u n t n u a c rx

n g a t n n d c n o e p o e t e me h n s o n i itng c nc r M eho s H um a c一 13 t ngu a c r c ls w e e i oc a e u u a o 1 n a hy i de m ie i a e . t d n T a 81 o e c n e el r n ult d s bc t ne usy i t m c nu c t s a ih x no a tm o l. T h ie w e e dii d r nd m l nt I h r p o nd on r o . The O e t bl e gr f des s e m c r vde a o y i o N M t e a y gr up a c tolgr up

i h b t r a e wa c e s d n i io y r t s a c s e .RT— CR wa s d t a u e t elv l fmRNA fVE P s u e o me s r h e o e o GF i e o r fsts u .R . x n g a t i s e e ns is Com p r d u t a e w ih o r gr p, t e r s i V EG F RN A was i fc nty e c d n e gr fs t c ntol ou he xp e son of m sgniia l r du e i x no a t t m ori N I he a ou P< 0.0 . Co lso u n M t r py gr p( 5) ncu in N I ou d d M c l own r gu a e t xpr s i f VEGF n - e l t he e e son o ge e,

wh c y b n f h c a ims i v l e n a g o e e i n i iin o GF i h b t r ih ma eo e o e me h n s n o v d i n i g n ss ih b to fVE t n i i . o

[ ywod] Va c lre d teil rwt a tr; To g en o ls; Ni s l e Ke r s s ua n o h l o h fco s ag n u e pams me ui d

肿瘤进展依赖于新生血管形成，肿瘤细胞可产生多种因子影响血管生成和肿瘤生长。 C o和 a

药股份有限公司) R, NA抽提试剂 (海华舜， 2 1,上 W6 2 ) VE GF (上海生工 )反转录一合酶链反应 ( T

P R)剂，聚 R -C试 ( eme t公司 )二氨基联苯胺 ( AB显色试剂盒 ( y d F r ns, D ) Z me公司 )。 1 2方法 .

P ec t 1 rsot _发现环氧化酶 ( OX)诱导型 C X 2 C的 O一在多种肿瘤细胞中表达上调，与肿瘤新生血管的且生成密切相关； O一 C X 2抑制剂可抑制血管生成及

肿瘤生长，在舌鳞癌方面的研究报道不多。本实但验旨在研究 C _制剂尼米舒利 ( M) OX 2抑 NI对舌鳞

1 2 1移植瘤模型建立：1 . . 6只裸鼠随机分为对照组和

NI治疗组，组 8只，裸鼠右下腹股沟区皮下接种处 M每于于对数生长期的 Tc- 1 3细胞 1X 1 mL 0 1。 a 1 8 0/, . 1 mL

癌裸鼠移植瘤组织血管内皮生长因子 ( GF基 VE )因表达及肿瘤生长的影响，以期进一步探讨 c x O一2制剂的作用机制。抑1材料和方法1 1材料 . 1 1 1人舌鳞癌细胞 T a8 1 .. c一 1 3细胞株：自中国科学院购上海动物研究所。由本实验室传代培养。培养液为含胎牛血清 R MI 6 0培养基，. 5胰蛋白酶消化传代。 P - 4 1 0 2

NI治疗组：种后第 1 M接 2天给 N M,胃剂量 3 g k; I灌 0m/ g对照组灌注等量生理盐水，验共 3 。实 8d 12 2 R - C检测 v G . . T P R E F基因表达：移植瘤组织 5~取 O 1 0 m, T i l试剂盒 ( i o公司 )明一步法提取总 0 g按 ro z TM Gb c说 R NA, D A/R A测定仪 (国 P a r a产品 )定用 N N英 hr c ma i测 R NA纯度并定量。反转录反应后，异性 P R扩增 V G 特 C E F

和内参照甘油醛一一 3磷酸脱氢酶( A D。引物序列： G P H)还原型磷酸甘油醛脱氢酶 ( AP H)游一 C C C AG T G— G D上 T C T A A T TCAG CAA,游一下 AGA CACAACG T A TC GA AC TT ( 0 p; 3 8 b )

1 1 2无特异性病原菌 (P ) B L/裸鼠：6只， .. S F级 A BC 1雌性，~ 5龄，质量 1~2,国医学科学院实验动物 4周体 8 2g中研究所提供

(ck 0 2 0 1。 sx 2 0—0 0 )1 1 3药物及试剂： P - 6 0培养基 ( ic )胎牛血 .. R MI 4 1 Gbo,

vE F上游 C T G G AC C T C G A G: C G T G r T C A G G

C,下

游一 GAAG CTC rCT Ar CTC CT GTG CTGGC ( b, I 1 6 p) 5, 9 L

P R产物在 2琼脂糖凝胶中电泳，化乙啶 ( B显色， C 溴 E)目的条带用图像分析系统作吸光度 ( )定， E F与 G P A测 V G A—D A值比值作为 mR A的相对含量。 H N

清 (州四季青 )胰蛋白酶 (海生工 ) N M(庆华邦制杭，上，I重通信作者：云霞武

1 3统计学处理 .