轧盖密封完好性试验

轧盖密封完好性试验

目一、概 述

录二、试验准备

三、试验步骤

四、再验证周期

概 述

一、概述1、试验目的：用微生物侵入试验对冻干粉针剂 车间轧盖密封系统进行挑战性试验，以确认轧 盖后容器密封系统的完好性。 2、试验概述：取西林瓶灌装入已灭菌培养基， 在正常生产线上抽真空、压塞、轧盖。此后， 将容器密封面浸入高浓度运动性菌液中，取出 并检查是否有微生物侵入，以确认容器密封系 统的完好性。同时，须做阳性对照试验，确认 培养基的促菌生长能力。

试验准备试验准备

洗

瓶

胶塞处理

培养基

菌悬液

二、试验准备批量：1000瓶/批 1、洗瓶: 清洗西林瓶1100只，经305℃干热灭菌12分钟 后送至灌装间备用。2、胶塞处理: 清洗胶塞1100只，经121 ℃湿热灭菌20分钟后 备用。

二、试验准备3、配制培养基:3.1 预先对配制、灌装系统按照冻干粉针剂无菌操 作要求进行清洁、灭菌。 3.2 按照培养基生产厂商要求，每批按 TSB(胰 酪胨大豆肉汤培养基)32.3g,加1L注射用水 的比例进行配制，加热溶解并标定至4.5L,置 于灭菌柜中用纯蒸 汽121℃灭菌20min。

二、试验准备3.3将灭菌后的培养基(TSB配制液)通过 未装滤膜及滤芯的过滤系统，在灌装机 的数控器上调节好装量(3.5ml)进行灌 装半加塞。3.4将灌装半加塞的培养基在百级层流保护 下转移至冻干机内抽真空，结束后全压塞、 出箱、轧盖。

二、试验准备4、制备微生物菌悬液：4.1从铜绿假单胞菌(ATCC 9027)的新鲜斜面上 取一整环培养物，分别接入含6ml无菌培养基的 试管中，在30~35℃下培养18~24h。 4.2将每管的培养物分别转入含600ml相同培养基 的容器内，于30~35℃下培养18~24h。在培养结 束时，能明显见容器内培养基出现浑浊。 4.3在微生物侵入试验开始时，所用菌悬液浓度 (活菌数)必须达到1×106CFU/ml。

试验步骤

营养试验微生物侵入试验 阳性对照实验 微生物侵入试验后 营养试验

三、试验步骤1、试验样品的制备:1.1从1000瓶培养基中取150瓶作为本次试验的试 样品。

1.2用剪刀轻轻从斜侧面去除至少50瓶试样品的整 个铝盖(注意不要破坏其密封口，将去铝盖时 不慎损坏容器密封性的所有试样品剔除),另 取80瓶带盖试样品，将每一试样品倒转，使培 养基与西林瓶内表面及胶塞充分接触，在30~ 35℃竖立倒置培养14天。

三、试验步骤1.3在培养期内，当试验中发现任何带盖试样品长 菌时，则试验无效，须弃去全部试样品，重 新从头开始试验。

三、试验步骤2、确认培养基促菌生长能力―营养试验：2.1所有试样品培养14天均不长菌时，

从上述1.2 试样品中随机取20个带盖试样品，每个试样 品内接种100CFU铜绿假单胞菌。在30~35℃ 下培养7天，或培养至所有试样品都呈阳性结 果。

三、试验步骤2.1.1若7天内，所有接种铜绿假单胞菌的试样品 中，微生物生长良好，则容器内培养基的促菌 生长能力可判为合格。使用革兰染色后，并置 于紫外灯下，培养基呈蓝绿色荧光，则确认试 样品容器内生长的菌为接入的铜绿假单胞菌， 即为阳性。

2.1.2若7天内，所有接种铜绿假单胞菌的试样品 中，微生物生长条件不好或经鉴别后受其它菌 种污染，则试验失败，需重新作营养试验。

三、试验步骤3、微生物侵入试验操作步骤:微生物培养及侵入试验应在不影响生产 环境的地方(中心化验室阳性室)进行。